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SEB受体拮抗剂在大肠杆菌中的高效可溶性表达、纯化及活性初步研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词第9-10页
前言第10-13页
第一部分 GST-TCR 融合标签蛋白的构建、表达和纯化第13-23页
    引言第13页
    1 实验材料第13-15页
        1.1 菌株和质粒第13-14页
        1.2 工具酶,抗体及化学试剂第14页
        1.3 实验仪器第14-15页
    2 实验方法第15-18页
        2.1 SEB TCR Vβ质粒的测序第15页
        2.2 引物的设计与合成第15页
        2.3 pMD-18T-TCR 重组质粒的构建第15-16页
        2.4 表达载体质粒的构建第16页
        2.5 BL21(DE3)感受态的制备第16-17页
        2.6 大肠杆菌 BL21(DE3)阳性克隆菌的表达第17页
        2.7 目的蛋白的纯化第17-18页
    3 实验结果第18-21页
        3.1 PGEX4T-1-TCR 重组质粒的构建第18-19页
        3.2 目的蛋白 GST-TCR 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达第19-20页
        3.3 GST-TCR 蛋白的纯化结果第20-21页
    讨论第21-23页
第二部分 TRX-TCR 融合标签蛋白的构建、表达和 HIS-TCR 和 PKJE7 分子伴侣蛋白的构建、共表达、纯化第23-36页
    引言第23-24页
    一、TRX-TCR 融合标签蛋白的构建、表达第24-29页
        1 实验材料第24-25页
        2 实验方法第25-26页
        3 实验结果第26-29页
    二、HIS-TCR 和 PKJE7 分子伴侣蛋白的共表达和纯化第29-34页
        1 实验材料第29页
        2 实验方法第29-31页
        3 实验结果第31-34页
    讨论第34-36页
第三部分 GST-TCR、GST、HIS-TCR 蛋白的 ELISA 活性检测与对动物发热模型救治实验第36-42页
    引言第36页
    1 实验材料第36-37页
        1.1 材料第36-37页
        1.2 实验仪器第37页
    2 实验方法第37-38页
        2.1 GST-TCR、GST、His-TCR 蛋白的 ELISA 活性的检测第37-38页
        2.2 GST-TCR、GST、His-TCR 蛋白对动物发热模型救治实验第38页
    3 实验结果第38-41页
        3.1 GST-TCR、GST、His-TCR、变性 His-TCR 蛋白与 SEB 结合的 ELISA 检测第38-39页
        3.2 GST-TCR、GST、His-TCR 对 SEB 引起的对新西兰兔发热模型救治实验的救治效果第39-41页
    讨论第41-42页
结论第42-43页
参考文献第43-46页
附录 本研究主要试剂的配制第46-48页
致谢第48页

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