| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 化学修饰对酶选择性影响的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2 固定化对酶选择性影响的研究现状 | 第12-18页 |
| 1.2.1 物理包埋法 | 第13页 |
| 1.2.2 物理吸附法 | 第13-14页 |
| 1.2.3 共价结合法 | 第14页 |
| 1.2.4 交联法 | 第14-15页 |
| 1.2.5 固定化方法的改进 | 第15-18页 |
| 1.3 非水相介质的使用对酶选择性影响的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.4 β-葡萄糖醛酸苷酶催化选择性研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 课题研究思路与主要内容 | 第20-21页 |
| 1.6 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 培养基 | 第22页 |
| 2.1.3 药品和试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.5 常用溶液配制 | 第24页 |
| 2.1.6 常用储备液 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 PGUS-E的诱导表达 | 第25页 |
| 2.2.2 PGUS-E细胞破碎 | 第25页 |
| 2.2.3 蛋白质浓度测定 | 第25-26页 |
| 2.2.4 PGUS-E的分离纯化 | 第26页 |
| 2.2.5 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
| 2.2.6 PGUS-E的化学修饰 | 第27-28页 |
| 2.2.7 铁磁性纳米粒子固定化PGUS-E | 第28-29页 |
| 2.2.8 有机溶剂脱水 | 第29页 |
| 2.2.9 不同水含量两相体系 | 第29页 |
| 2.2.10 酶活力计算 | 第29-30页 |
| 2.2.11 薄层分析（TLC） | 第30页 |
| 2.2.12 HPLC定量分析PGUS-E的选择率 | 第30-31页 |
| 第三章 化学修饰对PGUS-E选择性的影响 | 第31-49页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 PGUS-E的制备 | 第31-32页 |
| 3.3 PGUS-E的酶学性质研究 | 第32-34页 |
| 3.3.1 最适温度的测定 | 第32-33页 |
| 3.3.2 最适pH的测定 | 第33-34页 |
| 3.4 PGUS-E反应条件优化 | 第34-36页 |
| 3.4.1 最适温度的测定 | 第34-35页 |
| 3.4.2 最适pH的测定 | 第35-36页 |
| 3.5 修饰剂的选择 | 第36-39页 |
| 3.5.1 聚乙二醇衍生物（mPEG） | 第36-37页 |
| 3.5.2 小分子修饰PGUS-E | 第37-39页 |
| 3.6 DTNB修饰PGUS-E条件优化 | 第39-43页 |
| 3.6.1 不同浓度的DTNB修饰PGUS-E对酶活和选择率的影响。 | 第39-41页 |
| 3.6.2 不同修饰时间对酶活性和选择率的影响 | 第41-43页 |
| 3.7 DTNB修饰后酶学性质的研究 | 第43-45页 |
| 3.7.1 最适温度的测定 | 第43-44页 |
| 3.7.2 最适pH的测定 | 第44-45页 |
| 3.8 DTNB修饰后反应条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.8.1 最适温度的测定 | 第45-46页 |
| 3.8.2 最适pH的测定 | 第46-47页 |
| 3.9 PGUS-E-D催化GL反应进程曲线 | 第47-48页 |
| 3.10 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 铁磁性纳米粒子固定化对PGUS-E选择性的影响 | 第49-60页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 磁性纳米粒子固定化条件优化 | 第49-53页 |
| 4.2.1 酶量与载体的不同比例对固定化酶活的影响 | 第49-50页 |
| 4.2.2 固定化时间对酶活的影响 | 第50-51页 |
| 4.2.3 固定化温度对酶活的影响 | 第51-52页 |
| 4.2.4 固定化pH对酶活的影响 | 第52-53页 |
| 4.3 固定化后酶学性质的研究 | 第53-55页 |
| 4.3.1 最适温度的测定 | 第53-54页 |
| 4.3.2 最适pH的测定 | 第54-55页 |
| 4.4 固定化后酶反应条件的优化 | 第55-58页 |
| 4.4.1 最适温度的测定 | 第55-56页 |
| 4.4.2 最适pH的测定 | 第56-57页 |
| 4.4.3 对GAMG的选择率 | 第57-58页 |
| 4.5 PGUS-E-DFe催化GL反应进程曲线 | 第58-59页 |
| 4.6 小结 | 第59-60页 |
| 第五章 非水相介质对PGUS-E选择性的影响 | 第60-68页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 有机介质单相体系 | 第60-61页 |
| 5.3 两相体系 | 第61-62页 |
| 5.3.1 不同含水量两相体系中的酶活 | 第61页 |
| 5.3.2 含水量为 70%两相体系中酶的选择性 | 第61-62页 |
| 5.4 两相体系酶学性质研究 | 第62-64页 |
| 5.4.1 温度对酶活的影响 | 第62-63页 |
| 5.4.2 pH对酶活的影响 | 第63-64页 |
| 5.5 两相体系反应条件优化 | 第64-66页 |
| 5.5.1 温度对酶活的影响 | 第64-65页 |
| 5.5.2 pH对酶活的影响 | 第65-66页 |
| 5.6 两相体系催化GL反应进程曲线 | 第66-67页 |
| 5.7 小结 | 第67-68页 |
| 第六章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 6.1 结论 | 第68-69页 |
| 6.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
