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两种甘蔗杆状病毒SCBIMV和SCBMOV实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要第11-13页
Abstract第13-14页
1 Introduction第15-32页
    1.1 Sugarcane production in China第15-18页
    1.2 Sugarcane viral diseases in China第18-23页
        1.2.1 Overview of viral diseases第19-23页
            1.2.1.1 Viral diseases controls第20-21页
            1.2.1.2 Usages of disease-resistance cultivars第21页
            1.2.1.3 Tissue culture第21-22页
            1.2.1.4 Transgenic plants第22-23页
    1.3 Sugarcane bacilliform virus第23-31页
        1.3.1 Geographical distribution第24页
        1.3.2 Symptoms第24-25页
        1.3.3 Host range第25页
        1.3.4 Transmission第25-26页
        1.3.5 Genome characteristics第26页
        1.3.6 Variability and Molecular identification第26-28页
        1.3.7 Detection methods of SCBV and their limitations第28-31页
            1.3.7.1 Symptomatology第28页
            1.3.7.2 Electron microscopy第28页
            1.3.7.3 Serology第28-29页
            1.3.7.4 Polymerase chain reaction (PCR)第29-30页
            1.3.7.5 Immunocapture PCR (IC-PCR)第30-31页
    1.4 SCBV disease control第31页
    1.5 Purpose and objective of study第31-32页
2 Materials and Methods第32-41页
    2.1 Leaves sampling第32页
    2.2 Reagents and kits第32页
    2.3 DNA Isolation and purification第32-33页
    2.4 Primer and probe design第33-34页
    2.5 Plasmids generation第34页
    2.6 Plasmid extraction and dilution第34-35页
    2.7 qPCR assay第35-36页
    2.8 qPCR standard curve construction第36页
    2.9 Sensitivity test of the qPCR第36页
    2.10 Specificity test of the qPCR第36页
    2.11 Conventional PCR第36-37页
    2.12 PCR products purification第37-38页
    2.13 PCR products cloning and sequencing第38-39页
    2.14 Field samples detection for SCBV第39页
    2.15 Sequence alignment第39页
    2.16 Phylogenetic analysis第39-40页
    2.17 Sequence identity and genetic distance analysis第40-41页
3 Results第41-60页
    3.1 Primer specificity analysis in-silico第41-42页
    3.2 Efficiency of Real-Time qPCR Assay第42页
    3.3 Sensitivity of the qPCR第42-44页
    3.4 Specificity of the qPCR第44-45页
    3.5 Field samples detection for SCBV第45-46页
    3.6 SCBV genotypes identification第46-60页
        3.6.1 Phylogenetic grouping第46-49页
        3.6.2 Sequences identity第49-52页
        3.6.3 Sequence genetic distance第52-60页
4 Discussion and Conclusion第60-65页
    4.1 qPCR assays is more sensitive and efficient for SCBV detection第60-61页
    4.2 Highly genetic variation among the SCBV genotypes/strains第61-62页
    4.3 Quarantine inspection is necessary in plant cutting exchange第62-63页
    4.4 Conclusions第63-65页
References第65-75页
Published Papers第75-76页
Appendices第76-87页
Acknowledgement第87页

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