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猪瘟慢性感染对猪免疫功能影响的细胞与分子机制研究

中文摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略语中英文对照表第10-16页
第一章 文献综述第16-31页
    1. 猪瘟病原学研究第16-20页
        1.1 CSFV病原分类第16页
        1.2 CSFV基因结构与功能第16-20页
            1.2.1 CSFV结构蛋白第17-18页
            1.2.2 CSFV非结构蛋白第18-20页
    2. 猪瘟感染类型第20-22页
        2.1 CSF感染类型第20-21页
        2.2 CSF持续性感染研究第21-22页
    3. 猪瘟病毒分子流行病学第22-24页
    4. 猪瘟病毒强毒感染后在宿主体内的分布第24页
    5. 细胞因子表达水平与抗病毒感染第24-29页
        5.1 细胞因子功能及作用特点第24-25页
        5.2 细胞因子在病毒感染和免疫上的作用第25-27页
        5.3 细胞因子抗猪瘟病毒感染免疫中的作用第27-29页
    6. 本研究目的意义第29-31页
第二章 猪瘟病毒中等致病力毒株HEBHH1/95的全基因组测序及分析第31-43页
    1. 实验材料第31-32页
        1.1 实验用毒株第31页
        1.2 试剂第31-32页
        1.3 主要实验仪器第32页
    2. 方法第32-36页
        2.1 CSFV全基因组测序引物设计第32-33页
        2.2 CSFV基因组基因分段扩增、克隆及序列测定第33-34页
        2.3 CSFV全基因组序列分析第34页
        2.4 CSFV CDS系统发生分析第34-36页
        2.5 CSFV选择压力分析第36页
    3. 结果第36-40页
        3.1 CSFV中等致病力毒株HeBHH1/95全基因组序列分析第36页
        3.2 CSFV毒株同源性比较第36-37页
        3.3 CSFV CDS全长的系统发生分析第37-38页
        3.4 CSFV遗传进化压力分析第38-40页
    4. 讨论第40-42页
        4.1 CSFV中等致病力毒株HeBHH1/95全基因组序列分析第40页
        4.2 CSFV的分子流行病学分析第40-41页
        4.3 CSFV的遗传进化分析第41-42页
    5. 小结第42-43页
第三章 猪瘟病毒慢性感染后的临床症候及组织病理学研究第43-56页
    1. 实验材料第43-44页
        1.1 实验用猪第43页
        1.2 实验用毒株第43页
        1.3 试剂第43-44页
        1.4 实验仪器第44页
    2. 实验方法第44-48页
        2.1 CSFV慢性感染实验用猪的筛选与检测第44-46页
        2.2 CSFV慢性感染实验用猪的分组和实验感染第46页
        2.3 CSFV慢性感染实验用猪体温测定和临床打分第46-47页
        2.4 CSFV慢性感染实验用猪组织样本采集第47页
        2.5 CSFV慢性感染实验用猪组织样本石蜡切片的制备第47页
        2.6 CSFV慢性感染实验用猪组织样本HE染色第47-48页
    3. 结果第48-53页
        3.1 CSFV慢性感染实验用猪相关病原及抗体检测结果第48页
        3.2 CSFV慢性感染后临床症状及病理解剖结果第48-51页
        3.3 CSFV慢性感染后组织切片HE染色结果第51-53页
    4. 讨论第53-55页
        4.1 CSFV慢性感染动物模型的构建第53页
        4.2 CSFV慢性感染的组织病理学研究第53-55页
    5. 小结第55-56页
第四章 猪瘟病毒慢性感染后病毒体内动态分布研究第56-74页
    1 实验材料第56-58页
        1.1 样品采集第56页
        1.2 实验仪器第56-57页
        1.3 试剂第57-58页
    2 实验方法第58-61页
        2.1 CSFV慢性感染实验用猪组织切片的制作第58页
        2.2 CSFV慢性感染实验用猪免疫组化操作步骤第58页
        2.3 CSFV慢性感染实验用猪样品RNA的提取第58页
        2.4 CSFV慢性感染实验用猪不同时期采集的外周血和体外分泌物FQ-PCR检测第58-59页
        2.5 CSFV慢性感染实验用猪外周血猪瘟抗体水平的监测第59页
        2.6 CSFV慢性感染实验用猪组织样本的病毒载量测定第59-61页
    3 实验结果第61-69页
        3.1 CSFV慢性感染后组织器官免疫组化检测结果第61-64页
        3.2 CSFV慢性感染后外周血和体外分泌物的核酸检测结果第64-65页
        3.3 CSFV慢性感染后外周血抗体水平的监测第65页
        3.4 CSFV慢性感染后各组织中CSFV核酸载量检测结果第65-69页
    4 讨论第69-73页
        4.1 CSFV慢性感染后病毒在体内的分布第69-70页
