| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 FILIP-1L 抗体制备及其在细胞内和和组织中表达 | 第14-38页 |
| 摘要 | 第14页 |
| 1 前言 | 第14-15页 |
| 2 材料、仪器与试剂 | 第15-22页 |
| ·菌株和表达载体 | 第15页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·细胞株和肝癌组织 | 第15页 |
| ·仪器设备 | 第15-16页 |
| ·主要试剂及配制 | 第16-21页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| 3 方法 | 第22-32页 |
| ·GST-FILIP-1L(1-288)蛋白原核表达 | 第22-25页 |
| ·多克隆抗体制备及效价检测 | 第25-26页 |
| ·抗体纯化 | 第26-28页 |
| ·多克隆抗体亲和力和特异性检测 | 第28-29页 |
| ·不同肝癌细胞中 FILIP-1L 基因检测 | 第29-30页 |
| ·不同肝癌细胞中 FILIP-1L 蛋白检测 | 第30-32页 |
| ·肝癌组织中 FILIP-1L 蛋白检测 | 第32页 |
| 4 实验结果 | 第32-35页 |
| ·GST-FILIP-1L(1-288)蛋白原核诱导表达 | 第32页 |
| ·GST-FILIP-1L(1-288)蛋白纯化 | 第32-33页 |
| ·多克隆抗体效价检测 | 第33页 |
| ·抗体纯化及鉴定 | 第33-34页 |
| ·半定量 RT-PCR 扩增不同肝癌细胞 FILIP-1L 基因 | 第34-35页 |
| ·不同肝癌细胞 FILIP-1L 蛋白表达 | 第35页 |
| ·肝癌组织的 FILIP-1L 蛋白表达 | 第35页 |
| 5 讨论 | 第35-38页 |
| 第二章 FILIP-1L 对肝癌细胞生物学功能的影响 | 第38-50页 |
| 摘要 | 第38页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料及试剂 | 第39-40页 |
| ·细胞株和实验用质粒 | 第39页 |
| ·主要试剂及配制 | 第39-40页 |
| 3 方法 | 第40-42页 |
| ·建立细胞模型 | 第40-41页 |
| ·Western blotting 检验转染效果 | 第41页 |
| ·细胞生长曲线实验（MTT 法） | 第41页 |
| ·细胞迁移实验 | 第41-42页 |
| ·软琼脂克隆实验 | 第42页 |
| 4 结果 | 第42-48页 |
| ·Western blotting 检测细胞株建立 | 第42-43页 |
| ·FILIP-1L 对细胞生长的影响 | 第43-44页 |
| ·细胞迁移实验 | 第44-46页 |
| ·软琼脂克隆实验 | 第46-48页 |
| 5 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 FILIP-1L 与 Rb 的相互作用 | 第50-58页 |
| 摘要 | 第50页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 材料及试剂 | 第51-52页 |
| ·细胞株和质粒 | 第51页 |
| ·主要试剂及配制 | 第51-52页 |
| 3 方法 | 第52-53页 |
| ·建立细胞模型 | 第52页 |
| ·Western blotting 实验 | 第52-53页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第53页 |
| 4 结果 | 第53-56页 |
| ·FILIP-1L 对细胞中 Rb 蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
| ·免疫共沉淀 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 文献综述 FILIP-1L 蛋白生物学功能研究进展 | 第62-74页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 在读期间发表论文及研究成果 | 第76-77页 |
