摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 绪论 | 第9-16页 |
1.1 前言 | 第9页 |
1.2 肿瘤概述 | 第9-11页 |
1.3 肝癌概述 | 第11-12页 |
1.4 转录与转录因子及转录因子 FoxA2 概述 | 第12-14页 |
1.4.1 转录与转录因子 | 第12-13页 |
1.4.2 转录因子 FoxA2 概述 | 第13-14页 |
1.5 细胞周期 | 第14-15页 |
1.6 研究目的和方法 | 第15-16页 |
第2章 内源性 FoxA2 对肝癌细胞增殖的影响 | 第16-26页 |
2.1 前言 | 第16页 |
2.2 实验材料 | 第16-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-24页 |
2.3.1 蛋白质印迹(WesternBlot)检测方法 | 第18-21页 |
2.3.2 细胞培养与计数 | 第21-24页 |
2.3.3 测定细胞生长曲线 | 第24页 |
2.4 实验结果 | 第24-25页 |
2.4.1 肝癌细胞中内源性 FoxA2 表达水平检测 | 第24页 |
2.4.2 肝癌细胞株生长曲线测定 | 第24-25页 |
2.5 讨论 | 第25-26页 |
第3章 干扰 FoxA2 对肝癌细胞增殖的影响 | 第26-30页 |
3.1 前言 | 第26页 |
3.2 实验材料 | 第26-27页 |
3.3 实验方法 | 第27-28页 |
3.3.1 FoxA2 的 siRNA 干扰 | 第27-28页 |
3.3.2 蛋白质印迹(WesternBlot)检测 | 第28页 |
3.3.3 细胞培养与计数 | 第28页 |
3.3.4 测定细胞生长曲线 | 第28页 |
3.4 实验结果 | 第28-29页 |
3.4.1 在肝癌细胞 Huh6 中干扰 FoxA2 后对其生长曲线的影响 | 第28-29页 |
3.5 讨论 | 第29-30页 |
第4章 高表达 FoxA2 对肝癌细胞增殖影响 | 第30-46页 |
4.1 慢病毒—逆转录病毒递送载体 | 第30-31页 |
4.2 实验材料 | 第31-32页 |
4.3 实验方法 | 第32-41页 |
4.3.1 构建 FoxA2 高表达慢病毒载体 | 第32-39页 |
4.3.2 制备 FoxA2 高表达慢病毒 | 第39-41页 |
4.3.3 病毒感染目的细胞 | 第41页 |
4.4 实验结果 | 第41-45页 |
4.4.1 PlvrFoxA2 质粒构建 | 第41-42页 |
4.4.2 真核细胞中重组 plvrFoxA2 质粒的表达 | 第42-43页 |
4.4.3 慢病毒制备以及滴度测定 | 第43页 |
4.4.4 建立 Huh7 细胞 FoxA2 高表达体系 | 第43-44页 |
4.4.5 FoxA2 高表达对肝癌细胞 Huh7 生长曲线的影响 | 第44-45页 |
4.5 讨论 | 第45-46页 |
第5章 FoxA2 对肝癌细胞周期的影响 | 第46-53页 |
5.1 细胞周期与基因 p53、p21 | 第46-47页 |
5.2 实验材料 | 第47-48页 |
5.3 实验方法 | 第48-50页 |
5.3.1 mRNA 水平检测 | 第48-50页 |
5.3.2 细胞培养与计数 | 第50页 |
5.4 实验结果 | 第50-51页 |
5.5 讨论 | 第51-53页 |
总结与展望 | 第53-54页 |
1. 总结 | 第53页 |
2. 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 A 常用缓冲液和试剂配方 | 第60-61页 |
附录 B 英文缩写 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |