| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第10-18页 |
| 第一章 PRRSV 及其 GP5 研究进展 | 第10-18页 |
| 1.1 PRRSV 的基因组结构及相关蛋白 | 第10-14页 |
| 1.1.1 PRRSV 基因组结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 PRRSV 基因组编码的主要蛋白 | 第11-14页 |
| 1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 | 第14-16页 |
| 1.2.1 GP5 的特性 | 第14页 |
| 1.2.2 GP5 的免疫作用 | 第14-15页 |
| 1.2.3 GP5 参与病毒粒子结合病毒受体作用 | 第15页 |
| 1.2.4 GP5 诱导细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 1.3 基于 GP5 的 PRRS 疫苗 | 第16-17页 |
| 1.3.1 核酸疫苗 | 第16页 |
| 1.3.2 重组多肽疫苗 | 第16-17页 |
| 1.3.3 活载体疫苗 | 第17页 |
| 1.4 结语 | 第17-18页 |
| 试验研究 | 第18-40页 |
| 第二章 原代 PAM 制备及其 PRRSV 的 RT-PCR 检测 | 第18-29页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 病毒、菌种、细胞和克隆载体 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第19页 |
| 2.2.2 样品采集及处理 | 第19-20页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第20-24页 |
| 2.2.4 RT-PCR 方法的检测 | 第24页 |
| 2.2.5 临床检测 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-27页 |
| 2.3.1 PAM 分离 | 第24-25页 |
| 2.3.2 PCR 扩增 | 第25页 |
| 2.3.3 重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.4 RT-PCR 方法的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.5 使用 RT-PCR 方法检测临床样品的结果 | 第27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 2.5 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 稳定表达 PRRSV SD16 株 GP5 的 PAM 构建与鉴定 | 第29-40页 |
| 3.1 材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 病毒、菌种、细胞和克隆载体 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第29-30页 |
| 3.2 方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 引物设计与合成 | 第30页 |
| 3.2.2 pMD18-T-GP5 的构建及鉴定 | 第30页 |
| 3.2.3 重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.4 PAM-GP5 的筛选和鉴定 | 第31-33页 |
| 3.2.5 细胞生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 3.3 结果 | 第34-38页 |
| 3.3.1 pMD18-T-GP5 的鉴定 | 第34页 |
| 3.3.2 pPB-GP5 的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.3 PAM-GP5 的筛选及鉴定 | 第35-37页 |
| 3.3.4 PAM-GP5 生长曲线测定结果 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-39页 |
| 3.5 小结 | 第39-40页 |
| 全文总结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
