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甲壳动物血蓝蛋白免疫学活性及其作用机制研究

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
缩略语第10-14页
第一章 前言第14-35页
    1.1 甲壳动物养殖概况第14-16页
        1.1.1 对虾养殖及凡纳滨对虾概况第14-15页
        1.1.2 青蟹养殖概况第15-16页
    1.2 甲壳动物病害及免疫学防治研究进展第16-29页
        1.2.1 甲壳动物病害第16-18页
        1.2.2 甲壳动物天然免疫概述第18-26页
        1.2.3 甲壳动物免疫学防治研究进展第26-29页
    1.3 血蓝蛋白研究进展第29-33页
        1.3.1 血蓝蛋白的结构及特性第29-30页
        1.3.2 血蓝蛋白功能研究进展第30-33页
    1.4 本论文研究的目的与意义第33-35页
第二章 凡纳滨对虾血蓝蛋白抑菌作用分子机制的初步研究第35-57页
    2.1 实验材料第36-39页
        2.1.1 实验材料第36页
        2.1.2 主要试剂第36页
        2.1.3 溶液配置第36-39页
    2.2 实验方法第39-46页
        2.2.1 虾血清的获取第39页
        2.2.2 硫酸铵分级沉淀纯化抗体第39-40页
        2.2.3 亲和层析纯化血蓝蛋白第40页
        2.2.4 Bradford法测定蛋白浓度第40-41页
        2.2.5 双向电泳第41-42页
        2.2.6 Westernblotting第42页
        2.2.7 亲和凝集素点印记分析第42页
        2.2.8 胰酶水解LHt和LH75第42-43页
        2.2.9 Tricine-SDS-PAGE分析LHt和LH75 肽段差异第43页
        2.2.10 高效液相色谱分析LHt和LH75 胰酶水解肽段差异第43页
        2.2.11 病原菌刺激后血清中LHt和LH75 量差异分析第43页
        2.2.12 副溶血弧菌外膜蛋白提取第43-44页
        2.2.13 与LH75 相结合的副溶血弧菌外膜蛋白的纯化与鉴定第44页
        2.2.14 质谱鉴定蛋白第44-46页
    2.3 结果分析第46-53页
        2.3.1 LHt和LH75 分子结构差异分析第46-49页
        2.3.2 两种血蓝蛋白体内抑菌作用相关性分析第49-50页
        2.3.3 血蓝蛋白抑菌作用靶点分析第50-53页
    2.4 讨论第53-57页
第三章 锯缘青蟹血蓝蛋白凝集活性及其作用靶标分析第57-74页
    3.1 实验材料第58-59页
        3.1.1 实验材料第58页
        3.1.2 溶液配置第58-59页
    3.2 实验方法第59-61页
        3.2.1 锯缘青蟹血清制备第59页
        3.2.2 锯缘青蟹血蓝蛋白的纯化和鉴定第59页
        3.2.3 细菌悬液的制备第59页
        3.2.4 细菌凝集实验第59页
        3.2.5 糖抑制实验第59-60页
        3.2.6 血蓝蛋白凝集作用活性亚基分析第60页
        3.2.7 细菌不同成分凝集抑制实验第60页
        3.2.8 大肠杆菌 K12 外膜蛋白敲除菌凝集实验第60页
        3.2.9 数据统计分析第60-61页
    3.3 结果分析第61-70页
        3.3.1 锯缘青蟹血蓝蛋白的纯化与鉴定第61-63页
        3.3.2 血蓝蛋白凝集活性分析第63-66页
        3.3.3 血蓝蛋白凝集作用亚基分析第66-67页
        3.3.4 血蓝蛋白凝集作用靶标分析第67-70页
    3.4 讨论第70-74页
第四章 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血活性及其作用机制研究第74-86页
    4.1 实验材料第74-75页
        4.1.1 实验材料第74-75页
        4.1.2 主要试剂第75页
        4.1.3 溶液配置第75页
    4.2 实验方法第75-77页
        4.2.1 红细胞悬液配制第75页
        4.2.2 溶血活性测定第75-76页
        4.2.3 溶血动态分析第76页
        4.2.4 渗透保护实验第76页
        4.2.5 SDS-PAGE和Western-blotting分析第76页
        4.2.6 数据统计分析第76-77页
    4.3 结果分析第77-82页
        4.3.1 血蓝蛋白溶血活性分析第77-78页
        4.3.2 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血活性影响因素分析第78-81页
        4.3.3 锯缘青蟹血蓝蛋白与红细胞膜相互作用分析第81页
        4.3.4 锯缘青蟹血蓝蛋白溶血作用机制研究第81-82页
    4.4 讨论第82-86页
小结与展望第86-87页
参考文献第87-108页
致谢第108-109页
已发表和待发表的论文第109页

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