| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 小麦条锈病的危害与研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 小麦条锈病的分布及危害 | 第13页 |
| 1.1.2 小麦条锈病的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 小麦成株期抗条锈病研究概况 | 第14-18页 |
| 1.2.1 植物成株抗性概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 小麦成株期抗条锈病研究 | 第15-18页 |
| 1.3 高通量测序技术及其应用 | 第18-21页 |
| 1.3.1 全基因组测序 | 第18-19页 |
| 1.3.2 转录组测序 | 第19-20页 |
| 1.3.3 数字表达谱分析 | 第20-21页 |
| 1.4 WRKY转录因子(transcription factors TFs)研究进展 | 第21-26页 |
| 1.4.1 WRKY TFs的结构特征及与分类 | 第22-23页 |
| 1.4.2 WRKY TFs的起源与进化 | 第23页 |
| 1.4.3 WRKY TFs的生物学功能 | 第23-26页 |
| 1.5 本研究的目的意义与技术路线 | 第26-28页 |
| 1.5.1 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 1.5.2 本研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 兴资9104转录组测序与数字表达谱分析 | 第28-55页 |
| 引言 | 第28-29页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第29页 |
| 2.1.1 材料 | 第29页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 实验材料的准备与取样 | 第29-30页 |
| 2.2.2 总RNA提取及检测 | 第30页 |
| 2.2.3 高质量cDNA测序文库的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.4 转录组测序与数字表达谱分析 | 第31-33页 |
| 2.2.5 cDNA第一链的合成与检测 | 第33-34页 |
| 2.2.6 引物的设计与quantitative Real Time-PCR(qRT-PCR)分析 | 第34页 |
| 2.2.7 序列生物信息学分析 | 第34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-53页 |
| 2.3.1 小麦总RNA检测结果 | 第34-35页 |
| 2.3.2 转录组测序与数据分析 | 第35-43页 |
| 2.3.3 数字表达谱分析 | 第43-51页 |
| 2.3.4 部分差异表达基因的模式分析 | 第51-53页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 兴资9104成株抗性相关WRKY转录因子研究 | 第55-104页 |
| 引言 | 第55-56页 |
| 3.1 材料、试剂及仪器 | 第56页 |
| 3.1.1 材料 | 第56页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-74页 |
| 3.2.1 实验材料的准备与取样 | 第56页 |
| 3.2.2 总RNA提取与检测及cDNA第一链的合成与检测 | 第56-57页 |
| 3.2.3 候选WRKY转录因子的克隆 | 第57-58页 |
| 3.2.4 PCR产物的回收 | 第58页 |
| 3.2.5 PCR产物与载体的连接 | 第58-59页 |
| 3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第59页 |
| 3.2.7 连接产物的转化 | 第59页 |
| 3.2.8 阳性克隆筛选与检测 | 第59-60页 |
| 3.2.9 质粒的小量提取及测序 | 第60页 |
| 3.2.10 Rapid-amplification of cDNA ends (RACE) | 第60-62页 |
| 3.2.11 基因组DNA的提取 | 第62-63页 |
| 3.2.12 基因组序列扩增与基因结构分析 | 第63页 |
| 3.2.13 染色体定位 | 第63页 |
| 3.2.14 序列生物信息学分析 | 第63页 |
| 3.2.15 WRKY基因在成株期与苗期的表达谱分析 | 第63-64页 |
| 3.2.16 基于BSMV-VIGS技术的WRKY基因功能初步分析 | 第64-68页 |
| 3.2.17 成株期BSMV-VIGS体系的优化 | 第68页 |
| 3.2.18 亚细胞定位分析 | 第68-69页 |
| 3.2.19 转录激活作用验证 | 第69-71页 |
| 3.2.20 WRKY蛋白的原核表达 | 第71-74页 |
| 3.3 结果与分析 | 第74-100页 |
| 3.3.1 候选WRKY转录因子的克隆 | 第74页 |
| 3.3.2 WRKY转录因子的序列分析 | 第74-76页 |
| 3.3.3 WRKY基因在成株期与苗期的表达谱分析 | 第76-78页 |
| 3.3.4 WRKY基因功能分析 | 第78-86页 |
| 3.3.5 激素处理后的表达谱分析 | 第86-87页 |
| 3.3.6 TaWRKY41与SA信号通路关系的初步验证 | 第87-88页 |
| 3.3.7 TaWRKY41与TaWRKY79 RACE扩增 | 第88页 |
| 3.3.8 TaWRKY41与TaWRKY79基因组结构分析 | 第88-89页 |
| 3.3.9 TaWRKY41与TaWRKY79染色体定位分析 | 第89-90页 |
| 3.3.10 TaWRKY41与TaWRKY79的多序列比对 | 第90-92页 |
| 3.3.11 TaWRKY41与TaWRKY79的进化树分析 | 第92-94页 |
| 3.3.12 TaWRKY41与TaWRKY79的WRKY结构域的进化树分析 | 第94-96页 |
| 3.3.13 TaWRKY41与TaWRKY79在组织器官特异性分析 | 第96页 |
| 3.3.14 TaWRKY41与TaWRKY79的亚细胞定位分析 | 第96-97页 |
| 3.3.15 TaWRKY41与TaWRKY79的转录激活域分析 | 第97-99页 |
| 3.3.16 TaWRKY41与TaWRKY79蛋白的原核表达 | 第99-100页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第100-104页 |
| 第四章 全文结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| 附录 | 第118-129页 |
| 缩略词 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 作者简介 | 第131页 |