        4.2 CSFV慢性感染后病毒体外排毒情况第70-71页
        4.3 CSFV慢性感染后病毒核酸载量的动态分布第71-72页
        4.4 CSFV慢性感染引起的免疫抑制第72页
        4.5 CSFV慢性感染后病毒与宿主细胞的相互作用第72-73页
    5 小结第73-74页
第五章 猪瘟病毒HEBHH1/95株感染和HCLV免疫对猪外周血细胞的影响第74-87页
    1 材料第74-75页
        1.1 毒株第74-75页
        1.2 实验用猪第75页
        1.3 酶和荧光定量PCR试剂第75页
        1.4 流式细胞仪相关试剂第75页
        1.5 其他试剂第75页
    2 方法第75-76页
        2.1 实验动物分组第75-76页
        2.2 样品采集第76页
        2.3 外周血免疫相关细胞血液常规及免疫细胞检测第76页
        2.4 外周血单个核细胞的分离第76页
        2.5 数据处理方法第76页
    3 结果第76-84页
        3.1 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后猪的临床症状第77-78页
        3.2 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后外周血中核酸载量的动态变化第78页
        3.3 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对外周血中特异性抗体的动态第78-79页
        3.4 CSFV HeBHH1/95株感染后实验猪血常规测定结果第79-81页
        3.5 CSFV HeBHH1/95株感染流式细胞术测定结果第81-84页
    4 讨论第84-86页
        4.1 CSFV HeBHH1/95株感染后对外周血细胞的影响第85页
        4.2 HCLV免疫后对外周血细胞的影响第85-86页
    5 小结第86-87页
第六章 猪瘟病毒HEBHH1/95株感染和HCLV免疫对PBMC细胞因子转录的影响第87-101页
    1 材料第87-88页
        1.1 毒株第87页
        1.2 实验用猪第87页
        1.3 酶和荧光定量PCR试剂第87-88页
        1.4 其他试剂第88页
    2 方法第88-91页
        2.1 实验用猪分组第88页
        2.2 样品采集第88页
        2.3 PBMC总RNA的抽提与反转录第88-89页
        2.4 qRT-PCR对各细胞因子基因转录水平进行检测第89-91页
        2.5 统计学分析第91页
    3 结果第91-97页
        3.1 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-1β转录的影响第91页
        3.2 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-2转录的影响第91-92页
        3.3 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-4转录的影响第92-93页
        3.4 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-8转录的影响第93页
        3.5 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IFN-α转录的影响第93-94页
        3.6 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IFN-β转录的影响第94-95页
        3.7 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对TNF-α转录的影响第95页
        3.8 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对Mx1转录的影响第95-96页
        3.9 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对PKR转录的影响第96页
        3.10 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对OAS转录的影响第96-97页
    4 讨论第97-100页
        4.1 从mRNA转录水平对细胞因子进行检测的意义第97-98页
        4.2 白介素类细胞因子在CSFV感染和疫苗免疫中的作用第98-99页
        4.3 干扰素及其下游作用元件在CSFV感染和疫苗免疫中的作用第99-100页
    5 小结第100-101页
第七章 结论与创新点第101-104页
    结论第101-103页
    创新点第103-104页
附录第104-143页
参考文献第143-162页
致谢第162-163页
作者简介第163页

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