Rhodococcus sp. Y104产几丁质脱乙酰酶的分离纯化
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| ·几丁质、壳聚糖概述 | 第12-15页 |
| ·几丁质 | 第13页 |
| ·以几丁质制备壳聚糖 | 第13-14页 |
| ·壳聚糖的性质及应用 | 第14-15页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的研究概况 | 第15-21页 |
| ·产CDA 微生物 | 第15-16页 |
| ·CDA 分子生物学研究现状 | 第16-17页 |
| ·CDA 性质 | 第17-19页 |
| ·CDA 酶促反应的作用机理 | 第19页 |
| ·CDA 酶活的测定方法 | 第19-21页 |
| ·CDA 分离纯化的研究现状 | 第21页 |
| ·CDA 的应用前景 | 第21-22页 |
| ·制备壳聚糖 | 第21-22页 |
| ·生产特定的壳聚寡糖 | 第22页 |
| ·本课题的立题背景及研究意义 | 第22-23页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 菌种的分离纯化及发酵条件优化 | 第24-42页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·实验菌种 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·试剂的配制 | 第26-27页 |
| ·CDA 酶活的测定方法 | 第27-28页 |
| ·菌种分离纯化 | 第28页 |
| ·发酵条件的优化 | 第28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-41页 |
| ·菌株初筛、复筛结果 | 第28-29页 |
| ·碳源对菌株Y104 产酶的影响 | 第29-31页 |
| ·氮源对菌株Y104 产酶的影响 | 第31-33页 |
| ·无机盐对菌株Y104 产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·乙酸盐对菌株Y104 产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·正交实验确定发酵培养基 | 第35-37页 |
| ·菌株Y104 产酶条件的优化 | 第37-41页 |
| ·条件优化后菌株Y104 发酵进程 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 储存条件对 CDA 活力的影响 | 第42-48页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-43页 |
| ·实验菌种 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·培养方法 | 第42页 |
| ·CDA 酶活分析方法 | 第42页 |
| ·储存方法 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·发酵培养基对酶储存稳定性的影响 | 第43-44页 |
| ·酶底物对酶储存稳定性的影响 | 第44页 |
| ·金属离子对酶储存稳定性的影响 | 第44-45页 |
| ·缓冲液pH 对酶稳定性的影响 | 第45-46页 |
| ·储存方式对酶稳定性的影响 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 CDA 粗酶液的制备—细胞破碎 | 第48-58页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·CDA 酶活分析方法 | 第48页 |
| ·细胞培养方法及菌体制备 | 第48页 |
| ·细胞破碎方法 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-57页 |
| ·CDA 存在位置的确定 | 第50-51页 |
| ·超声波法处理结果 | 第51-52页 |
| ·溶菌酶破壁效果的研究 | 第52-53页 |
| ·反复冻融法处理结果 | 第53页 |
| ·玻璃匀浆器处理细胞对酶活的影响 | 第53-54页 |
| ·反复冻融与匀浆法联合处理 | 第54页 |
| ·破碎条件对酶活的影响 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第5章 几丁质脱乙酰酶的分离纯化 | 第58-72页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·材料与方法 | 第58-65页 |
| ·实验试剂及配制 | 第58-59页 |
| ·实验仪器 | 第59-60页 |
| ·CDA 酶液的制备 | 第60页 |
| ·Bradford 法测定蛋白质的含量 | 第60-61页 |
| ·CDA 硫酸铵盐析 | 第61-62页 |
| ·Sephadex G-25 凝胶过滤层析 | 第62-63页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析 | 第63页 |
| ·分离纯化结果分析 | 第63-64页 |
| ·SDS-PAGE 法测定CDA 的分子量 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-70页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第65-66页 |
| ·Sephadex G-25 凝胶过滤层析 | 第66页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析 | 第66-67页 |
| ·CDA 纯化结果 | 第67-68页 |
| ·CDA 分子量的测定及纯度分析 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 第6章 结论与展望 | 第72-74页 |
| ·结论 | 第72页 |
| ·展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第80页 |
