| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 生物大分子的分离纯化和液相色谱技术 | 第10-11页 |
| 1.2 液相色谱介质的理化特性与蛋白质吸附行为 | 第11-14页 |
| 1.2.1 介质的物理结构特性 | 第11-12页 |
| 1.2.2 介质的化学结构特性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 孔径可能介导的蛋白质吸附和结构变化 | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白质构象的稳定性、柔性及其电荷与静电势 | 第14-17页 |
| 1.3.1 蛋白质的稳定性 | 第14页 |
| 1.3.2 蛋白质的柔性 | 第14-15页 |
| 1.3.3 蛋白质的净电荷及其表面静电势 | 第15-17页 |
| 1.4 蛋白质与介质相互作用的研究方法 | 第17-22页 |
| 1.4.1 光谱法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 色谱分析法 | 第19-20页 |
| 1.4.3 质谱分析法 | 第20页 |
| 1.4.4 核磁共振（NMR）法 | 第20-21页 |
| 1.4.5 等温滴定量热法 | 第21-22页 |
| 1.4.6 其他方法 | 第22页 |
| 1.5 立题依据和目标 | 第22-26页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第22-23页 |
| 1.5.2 研究目标 | 第23-26页 |
| 第二章 溶菌酶氢氘交换的动力学实验 | 第26-30页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第26页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.3.1 核磁共振测试条件 | 第26-27页 |
| 2.3.2 核磁数据分析 | 第27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-29页 |
| 2.4.1 溶菌酶的氢氘交换特征 | 第27-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 孔径大小介导的蛋白质吸附和结构变化 | 第30-42页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料及仪器 | 第30-32页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第30-31页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.3.1 等度洗脱 | 第32-33页 |
| 3.3.2 激光扫描共聚焦显微镜观察蛋白质在孔内的扩散 | 第33页 |
| 3.3.3 吸附蛋白质的氢氘标记 | 第33-34页 |
| 3.3.4 氢氘交换数据分析 | 第34页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 3.4.1 孔径对蛋白质色谱保留的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.2 孔径对蛋白质扩散的影响 | 第35-37页 |
| 3.4.3 孔径介导的蛋白质去折叠行为 | 第37-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第四章 蛋白柔性在离子交换过程中的介导作用 | 第42-56页 |
| 4.1 引言 | 第42-43页 |
| 4.2 实验仪器及材料 | 第43页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第43页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.3.1 等度洗脱 | 第43页 |
| 4.3.2 吸附蛋白质的氢氘标记 | 第43-44页 |
| 4.3.3 氢氘交换数据分析 | 第44页 |
| 4.3.4 溶剂可及表面计算 | 第44-45页 |
| 4.3.5 蛋白静电势计算 | 第45页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第45-55页 |
| 4.4.1 不同柔性蛋白在阳离子交换介质上的色谱保留 | 第45-46页 |
| 4.4.2 不同柔性蛋白在阳离子交换介质表面的结构变化 | 第46-50页 |
| 4.4.3 不同柔性蛋白与阳离子交换介质作用位点的确定 | 第50-55页 |
| 4.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 柔性蛋白色谱吸附的量热学研究 | 第56-70页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 实验仪器及材料 | 第56-57页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第56-57页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第57页 |
| 5.3 实验方法 | 第57-61页 |
| 5.3.1 缓冲液的配制 | 第57页 |
| 5.3.2 蛋白质标准曲线的绘制 | 第57-59页 |
| 5.3.3 蛋白质的静态吸附平衡实验 | 第59页 |
| 5.3.4 不同柔性蛋白与阳离子交换介质相互作用的等温滴定量热实验 | 第59-60页 |
| 5.3.5 蛋白与色谱介质相互作用的热力学参数的计算 | 第60-61页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第61-69页 |
| 5.4.1 蛋白质柔性差异对吸附作用的影响 | 第61-63页 |
| 5.4.2 蛋白柔性效应对吸附热量的影响 | 第63-66页 |
| 5.4.3 细胞色素 C 与阳离子交换介质的量热学研究 | 第66-68页 |
| 5.4.4 仪器参数设置对实验结果的影响 | 第68-69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 6.1 结论 | 第70-71页 |
| 6.2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 攻读学位期间获得的相关科研成果 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
