| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 图目录 | 第11-12页 |
| 表目录 | 第12-13页 |
| 英文縮略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 研究背景和意义 | 第14页 |
| 1.2 白细胞介素-2 | 第14-17页 |
| 1.2.1 IL-2分子结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 白细胞介素-2受体 | 第15页 |
| 1.2.3 IL-2生物活性 | 第15-16页 |
| 1.2.4 IL-2的临床应用 | 第16-17页 |
| 1.2.5 IL-2应用前景 | 第17页 |
| 1.3 毕赤酵母表达系统及其应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| 1.3.2 毕赤酵母表达载体 | 第18页 |
| 1.3.3 毕赤酵母表达系统的优点 | 第18页 |
| 1.3.4 毕赤酵母表达系统发酵条件 | 第18-19页 |
| 1.4 蛋白纯化技术 | 第19-20页 |
| 1.4.1 离子交换层析 | 第19-20页 |
| 1.4.2 疏水层析 | 第20页 |
| 1.4.3 凝胶过滤层析 | 第20页 |
| 1.5 研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 mhIL-2的大规模发酵及条件优化 | 第21-29页 |
| 2.1 材料和方法 | 第21-25页 |
| 2.1.1 主要试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.1.2 溶液及培养基配制 | 第21-23页 |
| 2.1.3 培养基最佳甲醇浓度确定 | 第23页 |
| 2.1.4 培养基最佳pH值确定 | 第23页 |
| 2.1.5 不同发酵上清mhIL-2 OD450值变化测定 | 第23-24页 |
| 2.1.6 mhIL-2大规模发酵 | 第24-25页 |
| 2.1.7 发酵液上清SDS-PAGE分析 | 第25页 |
| 2.2 结果 | 第25-27页 |
| 2.2.1 不同发酵上清mhIL-2 OD450值变化测定 | 第25-26页 |
| 2.2.2 酵母生长曲线测定 | 第26-27页 |
| 2.2.3 不同发酵时间表达产物SDS-PAGE检测 | 第27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 mhIL-2高效纯化方法建立 | 第29-35页 |
| 3.1 材料和方法 | 第29-30页 |
| 3.1.1 主要仪器和试剂 | 第29页 |
| 3.1.2 离子交换法 | 第29页 |
| 3.1.3 凝胶过滤法 | 第29-30页 |
| 3.1.4 SDS-PAGE电泳 | 第30页 |
| 3.1.5 mhIL-2浓度测定 | 第30页 |
| 3.1.6 纯化后样品冻干 | 第30页 |
| 3.1.7 mhIL-2体外活性检测 | 第30页 |
| 3.2 结果 | 第30-34页 |
| 3.2.1 离子交换法捕获目的蛋白 | 第30-32页 |
| 3.2.2 凝胶过滤法精纯目的蛋白 | 第32-33页 |
| 3.2.3 SDS-PAGE电泳检测mhIL-2纯度 | 第33页 |
| 3.2.4 mhIL-2浓度检测 | 第33-34页 |
| 3.2.5 mhIL-2体外活性检测 | 第34页 |
| 3.3 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 mhIL-2动物安全性试验 | 第35-43页 |
| 4.1 材料和方法 | 第35-37页 |
| 4.1.1 主要仪器、试剂和实验动物 | 第35页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 4.1.3 组织病理观察 | 第36-37页 |
| 4.1.4 小鼠血清中CD~(4+)分子和CD~(8+)分子ELISA检测 | 第37页 |
| 4.1.5 小鼠血液生化指标检测 | 第37页 |
| 4.1.6 检测项目与数据分析 | 第37页 |
| 4.2 结果 | 第37-42页 |
| 4.2.1 各组小鼠临床观察 | 第37页 |
| 4.2.2 各组小鼠脏器系数 | 第37-38页 |
| 4.2.3 不同组别小鼠脾脏大小比较 | 第38-39页 |
| 4.2.4 小鼠组织切片观察 | 第39-40页 |
| 4.2.5 小鼠血清中CD~(4+)分子和CD~(8+)分子ELISA检测 | 第40-41页 |
| 4.2.6 小鼠血液生化指标变化 | 第41-42页 |
| 4.3 讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
