致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
中英文缩略词 | 第11-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一部分 YAP在肝癌组织及肝癌细胞株中表达 | 第17-28页 |
1 材料 | 第17-26页 |
1.1 研究对象 | 第17页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第17-20页 |
1.3 实验步骤 | 第20-25页 |
1.4 统计分析 | 第25-26页 |
2 实验结果 | 第26-28页 |
2.1 YAP在肝癌组织及癌旁组织中的表达 | 第26页 |
2.2 YAP在肝癌细胞株中高表达 | 第26-28页 |
第二部分 YAP参与调控肝癌发生发展及耐药机制 | 第28-47页 |
1 材料与方法 | 第28页 |
2 主要试剂和仪器 | 第28-31页 |
2.1 主要试剂耗材 | 第28-29页 |
2.2 主要仪器设备 | 第29-31页 |
3 实验步骤 | 第31-38页 |
3.1 载体构建实验 | 第31-33页 |
3.2 肝癌细胞株的培养及转染 | 第33-34页 |
3.3 Western blot实验 | 第34-35页 |
3.4 细胞侵袭实验 | 第35页 |
3.5 实时荧光定量PCR实验 | 第35-36页 |
3.6 细胞凋亡实验 | 第36页 |
3.7 BrdU细胞增殖实验 | 第36-37页 |
3.8 统计学方法 | 第37-38页 |
4 结果 | 第38-47页 |
4.1 成功构建YAP过表达载体 | 第38页 |
4.2 过表达载体及小干扰序列转染效率的检测 | 第38-39页 |
4.3 MTT及BrdU细胞增殖实验检测YAP对细胞增殖能力的影响 | 第39-41页 |
4.4 Annexin-V/PI流式检测干扰及干扰后过表达YAP对细胞凋亡能力的影响 | 第41-42页 |
4.5 Transwell实验检测干扰及干扰后回补YAP后对HepG2和SMMC-7721侵袭能力的影响 | 第42-43页 |
4.6 干扰及干扰后回补YAP后检测凋亡相关蛋白及周期相关蛋白的表达变化 | 第43-45页 |
4.7 YAP通过PI3K/AKT信号通路增加对顺铂耐药敏感性 | 第45-47页 |
第三部分 YAP干扰抑制肝癌模型鼠肿瘤生长 | 第47-52页 |
1 材料 | 第47页 |
2 主要试剂耗材 | 第47-48页 |
3 实验步骤 | 第48-50页 |
4 结果 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
综述 | 第61-80页 |
参考文献 | 第68-80页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第80页 |