| 论文创新点 | 第6-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 中英文缩略对照表 | 第15-17页 |
| 第一章 锌指蛋白概述及ZNF268研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 前言 | 第17-18页 |
| 1.2 锌指蛋白概述 | 第18-23页 |
| 1.2.1 锌指蛋白简介 | 第18-19页 |
| 1.2.2 C2H2型锌指蛋白 | 第19-20页 |
| 1.2.3 KRAB型锌指蛋白 | 第20-23页 |
| 1.2.3.1 KRAB型锌指蛋白结构 | 第20页 |
| 1.2.3.2 KRAB型锌指蛋白生物学功能 | 第20-23页 |
| 1.3 ZNF268研究进展 | 第23-27页 |
| 1.3.1 ZNF268基因的结构特征 | 第23-24页 |
| 1.3.2 ZNF268潜在的生物学功能 | 第24-27页 |
| 1.3.2.1 ZNF268与人胚胎肝脏发育相关 | 第24-25页 |
| 1.3.2.2 ZNF268与造血系统发育相关 | 第25-27页 |
| 第二章 ZNF268在人正常及肿瘤组织中的表达 | 第27-42页 |
| 2.1 前言 | 第27-29页 |
| 2.2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 材料 | 第29-30页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第30页 |
| 2.2.3 方法 | 第30-34页 |
| 2.2.3.1 免疫组化 | 第30-32页 |
| 2.2.3.2 定量PCR检测ZNF268各种转录本的表达 | 第32-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 2.3.1 ZNF268在人不同组织中的表达 | 第34-35页 |
| 2.3.2 ZNF268在人宫颈组织中的表达 | 第35-39页 |
| 2.3.2.1 ZNF268蛋白在人宫颈组织中的表达 | 第36-38页 |
| 2.3.3.2 ZNF268 RNA在人宫颈组织中的表达 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 下调ZNF268对宫颈癌细胞HeLa增殖的影响 | 第42-67页 |
| 3.1 前言 | 第42-43页 |
| 3.2 材料和方法 | 第43-52页 |
| 3.2.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.2.1.1 细胞系 | 第43页 |
| 3.2.1.2 干扰慢病毒载体 | 第43页 |
| 3.2.1.3 试剂盒和抗体 | 第43-44页 |
| 3.2.1.4 主要试剂及其配制 | 第44页 |
| 3.2.1.5 仪器设备 | 第44页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第44-52页 |
| 3.2.2.1 ZNF268下调稳转HeLa细胞系的建立 | 第44-45页 |
| 3.2.2.2 Western blot | 第45-47页 |
| 3.2.2.3 MTT法 | 第47-48页 |
| 3.2.2.4 软琼脂实验 | 第48页 |
| 3.2.2.5 EdU标记 | 第48-49页 |
| 3.2.2.6 PI染色检测细胞周期和凋亡 | 第49页 |
| 3.2.2.7 Confocal检测细胞凋亡 | 第49-50页 |
| 3.2.2.8 细胞划痕 | 第50页 |
| 3.2.2.9 裸鼠皮下成瘤 | 第50-51页 |
| 3.2.2.10 HE染色 | 第51页 |
| 3.2.2.11 免疫组化 | 第51-52页 |
| 3.3 实验结果 | 第52-64页 |
| 3.3.1 ZNF268下调稳转HeLa细胞系的建立 | 第52-53页 |
| 3.3.2 ZNF268下调对HeLa细胞增殖的影响 | 第53-55页 |
| 3.3.3 ZNF268下调对HeLa细胞增殖脱靶效应的排除 | 第55-56页 |
| 3.3.4 ZNF268下调对HeLa细胞周期的影响 | 第56-58页 |
| 3.3.5 ZNF268下调对TNFα诱导HeLa细胞凋亡的影响 | 第58-60页 |
| 3.3.6 ZNF268下调对HeLa细胞迁移的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.7 ZNF268下调对HeLa细胞裸鼠皮下成瘤的影响 | 第61-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 ZNF268影响宫颈癌细胞HeLa增殖机制研究 | 第67-90页 |
| 4.1 前言 | 第67-69页 |
| 4.2 材料与方法 | 第69-75页 |
| 4.2.1 材料 | 第69-70页 |
| 4.2.1.1 细胞 | 第69页 |
| 4.2.1.2 质粒 | 第69-70页 |
| 4.2.1.3 试剂 | 第70页 |
| 4.2.2 方法 | 第70-75页 |
| 4.2.2.1 载体构建 | 第70-71页 |
| 4.2.2.2 检测报告基因荧光素酶活性 | 第71页 |
| 4.2.2.3 Western blot | 第71页 |
| 4.2.2.4 免疫沉淀 | 第71-72页 |
| 4.2.2.5 胞质胞核蛋白分离 | 第72页 |
| 4.2.2.6 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第72-74页 |
| 4.2.2.7 免疫组化 | 第74-75页 |
| 4.3 实验结果 | 第75-87页 |
| 4.3.1 ZNF268和NF-κB通路在宫颈癌发生过程中的相关性 | 第75-76页 |
| 4.3.2 ZNF268对NF-κB通路活性的影响 | 第76-82页 |
| 4.3.3 ZNF268下调对HeLa细胞裸鼠皮下成瘤中NF-κB通路的影响 | 第82-85页 |
| 4.3.4 NF-κB通路对ZNF268功能的影响 | 第85-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-90页 |
| 第五章 KRAB核定位功能及机制研究 | 第90-122页 |
| 5.1 前言 | 第90-92页 |
| 5.2 材料与方法 | 第92-106页 |
| 5.2.1 材料 | 第92-95页 |
| 5.2.1.1 菌株及细胞系 | 第92页 |
| 5.2.1.2 载体 | 第92页 |
| 5.2.1.3 试剂 | 第92-93页 |
| 5.2.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第93-94页 |
| 5.2.1.5 仪器设备 | 第94-95页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第95-106页 |
| 5.2.2.1 载体构建 | 第95-102页 |
| 5.2.2.2 细胞培养 | 第102-103页 |
| 5.2.2.3 细胞转染 | 第103页 |
| 5.2.2.4 Confocal检测 | 第103-104页 |
| 5.2.2.5 GST Pull down | 第104-105页 |
| 5.2.2.6 Western blot | 第105-106页 |
| 5.3 实验结果 | 第106-118页 |
| 5.3.1 载体构建 | 第106-107页 |
| 5.3.2 KRAB核定位功能研究 | 第107-109页 |
| 5.3.3 KRAB发挥核定位功能的关键位点 | 第109-112页 |
| 5.3.4 KRAB作为NLS的普遍性 | 第112-114页 |
| 5.3.5 KRAB发挥核定位功能的分子机制 | 第114-118页 |
| 5.4 讨论 | 第118-122页 |
| 研究总结与展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-135页 |
| 博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
