摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词对照表 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 国内苹果砧木应用现状 | 第12-13页 |
1.1.1 苹果的栽培历史 | 第12页 |
1.1.2 我国苹果栽培品种 | 第12-13页 |
1.1.3 苹果栽培模式的演变 | 第13页 |
1.2 植物组织培养技术的发展与应用 | 第13-16页 |
1.2.1 植物组织培养研究历史 | 第13-14页 |
1.2.2 外植体和培养基条件对组培的影响 | 第14页 |
1.2.3 植物生长调节剂对组培的影响 | 第14-15页 |
1.2.4 植物组织培养在苹果中的应用 | 第15-16页 |
1.3 植物不定根发生及其相关基因研究进展 | 第16-21页 |
1.3.1 植物激素对不定根形成的影响 | 第17-18页 |
1.3.2 不定根发生的基因调控 | 第18-21页 |
1.4 本研究目的及意义 | 第21-24页 |
第二章 苹果砧木组织培养的研究 | 第24-38页 |
2.1 苹果砧木无菌株系的建立 | 第24页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 实验试剂和仪器设备 | 第24页 |
2.1.3 实验方法 | 第24页 |
2.2 无菌材料的继代培养 | 第24-25页 |
2.3 苹果砧木的离体叶片再生实验 | 第25-26页 |
2.4 苹果砧木的诱导生根实验 | 第26页 |
2.5 结果与分析 | 第26-36页 |
2.5.1 苹果砧木的继代培养 | 第26-28页 |
2.5.2 苹果砧木的叶片离体再生体系的建立 | 第28-30页 |
2.5.3 苹果砧木组培苗的生根体系的建立 | 第30-36页 |
2.6 炼苗与移栽 | 第36-38页 |
第三章 嵌合ARRO-1基因的植物双元载体的构建及苹果遗传转化体系初探 | 第38-58页 |
3.1 实验试剂和仪器设备 | 第38页 |
3.1.1 实验试剂和仪器 | 第38页 |
3.2 不定根形成相关基因ARRO-1的克隆 | 第38-45页 |
3.2.1 植物RNA提取 | 第38-40页 |
3.2.2 目的基因的扩增 | 第40-41页 |
3.2.3 重组质粒的构建 | 第41-45页 |
3.3 植物双元表达载体的构建 | 第45-49页 |
3.3.1 ARRO-1过表达载体和RNAi表达载体的构建 | 第45-49页 |
3.4 叶片外植体抗生素选择压力的确定 | 第49页 |
3.5 苹果叶片的农杆菌侵染 | 第49-51页 |
3.5.1 农杆菌侵染步骤 | 第49-51页 |
3.6 结果与分析 | 第51-58页 |
3.6.1 植物总RNA提取结果 | 第51页 |
3.6.2 ARRO-1的获得及序列分析 | 第51-53页 |
3.6.3 重组质粒的筛选及验证 | 第53-56页 |
3.6.4 叶片外植体抗生素选筛选压结果 | 第56-58页 |
第四章 不定根生成相关基因ARRO-1启动子的功能分析 | 第58-66页 |
4.1 实验材料与仪器设备 | 第58页 |
4.2 ARRO-1的启动子表达载体的构建 | 第58-61页 |
4.2.1 目的基因的制备 | 第58-59页 |
4.2.2 pCAMBIA1305.1载体的制备 | 第59-60页 |
4.2.3 目的基因与载体的连接与转化 | 第60-61页 |
4.2.4 表达载体的验证 | 第61页 |
4.3 农杆菌侵染步骤 | 第61页 |
4.4 结果与分析 | 第61-63页 |
4.4.1 启动子的序列分析 | 第61-62页 |
4.4.2 启动子表达载体构建 | 第62-63页 |
4.5 结论 | 第63-66页 |
总结 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |