| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第13-28页 |
| 1.1 Ghrelin概述 | 第13页 |
| 1.2 Ghrelin分子结构 | 第13-14页 |
| 1.3 Ghrelin受体类型及定位 | 第14-15页 |
| 1.3.1 Ghrelin受体类型 | 第14页 |
| 1.3.2 Ghrelin受体定位 | 第14-15页 |
| 1.4 Ghrelin作用机理 | 第15页 |
| 1.5 Ghrelin主要生理学功能 | 第15-16页 |
| 1.5.1 Ghrelin对GH释放的调节 | 第15-16页 |
| 1.5.2 Ghrelin介导细胞增殖 | 第16页 |
| 1.6 MAPK信号通路 | 第16-21页 |
| 1.6.1 MAPK信号通路概述 | 第16-17页 |
| 1.6.2 MAPK信号通路主要途径 | 第17-20页 |
| 1.6.3 细胞周期调控 | 第20-21页 |
| 1.7 转录组技术的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.8 基因芯片技术 | 第22页 |
| 1.8.1 基本原理 | 第22页 |
| 1.8.2 基本特点 | 第22页 |
| 1.9 高通量转录组测序 | 第22-24页 |
| 1.9.1 Illumina/Solexa基本测序原理 | 第23页 |
| 1.9.2 基本特点 | 第23-24页 |
| 1.10 单细胞转录组测序 | 第24-25页 |
| 1.10.1 基本原理 | 第24页 |
| 1.10.2 基本实验流程 | 第24页 |
| 1.10.3 基本特点 | 第24-25页 |
| 1.11 转录组测序技术在生命科学中的应用 | 第25页 |
| 1.12 体外受精概述 | 第25-26页 |
| 1.12.1 体外受精系统 | 第25页 |
| 1.12.2 体外受精进展 | 第25-26页 |
| 1.12.3 体外受精意义 | 第26页 |
| 1.12.4 哺乳动物早期胚胎发育 | 第26页 |
| 1.13 葡萄糖转运体 | 第26-27页 |
| 1.14 Ghrelin的研究意义及展望 | 第27-28页 |
| 2 实验一不同浓度Ghrelin对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第28-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.4 培养液成分 | 第28-29页 |
| 2.1.5 绵羊卵母细胞采集和体外成熟培养 | 第29页 |
| 2.1.6 不同浓度Ghrelin对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第29页 |
| 2.1.7 统计分析 | 第29-30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-31页 |
| 2.2.1 绵羊卵母细胞体外成熟培养不同发育形态观察 | 第30-31页 |
| 2.2.2 不同浓度梯度Ghrelin对绵羊卵母细胞成熟的影响 | 第31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 3 实验二Ghrelin对绵羊卵母细胞核成熟过程中转录组学影响 | 第33-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 实验仪器设备 | 第33页 |
| 3.1.4 培养液成分 | 第33-34页 |
| 3.1.5 绵羊卵母细胞的采集 | 第34页 |
| 3.1.6 绵羊卵母细胞的染色培养 | 第34页 |
| 3.1.7 Ghrelin对绵羊卵母细胞核形态变化影响 | 第34页 |
| 3.1.8 不同时期体外成熟绵羊卵母细胞单细胞测序 | 第34-38页 |
| 3.1.9 差异基因的荧光定量PCR验证 | 第38-41页 |
| 3.1.10 统计分析 | 第41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-60页 |
| 3.2.1 绵羊卵母细胞核形态随时间变化及统计 | 第41-44页 |
| 3.2.2 单细胞测序分析 | 第44-59页 |
| 3.2.3 ERK1、ERK2实时荧光定量PCR验证 | 第59页 |
| 3.2.4 CCNB2、CCNB3实时荧光定量PCR验证 | 第59-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-63页 |
| 3.4 小结 | 第63-64页 |
| 4 实验三Ghrelin对绵羊卵母细胞体外成熟卵母细胞受精及早期胚胎发育影响 | 第64-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第64-67页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第64页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第64页 |
| 4.1.3 实验仪器设备 | 第64页 |
| 4.1.4 培养液成分 | 第64-65页 |
| 4.1.5 绵羊卵母细胞的采集及体外成熟 | 第65页 |
| 4.1.6 精子的获能处理及卵母细胞的体外受精 | 第65-66页 |
| 4.1.7 发育相关基因GLUT1荧光定量PCR验证 | 第66-67页 |
| 4.1.8 统计分析 | 第67页 |
| 4.2 结果与分析 | 第67-71页 |
| 4.2.1 早期胚胎发育形态观察 | 第67-69页 |
| 4.2.2 Ghrelin对绵羊卵母细胞体外受精后胚胎卵裂影响 | 第69-71页 |
| 4.2.3 GLUT1实时荧光定量PCR验证 | 第71页 |
| 4.3 讨论 | 第71-74页 |
| 4.4 小结 | 第74-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
