摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
缩略语 | 第10-14页 |
第一章 前言 | 第14-35页 |
1.1 甲壳动物养殖概况 | 第14-16页 |
1.1.1 对虾养殖及凡纳滨对虾概况 | 第14-15页 |
1.1.2 青蟹养殖概况 | 第15-16页 |
1.2 甲壳动物病害及免疫学防治研究进展 | 第16-29页 |
1.2.1 甲壳动物病害 | 第16-18页 |
1.2.2 甲壳动物天然免疫概述 | 第18-26页 |
1.2.3 甲壳动物免疫学防治研究进展 | 第26-29页 |
1.3 血蓝蛋白研究进展 | 第29-33页 |
1.3.1 血蓝蛋白的结构及特性 | 第29-30页 |
1.3.2 血蓝蛋白功能研究进展 | 第30-33页 |
1.4 本论文研究的目的与意义 | 第33-35页 |
第二章 凡纳滨对虾血蓝蛋白抑菌作用分子机制的初步研究 | 第35-57页 |
2.1 实验材料 | 第36-39页 |
2.1.1 实验材料 | 第36页 |
2.1.2 主要试剂 | 第36页 |
2.1.3 溶液配置 | 第36-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-46页 |
2.2.1 虾血清的获取 | 第39页 |
2.2.2 硫酸铵分级沉淀纯化抗体 | 第39-40页 |
2.2.3 亲和层析纯化血蓝蛋白 | 第40页 |
2.2.4 Bradford法测定蛋白浓度 | 第40-41页 |
2.2.5 双向电泳 | 第41-42页 |
2.2.6 Westernblotting | 第42页 |
2.2.7 亲和凝集素点印记分析 | 第42页 |
2.2.8 胰酶水解LHt和LH75 | 第42-43页 |
2.2.9 Tricine-SDS-PAGE分析LHt和LH75 肽段差异 | 第43页 |
2.2.10 高效液相色谱分析LHt和LH75 胰酶水解肽段差异 | 第43页 |
2.2.11 病原菌刺激后血清中LHt和LH75 量差异分析 | 第43页 |
2.2.12 副溶血弧菌外膜蛋白提取 | 第43-44页 |
2.2.13 与LH75 相结合的副溶血弧菌外膜蛋白的纯化与鉴定 | 第44页 |
2.2.14 质谱鉴定蛋白 | 第44-46页 |
2.3 结果分析 | 第46-53页 |
2.3.1 LHt和LH75 分子结构差异分析 | 第46-49页 |
2.3.2 两种血蓝蛋白体内抑菌作用相关性分析 | 第49-50页 |
2.3.3 血蓝蛋白抑菌作用靶点分析 | 第50-53页 |
2.4 讨论 | 第53-57页 |
第三章 锯缘青蟹血蓝蛋白凝集活性及其作用靶标分析 | 第57-74页 |
3.1 实验材料 | 第58-59页 |
3.1.1 实验材料 | 第58页 |
3.1.2 溶液配置 | 第58-59页 |
3.2 实验方法 | 第59-61页 |
3.2.1 锯缘青蟹血清制备 | 第59页 |
3.2.2 锯缘青蟹血蓝蛋白的纯化和鉴定 | 第59页 |
3.2.3 细菌悬液的制备 | 第59页 |
3.2.4 细菌凝集实验 | 第59页 |
3.2.5 糖抑制实验 | 第59-60页 |
3.2.6 血蓝蛋白凝集作用活性亚基分析 | 第60页 |
3.2.7 细菌不同成分凝集抑制实验 | 第60页 |
3.2.8 大肠杆菌 K12 外膜蛋白敲除菌凝集实验 | 第60页 |
3.2.9 数据统计分析 | 第60-61页 |
3.3 结果分析 | 第61-70页 |
3.3.1 锯缘青蟹血蓝蛋白的纯化与鉴定 | 第61-63页 |
3.3.2 血蓝蛋白凝集活性分析 | 第63-66页 |
3.3.3 血蓝蛋白凝集作用亚基分析 | 第66-67页 |
3.3.4 血蓝蛋白凝集作用靶标分析 | 第67-70页 |
3.4 讨论 | 第70-74页 |
第四章 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血活性及其作用机制研究 | 第74-86页 |
4.1 实验材料 | 第74-75页 |
4.1.1 实验材料 | 第74-75页 |
4.1.2 主要试剂 | 第75页 |
4.1.3 溶液配置 | 第75页 |
4.2 实验方法 | 第75-77页 |
4.2.1 红细胞悬液配制 | 第75页 |
4.2.2 溶血活性测定 | 第75-76页 |
4.2.3 溶血动态分析 | 第76页 |
4.2.4 渗透保护实验 | 第76页 |
4.2.5 SDS-PAGE和Western-blotting分析 | 第76页 |
4.2.6 数据统计分析 | 第76-77页 |
4.3 结果分析 | 第77-82页 |
4.3.1 血蓝蛋白溶血活性分析 | 第77-78页 |
4.3.2 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血活性影响因素分析 | 第78-81页 |
4.3.3 锯缘青蟹血蓝蛋白与红细胞膜相互作用分析 | 第81页 |
4.3.4 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血作用机制研究 | 第81-82页 |
4.4 讨论 | 第82-86页 |
小结与展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
已发表和待发表的论文 | 第109页 |