中文摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略语中英文对照表 | 第10-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-31页 |
1. 猪瘟病原学研究 | 第16-20页 |
1.1 CSFV病原分类 | 第16页 |
1.2 CSFV基因结构与功能 | 第16-20页 |
1.2.1 CSFV结构蛋白 | 第17-18页 |
1.2.2 CSFV非结构蛋白 | 第18-20页 |
2. 猪瘟感染类型 | 第20-22页 |
2.1 CSF感染类型 | 第20-21页 |
2.2 CSF持续性感染研究 | 第21-22页 |
3. 猪瘟病毒分子流行病学 | 第22-24页 |
4. 猪瘟病毒强毒感染后在宿主体内的分布 | 第24页 |
5. 细胞因子表达水平与抗病毒感染 | 第24-29页 |
5.1 细胞因子功能及作用特点 | 第24-25页 |
5.2 细胞因子在病毒感染和免疫上的作用 | 第25-27页 |
5.3 细胞因子抗猪瘟病毒感染免疫中的作用 | 第27-29页 |
6. 本研究目的意义 | 第29-31页 |
第二章 猪瘟病毒中等致病力毒株HEBHH1/95的全基因组测序及分析 | 第31-43页 |
1. 实验材料 | 第31-32页 |
1.1 实验用毒株 | 第31页 |
1.2 试剂 | 第31-32页 |
1.3 主要实验仪器 | 第32页 |
2. 方法 | 第32-36页 |
2.1 CSFV全基因组测序引物设计 | 第32-33页 |
2.2 CSFV基因组基因分段扩增、克隆及序列测定 | 第33-34页 |
2.3 CSFV全基因组序列分析 | 第34页 |
2.4 CSFV CDS系统发生分析 | 第34-36页 |
2.5 CSFV选择压力分析 | 第36页 |
3. 结果 | 第36-40页 |
3.1 CSFV中等致病力毒株HeBHH1/95全基因组序列分析 | 第36页 |
3.2 CSFV毒株同源性比较 | 第36-37页 |
3.3 CSFV CDS全长的系统发生分析 | 第37-38页 |
3.4 CSFV遗传进化压力分析 | 第38-40页 |
4. 讨论 | 第40-42页 |
4.1 CSFV中等致病力毒株HeBHH1/95全基因组序列分析 | 第40页 |
4.2 CSFV的分子流行病学分析 | 第40-41页 |
4.3 CSFV的遗传进化分析 | 第41-42页 |
5. 小结 | 第42-43页 |
第三章 猪瘟病毒慢性感染后的临床症候及组织病理学研究 | 第43-56页 |
1. 实验材料 | 第43-44页 |
1.1 实验用猪 | 第43页 |
1.2 实验用毒株 | 第43页 |
1.3 试剂 | 第43-44页 |
1.4 实验仪器 | 第44页 |
2. 实验方法 | 第44-48页 |
2.1 CSFV慢性感染实验用猪的筛选与检测 | 第44-46页 |
2.2 CSFV慢性感染实验用猪的分组和实验感染 | 第46页 |
2.3 CSFV慢性感染实验用猪体温测定和临床打分 | 第46-47页 |
2.4 CSFV慢性感染实验用猪组织样本采集 | 第47页 |
2.5 CSFV慢性感染实验用猪组织样本石蜡切片的制备 | 第47页 |
2.6 CSFV慢性感染实验用猪组织样本HE染色 | 第47-48页 |
3. 结果 | 第48-53页 |
3.1 CSFV慢性感染实验用猪相关病原及抗体检测结果 | 第48页 |
3.2 CSFV慢性感染后临床症状及病理解剖结果 | 第48-51页 |
3.3 CSFV慢性感染后组织切片HE染色结果 | 第51-53页 |
4. 讨论 | 第53-55页 |
4.1 CSFV慢性感染动物模型的构建 | 第53页 |
4.2 CSFV慢性感染的组织病理学研究 | 第53-55页 |
5. 小结 | 第55-56页 |
第四章 猪瘟病毒慢性感染后病毒体内动态分布研究 | 第56-74页 |
1 实验材料 | 第56-58页 |
1.1 样品采集 | 第56页 |
1.2 实验仪器 | 第56-57页 |
1.3 试剂 | 第57-58页 |
2 实验方法 | 第58-61页 |
2.1 CSFV慢性感染实验用猪组织切片的制作 | 第58页 |
2.2 CSFV慢性感染实验用猪免疫组化操作步骤 | 第58页 |
2.3 CSFV慢性感染实验用猪样品RNA的提取 | 第58页 |
2.4 CSFV慢性感染实验用猪不同时期采集的外周血和体外分泌物FQ-PCR检测 | 第58-59页 |
2.5 CSFV慢性感染实验用猪外周血猪瘟抗体水平的监测 | 第59页 |
2.6 CSFV慢性感染实验用猪组织样本的病毒载量测定 | 第59-61页 |
3 实验结果 | 第61-69页 |
3.1 CSFV慢性感染后组织器官免疫组化检测结果 | 第61-64页 |
3.2 CSFV慢性感染后外周血和体外分泌物的核酸检测结果 | 第64-65页 |
3.3 CSFV慢性感染后外周血抗体水平的监测 | 第65页 |
3.4 CSFV慢性感染后各组织中CSFV核酸载量检测结果 | 第65-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
