中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
缩略词表 | 第13-15页 |
前言 | 第15-20页 |
一、 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒 | 第15-17页 |
二、 壳聚糖季铵盐MR分子探针在淋巴结病变定性诊断中的应用 | 第17-20页 |
第一部分壳聚糖季铵盐及壳聚糖季铵盐-g-聚乙二醇-叶酸的制备 | 第20-28页 |
一、材料与仪器 | 第20-21页 |
(一) 药品和试剂 | 第20-21页 |
(二) 仪器 | 第21页 |
二、实验方法 | 第21-24页 |
(一) 壳聚糖季铵盐的合成 | 第21-22页 |
(二) 壳聚糖季铵盐-g-聚乙二醇-叶酸的合成 | 第22-24页 |
1、叶酸活性酯的制备 | 第22页 |
2、COOH-PEG-FA 的制备 | 第22-24页 |
3、FA-PEG-COOH的活化 | 第24页 |
4、CSTM-g-PEG-FA的合成 | 第24页 |
三、实验结果 | 第24-27页 |
(一) ~1H-NMR 的鉴定和分析 | 第24页 |
(二) IR的鉴定和分析 | 第24-27页 |
四、讨论与小结 | 第27-28页 |
第二部分 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒的制备及形态学表征 | 第28-47页 |
一、材料与仪器 | 第28-29页 |
(一) 药品和试剂 | 第28-29页 |
(二) 仪器 | 第29页 |
二、 实验方法 | 第29-32页 |
(一) 质粒的扩增 | 第29页 |
(二) 载基因纳米粒的制备 | 第29-30页 |
1、CSTM/pDNA 纳米复合物的制 | 第30页 |
2、CSTM-g-PEG-FA/pDNA 纳米复合物的制备 | 第30页 |
(三) 载基因纳米粒的表征 | 第30-32页 |
1、载基因纳米粒包封率的测定 | 第30页 |
2、载基因纳米粒粒径的测定 | 第30页 |
3、载基因纳米粒 Zeta 电位的测定 | 第30页 |
4、透射电镜观察纳米粒形态 | 第30-31页 |
5、血清对载基因纳米粒的影响 | 第31页 |
6、DNaseⅠ消化法测定纳米粒的稳定性 | 第31页 |
7、载基因纳米粒粒径随时间变化 | 第31-32页 |
三、实验结果 | 第32-45页 |
(一) 包封率测定结果 | 第32-34页 |
1. CSTM 对质粒 DNA 包封率测定结果 | 第32页 |
2. CSTM-g-PEG-FA 对质粒 DNA 包封率测定结果 | 第32-34页 |
(二) 载基因纳米粒粒径测定结果 | 第34-37页 |
1、 DI 水中制得纳米粒粒径 | 第34-36页 |
2、PBS 中制得纳米粒粒径 | 第36-37页 |
(三) 载基因纳米粒zeta 电位测定结果 | 第37-40页 |
1、DI 水中制得纳米粒zeta 电位值 | 第37-39页 |
2、PBS 中制得纳米粒zeta 电位值 | 第39-40页 |
(四) TEM 观察纳米粒形态结果 | 第40-41页 |
(五) DNaseⅠ消化法考察纳米粒稳定性的结果 | 第41-44页 |
(六) 血清对载基因纳米粒粒径影响的结果 | 第44页 |
(七) 载基因纳米粒粒径随时间变化结果 | 第44-45页 |
四、讨论与小结 | 第45-47页 |
第三部分 壳聚糖季铵盐载基因纳米粒体外细胞实验 | 第47-55页 |
一、材料与仪器 | 第47-48页 |
(一) 药品和试剂 | 第47-48页 |
(二) 仪器 | 第48页 |
二、实验方法 | 第48-50页 |
(一) 293T 细胞的培养 | 第48页 |
(二) 细胞毒性实验 | 第48-49页 |
(三) 细胞转染实验 | 第49-50页 |
三、实验结果 | 第50-53页 |
(一) 细胞转染结果 | 第50-52页 |
1、细胞转染荧光显微镜结果 | 第50-51页 |
2、细胞转染流式定量结果 | 第51-52页 |
(二) 细胞毒性测定结果 | 第52-53页 |
四、讨论和小结 | 第53-55页 |
第四部分 壳聚糖季铵盐-SPIO 分子探针的研制 | 第55-63页 |
一、材料与仪器 | 第55-56页 |
(一) 药品和试剂 | 第55页 |
(二) 仪器 | 第55-56页 |
二、实验方法 | 第56-57页 |
(一) CSTM/TPP 纳米粒在PBS 中的制备及粒径电势测定 | 第56页 |
(二) CSTM/TPP 纳米粒在DI 水中的制备及粒径电势测定 | 第56页 |
(三) CSTM/TPP-SPIO分子探针的制备及粒径电势测定 | 第56页 |
(四) SPIO 包封率的测定 | 第56-57页 |
1. 标准曲线的绘制 | 第56-57页 |
2. SPIO 包封率的测定 | 第57页 |
三、实验结果 | 第57-62页 |
(一) CSTM/TPP NPs 在PBS 中粒径和电势的测定结果 | 第57-58页 |
(二) CSTM/TPP NPs 在DI 水中粒径和电势的测定结果 | 第58-59页 |
(三) CSTM/TPP-SPIO 分子探针粒径和电势的测定结果 | 第59-60页 |
(四) SPIO 包封率的测定结果 | 第60-62页 |
1. 标准曲线 | 第60-61页 |
2. SPIO的包封率 | 第61-62页 |
四、讨论和小结 | 第62-63页 |
第五部分 CSTM/TPP-SPIO 分子探针体内外实验 | 第63-69页 |
一、材料与仪器 | 第63-64页 |
(一) 药品和试剂 | 第63页 |
(二) 仪器 | 第63-64页 |
二、实验方法 | 第64-65页 |
(一) CSTM/TPP-SPIO 分子探针细胞毒性试验 | 第64页 |
1、HepG2 细胞的培养 | 第64页 |
2. 细胞毒性实验 | 第64页 |
(二) CSTM/TPP-SPIO 分子探针淋巴结病变定性诊断 | 第64-65页 |
1、淋巴结转移模型 | 第64-65页 |
2、MR 扫描 | 第65页 |
(三) 肿瘤组织学分析 | 第65页 |
三、实验结果 | 第65-67页 |
(一)CSTM/TPP-SPIO 分子探针细胞毒性试验 | 第65-66页 |
(二) CSTM/TPP-SPIO 分子探针淋巴结病变定性诊断结果 | 第66-67页 |
(三) 切片的光镜观察 | 第67页 |
四、讨论和小结 | 第67-69页 |
全文总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
综述 | 第75-83页 |
致谢 | 第83页 |