符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-24页 |
1.1 线粒体通透性转换孔与电压依赖型阴离子通道 | 第12-22页 |
1.1.1 线粒体凋亡通路 | 第12-13页 |
1.1.2 线粒体通透性转换孔 | 第13-15页 |
1.1.3 电压依赖型阴离子通道蛋白 | 第15-17页 |
1.1.4 VDAC 蛋白与细胞凋亡 | 第17-20页 |
1.1.5 VDAC 蛋白的结构及其通道特性 | 第20-21页 |
1.1.6 VDAC 蛋白的调控 | 第21-22页 |
1.2 一氧化氮(NO)与植物代谢 | 第22-23页 |
1.3 论文研究内容及意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 仪器与试剂 | 第24页 |
2.1.2 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.3 菌株及质粒 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-39页 |
2.2.1 电压依赖型阴离子通道(VDAC)全长 cDNA 的克隆 | 第25-32页 |
2.2.3 体外重组 VDAC 蛋白 | 第32-36页 |
2.2.4 一氧化氮处理对肥城桃果实线粒体的影响 | 第36-39页 |
3 结果分析 | 第39-57页 |
3.1 电压依赖型阴离子通道(VDAC)全长 cDNA 的克隆 | 第39-41页 |
3.1.1 肥城桃果实总 RNA 的提取 | 第39-40页 |
3.1.2 RACE | 第40-41页 |
3.2 VDAC 序列分析 | 第41-44页 |
3.2.1 序列开放阅读框分析 | 第41-42页 |
3.2.2 VDAC 基因序列内含子分析 | 第42-43页 |
3.2.3 肥城桃 VDAC 蛋白结构预测 | 第43-44页 |
3.3 VDAC 蛋白体外重组与纯化 | 第44-47页 |
3.3.1 VDAC 克隆载体的构建 | 第44-46页 |
3.3.2 VDAC 蛋白的表达与纯化 | 第46-47页 |
3.4 NO 与 VDAC 的相互作用 | 第47-50页 |
3.4.1 NO 与 VDAC 作用的荧光光谱 | 第47-48页 |
3.4.2 NO 对 VDAC 蛋白溶液的荧光猝灭作用 | 第48-50页 |
3.5 一氧化氮处理对肥城桃果实线粒体的影响 | 第50-57页 |
3.5.1 NO 对线粒体膜电势的影响 | 第50-52页 |
3.5.2 NO 对线粒体己糖激酶活性的影响 | 第52页 |
3.5.3 NO 对线粒体游离钙离子含量的影响 | 第52-53页 |
3.5.4 NO 对外源氧化应激和钙离子诱导 MPTP 开放的影响 | 第53-55页 |
3.5.5 NO 对 VDAC 基因表达量的影响 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
4.1 VDAC 基因的克隆及蛋白序列分析 | 第57-58页 |
4.2 重组 VDAC 的表达及纯化 | 第58页 |
4.3 NO 对肥城桃果实线粒体通透性的影响 | 第58-59页 |
4.4 NO 与 VDAC 蛋白荧光性质的影响 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
论文主要创新之处 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
硕士期间论文发表情况 | 第79页 |