4.1 CSFV慢性感染后病毒在体内的分布 | 第69-70页 |
4.2 CSFV慢性感染后病毒体外排毒情况 | 第70-71页 |
4.3 CSFV慢性感染后病毒核酸载量的动态分布 | 第71-72页 |
4.4 CSFV慢性感染引起的免疫抑制 | 第72页 |
4.5 CSFV慢性感染后病毒与宿主细胞的相互作用 | 第72-73页 |
5 小结 | 第73-74页 |
第五章 猪瘟病毒HEBHH1/95株感染和HCLV免疫对猪外周血细胞的影响 | 第74-87页 |
1 材料 | 第74-75页 |
1.1 毒株 | 第74-75页 |
1.2 实验用猪 | 第75页 |
1.3 酶和荧光定量PCR试剂 | 第75页 |
1.4 流式细胞仪相关试剂 | 第75页 |
1.5 其他试剂 | 第75页 |
2 方法 | 第75-76页 |
2.1 实验动物分组 | 第75-76页 |
2.2 样品采集 | 第76页 |
2.3 外周血免疫相关细胞血液常规及免疫细胞检测 | 第76页 |
2.4 外周血单个核细胞的分离 | 第76页 |
2.5 数据处理方法 | 第76页 |
3 结果 | 第76-84页 |
3.1 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后猪的临床症状 | 第77-78页 |
3.2 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后外周血中核酸载量的动态变化 | 第78页 |
3.3 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对外周血中特异性抗体的动态 | 第78-79页 |
3.4 CSFV HeBHH1/95株感染后实验猪血常规测定结果 | 第79-81页 |
3.5 CSFV HeBHH1/95株感染流式细胞术测定结果 | 第81-84页 |
4 讨论 | 第84-86页 |
4.1 CSFV HeBHH1/95株感染后对外周血细胞的影响 | 第85页 |
4.2 HCLV免疫后对外周血细胞的影响 | 第85-86页 |
5 小结 | 第86-87页 |
第六章 猪瘟病毒HEBHH1/95株感染和HCLV免疫对PBMC细胞因子转录的影响 | 第87-101页 |
1 材料 | 第87-88页 |
1.1 毒株 | 第87页 |
1.2 实验用猪 | 第87页 |
1.3 酶和荧光定量PCR试剂 | 第87-88页 |
1.4 其他试剂 | 第88页 |
2 方法 | 第88-91页 |
2.1 实验用猪分组 | 第88页 |
2.2 样品采集 | 第88页 |
2.3 PBMC总RNA的抽提与反转录 | 第88-89页 |
2.4 qRT-PCR对各细胞因子基因转录水平进行检测 | 第89-91页 |
2.5 统计学分析 | 第91页 |
3 结果 | 第91-97页 |
3.1 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-1β转录的影响 | 第91页 |
3.2 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-2转录的影响 | 第91-92页 |
3.3 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-4转录的影响 | 第92-93页 |
3.4 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IL-8转录的影响 | 第93页 |
3.5 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IFN-α转录的影响 | 第93-94页 |
3.6 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对IFN-β转录的影响 | 第94-95页 |
3.7 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对TNF-α转录的影响 | 第95页 |
3.8 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对Mx1转录的影响 | 第95-96页 |
3.9 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对PKR转录的影响 | 第96页 |
3.10 CSFV HeBHH1/95株感染和HCLV免疫后对OAS转录的影响 | 第96-97页 |
4 讨论 | 第97-100页 |
4.1 从mRNA转录水平对细胞因子进行检测的意义 | 第97-98页 |
4.2 白介素类细胞因子在CSFV感染和疫苗免疫中的作用 | 第98-99页 |
4.3 干扰素及其下游作用元件在CSFV感染和疫苗免疫中的作用 | 第99-100页 |
5 小结 | 第100-101页 |
第七章 结论与创新点 | 第101-104页 |
结论 | 第101-103页 |
创新点 | 第103-104页 |
附录 | 第104-143页 |
参考文献 | 第143-162页 |
致谢 | 第162-163页 |
作者简介 | 第163页 |