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可溶性壳聚糖季铵盐(CSTM)的合成、表征及其在基因载体和MR分子探针中的应用

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
缩略词表第13-15页
前言第15-20页
 一、 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒第15-17页
 二、 壳聚糖季铵盐MR分子探针在淋巴结病变定性诊断中的应用第17-20页
第一部分壳聚糖季铵盐及壳聚糖季铵盐-g-聚乙二醇-叶酸的制备第20-28页
 一、材料与仪器第20-21页
  (一) 药品和试剂第20-21页
  (二) 仪器第21页
 二、实验方法第21-24页
  (一) 壳聚糖季铵盐的合成第21-22页
  (二) 壳聚糖季铵盐-g-聚乙二醇-叶酸的合成第22-24页
   1、叶酸活性酯的制备第22页
   2、COOH-PEG-FA 的制备第22-24页
   3、FA-PEG-COOH的活化第24页
   4、CSTM-g-PEG-FA的合成第24页
 三、实验结果第24-27页
  (一) ~1H-NMR 的鉴定和分析第24页
  (二) IR的鉴定和分析第24-27页
 四、讨论与小结第27-28页
第二部分 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒的制备及形态学表征第28-47页
 一、材料与仪器第28-29页
  (一) 药品和试剂第28-29页
  (二) 仪器第29页
 二、 实验方法第29-32页
  (一) 质粒的扩增第29页
  (二) 载基因纳米粒的制备第29-30页
   1、CSTM/pDNA 纳米复合物的制第30页
   2、CSTM-g-PEG-FA/pDNA 纳米复合物的制备第30页
  (三) 载基因纳米粒的表征第30-32页
   1、载基因纳米粒包封率的测定第30页
   2、载基因纳米粒粒径的测定第30页
   3、载基因纳米粒 Zeta 电位的测定第30页
   4、透射电镜观察纳米粒形态第30-31页
   5、血清对载基因纳米粒的影响第31页
   6、DNaseⅠ消化法测定纳米粒的稳定性第31页
   7、载基因纳米粒粒径随时间变化第31-32页
 三、实验结果第32-45页
  (一) 包封率测定结果第32-34页
   1. CSTM 对质粒 DNA 包封率测定结果第32页
   2. CSTM-g-PEG-FA 对质粒 DNA 包封率测定结果第32-34页
  (二) 载基因纳米粒粒径测定结果第34-37页
   1、 DI 水中制得纳米粒粒径第34-36页
   2、PBS 中制得纳米粒粒径第36-37页
  (三) 载基因纳米粒zeta 电位测定结果第37-40页
   1、DI 水中制得纳米粒zeta 电位值第37-39页
   2、PBS 中制得纳米粒zeta 电位值第39-40页
  (四) TEM 观察纳米粒形态结果第40-41页
  (五) DNaseⅠ消化法考察纳米粒稳定性的结果第41-44页
  (六) 血清对载基因纳米粒粒径影响的结果第44页
  (七) 载基因纳米粒粒径随时间变化结果第44-45页
 四、讨论与小结第45-47页
第三部分 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒体外细胞实验第47-55页
 一、材料与仪器第47-48页
  (一) 药品和试剂第47-48页
  (二) 仪器第48页
 二、实验方法第48-50页
  (一) 293T 细胞的培养第48页
  (二) 细胞毒性实验第48-49页
  (三) 细胞转染实验第49-50页
 三、实验结果第50-53页
  (一) 细胞转染结果第50-52页
   1、细胞转染荧光显微镜结果第50-51页
   2、细胞转染流式定量结果第51-52页
  (二) 细胞毒性测定结果第52-53页
 四、讨论和小结第53-55页
第四部分 壳聚糖季铵盐-SPIO 分子探针的研制第55-63页
 一、材料与仪器第55-56页
  (一) 药品和试剂第55页
  (二) 仪器第55-56页
 二、实验方法第56-57页
  (一) CSTM/TPP 纳米粒在PBS 中的制备及粒径电势测定第56页
  (二) CSTM/TPP 纳米粒在DI 水中的制备及粒径电势测定第56页
  (三) CSTM/TPP-SPIO分子探针的制备及粒径电势测定第56页
  (四) SPIO 包封率的测定第56-57页
   1. 标准曲线的绘制第56-57页
   2. SPIO 包封率的测定第57页
 三、实验结果第57-62页
  (一) CSTM/TPP NPs 在PBS 中粒径和电势的测定结果第57-58页
  (二) CSTM/TPP NPs 在DI 水中粒径和电势的测定结果第58-59页
  (三) CSTM/TPP-SPIO 分子探针粒径和电势的测定结果第59-60页
  (四) SPIO 包封率的测定结果第60-62页
   1. 标准曲线第60-61页
   2. SPIO的包封率第61-62页
 四、讨论和小结第62-63页
第五部分 CSTM/TPP-SPIO 分子探针体内外实验第63-69页
 一、材料与仪器第63-64页
  (一) 药品和试剂第63页
  (二) 仪器第63-64页
 二、实验方法第64-65页
  (一) CSTM/TPP-SPIO 分子探针细胞毒性试验第64页
   1、HepG2 细胞的培养第64页
   2. 细胞毒性实验第64页
  (二) CSTM/TPP-SPIO 分子探针淋巴结病变定性诊断第64-65页
   1、淋巴结转移模型第64-65页
   2、MR 扫描第65页
  (三) 肿瘤组织学分析第65页
 三、实验结果第65-67页
  (一)CSTM/TPP-SPIO 分子探针细胞毒性试验第65-66页
  (二) CSTM/TPP-SPIO 分子探针淋巴结病变定性诊断结果第66-67页
  (三) 切片的光镜观察第67页
 四、讨论和小结第67-69页
全文总结第69-71页
参考文献第71-75页
综述第75-83页
致谢第83页

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