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基于磷酸化蛋白质组学构建平滑肌细胞应力信号转导网络

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
英文缩略语第14-16页
第一章 绪论第16-23页
    1.1 张应变、血管重建与VSMCs增殖第16-18页
    1.2 蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学研究现状第18-20页
    1.3 SILAC原理及应用第20-21页
    1.4 本文的主要工作第21-23页
第二章 实验材料及实验仪器第23-25页
    2.1 SILAC主要试剂、溶液及实验仪器第23-24页
    2.2 WB实验特异性抗体第24页
    2.3 其他实验试剂、仪器及溶液第24-25页
第三章 实验方法第25-30页
    3.1 SILAC及已标记VSMCs的张应变加载第25-26页
    3.2 SILAC磷酸化蛋白样品的制备及相关分析方法第26-28页
        3.2.1 磷酸化蛋白质及肽段的提取、定量、酶解与磷酸化富集第26-27页
        3.2.2 液相色谱与质谱分析第27页
        3.2.3 数据分析第27-28页
    3.3 模糊C均值聚类算法第28页
    3.4 细胞活性检测第28-29页
    3.5 统计学方法第29页
    3.6 其他实验方法第29-30页
第四章 结果第30-47页
    4.1 生理性张应变刺激对VSMCs活性的影响第30页
    4.2 生理性张应变加载不同时间下VSMCs的磷酸化蛋白质表达谱热图及位点分析第30-31页
    4.3 差异表达磷酸化蛋白质FCM聚类分析第31-33页
    4.4 差异表达磷酸化蛋白质功能分析第33-36页
    4.5 差异表达磷酸化蛋白质参与的信号通路第36-38页
    4.6 生理性张应变加载对ROCK1,蛋白激酶家族和p-Akt的影响第38-43页
        4.6.1 生理性张应变加载对ROCK1的影响第39页
        4.6.2 生理性张应变加载对PKCθ,PKCα/β,PKCζ/λ 和PKC δ/θ 的影响第39-41页
        4.6.3 生理性张应变加载对PKD/PKCμ Ser916和PKD/PKCμ Ser744/748的影响第41-42页
        4.6.4 生理性张应变加载对p-Akt的影响第42-43页
    4.7 ROCK1特异性RNA干扰片段筛选第43-44页
    4.8 ROCK1干扰对p-PKCθ,p-PKD/PKCμ Ser916,p-PKD/PKCμ Ser744/748及p-Akt的影响第44-47页
        4.8.1 ROCK1干扰对p-PKCθ 的影响第44-45页
        4.8.2 ROCK1干扰对p-PKD/PKCμ Ser916及p-PKD/PKCμ Ser744/748的影响第45页
        4.8.3 ROCK1干扰对p-Akt的影响第45-47页
第五章 讨论第47-55页
全文小结第55-56页
参考文献第56-62页
附录 1第62-65页
附录 2第65-71页
致谢第71-72页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第72-73页
附件第73页

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