| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写一览表 | 第13-15页 |
| 第1章 引言 | 第15-22页 |
| 1.1 过敏性哮喘的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2 sIL-4R 在哮喘治疗中的进展 | 第16-17页 |
| 1.3 HP-NAP 在哮喘研究中的前景 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 1.5 研究内容与方法 | 第19-21页 |
| 1.6 实验流程图 | 第21-22页 |
| 第2章 质粒的构建及鉴定 | 第22-34页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 常用试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.1.4 细胞株 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 构建质粒 PS | 第24-25页 |
| 2.2.2 构建质粒 PN | 第25-26页 |
| 2.2.3 构建质粒 PSN | 第26-27页 |
| 2.2.4 RT-PCR 检测融合蛋白 sIL-4R-NAP 的 mRNA 水平 | 第27页 |
| 2.2.5 Western Blot 鉴定融合蛋白 sIL-4R-NAP 的表达 | 第27-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 酶切及测序鉴定质粒 PS | 第28-29页 |
| 2.3.2 酶切及测序鉴定质粒 PN | 第29-31页 |
| 2.3.3 酶切及测序鉴定质粒 PSN | 第31-32页 |
| 2.3.4 质粒 PSN 的 mRNA 水平表达 | 第32页 |
| 2.3.5 质粒 PSN 的蛋白质水平表达 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第3章 OVA 诱导哮喘模型的建立及评估 | 第34-43页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 常用试剂配制 | 第34-35页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 建立 OVA 诱导小鼠哮喘模型 | 第35-36页 |
| 3.2.2 支气管肺泡灌洗与细胞计数 | 第36页 |
| 3.2.3 肺组织切片 H&E 染色 | 第36页 |
| 3.2.4 ELISA 检测 BALF 中 IFN-γ和 IL-4 水平 | 第36-37页 |
| 3.2.5 提取肺组织 mRNA 并反转录为 cDNA | 第37页 |
| 3.2.6 qRT-PCR 检测气道重塑相关基因 | 第37-38页 |
| 3.2.7 数据统计分析 | 第38-39页 |
| 3.3 结果 | 第39-41页 |
| 3.3.1 OVA 诱导小鼠产生哮喘 | 第39-40页 |
| 3.3.2 哮喘小鼠的 Th2 免疫应答占优势 | 第40页 |
| 3.3.3 哮喘模型未发生气道重塑 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 质粒 PSN 对肺部炎症的影响 | 第43-57页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.3 常用试剂配置 | 第44页 |
| 4.2 方法 | 第44-50页 |
| 4.2.1 无内毒素质粒的制备 | 第44-45页 |
| 4.2.2 OVA 诱导产生哮喘与质粒给药 | 第45-46页 |
| 4.2.3 支气管肺泡灌洗与细胞计数 | 第46-47页 |
| 4.2.4 瑞氏染色与白细胞分类计数 | 第47页 |
| 4.2.5 肺组织切片 H&E 染色 | 第47-48页 |
| 4.2.6 qRT-PCR 检测粒细胞趋化因子水平 | 第48-49页 |
| 4.2.7 qRT-PCR 检测炎症因子水平 | 第49-50页 |
| 4.2.8 数据分析统计 | 第50页 |
| 4.3 结果 | 第50-55页 |
| 4.3.1 质粒 PSN 显著抑制肺部炎症 | 第50-52页 |
| 4.3.2 质粒 PSN 显著降低肺部嗜酸性粒细胞浸润 | 第52-53页 |
| 4.3.3 质粒 PSN 不影响中性粒细胞浸润 | 第53-54页 |
| 4.3.4 质粒 PSN 不影响肺组织炎症因子表达 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第5章 质粒 PSN 对 Th1/Th2 漂移和 IgE 合成的影响 | 第57-65页 |
| 5.1 材料 | 第57-58页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第57页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第57-58页 |
| 5.1.3 常规试剂配置 | 第58页 |
| 5.2 方法 | 第58-60页 |
| 5.2.1 ELISA 检测 BALF 中 IL-4 和 IFN-γ水平 | 第58页 |
| 5.2.2 ELISA 检测血浆中 OVA 特异性 IgE 水平 | 第58-59页 |
| 5.2.3 qRT-PCR 检测肺组织中 IL-13、IL-10 和 Foxp3 的 mRNA 水平 | 第59页 |
| 5.2.4 数据统计分析 | 第59-60页 |
| 5.3 结果 | 第60-63页 |
| 5.3.1 质粒 PSN 抑制 IL-4 分泌并促进 IFN-γ分泌 | 第60-61页 |
| 5.3.2 质粒 PSN 降低肺组织中 IL-13 表达和血浆 IgE 含量 | 第61-62页 |
| 5.3.3 质粒 PSN 抗哮喘的能力不依赖免疫抑制 | 第62-63页 |
| 5.4 讨论 | 第63-65页 |
| 全文讨论 | 第65-68页 |
| 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 硕士期间发表论文、专利目录及研究成果 | 第75页 |
