摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略语 | 第14-16页 |
第一章 绪论 | 第16-23页 |
1.1 张应变、血管重建与VSMCs增殖 | 第16-18页 |
1.2 蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学研究现状 | 第18-20页 |
1.3 SILAC原理及应用 | 第20-21页 |
1.4 本文的主要工作 | 第21-23页 |
第二章 实验材料及实验仪器 | 第23-25页 |
2.1 SILAC主要试剂、溶液及实验仪器 | 第23-24页 |
2.2 WB实验特异性抗体 | 第24页 |
2.3 其他实验试剂、仪器及溶液 | 第24-25页 |
第三章 实验方法 | 第25-30页 |
3.1 SILAC及已标记VSMCs的张应变加载 | 第25-26页 |
3.2 SILAC磷酸化蛋白样品的制备及相关分析方法 | 第26-28页 |
3.2.1 磷酸化蛋白质及肽段的提取、定量、酶解与磷酸化富集 | 第26-27页 |
3.2.2 液相色谱与质谱分析 | 第27页 |
3.2.3 数据分析 | 第27-28页 |
3.3 模糊C均值聚类算法 | 第28页 |
3.4 细胞活性检测 | 第28-29页 |
3.5 统计学方法 | 第29页 |
3.6 其他实验方法 | 第29-30页 |
第四章 结果 | 第30-47页 |
4.1 生理性张应变刺激对VSMCs活性的影响 | 第30页 |
4.2 生理性张应变加载不同时间下VSMCs的磷酸化蛋白质表达谱热图及位点分析 | 第30-31页 |
4.3 差异表达磷酸化蛋白质FCM聚类分析 | 第31-33页 |
4.4 差异表达磷酸化蛋白质功能分析 | 第33-36页 |
4.5 差异表达磷酸化蛋白质参与的信号通路 | 第36-38页 |
4.6 生理性张应变加载对ROCK1,蛋白激酶家族和p-Akt的影响 | 第38-43页 |
4.6.1 生理性张应变加载对ROCK1的影响 | 第39页 |
4.6.2 生理性张应变加载对PKCθ,PKCα/β,PKCζ/λ 和PKC δ/θ 的影响 | 第39-41页 |
4.6.3 生理性张应变加载对PKD/PKCμ Ser916和PKD/PKCμ Ser744/748的影响 | 第41-42页 |
4.6.4 生理性张应变加载对p-Akt的影响 | 第42-43页 |
4.7 ROCK1特异性RNA干扰片段筛选 | 第43-44页 |
4.8 ROCK1干扰对p-PKCθ,p-PKD/PKCμ Ser916,p-PKD/PKCμ Ser744/748及p-Akt的影响 | 第44-47页 |
4.8.1 ROCK1干扰对p-PKCθ 的影响 | 第44-45页 |
4.8.2 ROCK1干扰对p-PKD/PKCμ Ser916及p-PKD/PKCμ Ser744/748的影响 | 第45页 |
4.8.3 ROCK1干扰对p-Akt的影响 | 第45-47页 |
第五章 讨论 | 第47-55页 |
全文小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 1 | 第62-65页 |
附录 2 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第72-73页 |
附件 | 第73页 |