摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词 | 第9-10页 |
前言 | 第10-13页 |
第一部分 GST-TCR 融合标签蛋白的构建、表达和纯化 | 第13-23页 |
引言 | 第13页 |
1 实验材料 | 第13-15页 |
1.1 菌株和质粒 | 第13-14页 |
1.2 工具酶,抗体及化学试剂 | 第14页 |
1.3 实验仪器 | 第14-15页 |
2 实验方法 | 第15-18页 |
2.1 SEB TCR Vβ质粒的测序 | 第15页 |
2.2 引物的设计与合成 | 第15页 |
2.3 pMD-18T-TCR 重组质粒的构建 | 第15-16页 |
2.4 表达载体质粒的构建 | 第16页 |
2.5 BL21(DE3)感受态的制备 | 第16-17页 |
2.6 大肠杆菌 BL21(DE3)阳性克隆菌的表达 | 第17页 |
2.7 目的蛋白的纯化 | 第17-18页 |
3 实验结果 | 第18-21页 |
3.1 PGEX4T-1-TCR 重组质粒的构建 | 第18-19页 |
3.2 目的蛋白 GST-TCR 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达 | 第19-20页 |
3.3 GST-TCR 蛋白的纯化结果 | 第20-21页 |
讨论 | 第21-23页 |
第二部分 TRX-TCR 融合标签蛋白的构建、表达和 HIS-TCR 和 PKJE7 分子伴侣蛋白的构建、共表达、纯化 | 第23-36页 |
引言 | 第23-24页 |
一、TRX-TCR 融合标签蛋白的构建、表达 | 第24-29页 |
1 实验材料 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-26页 |
3 实验结果 | 第26-29页 |
二、HIS-TCR 和 PKJE7 分子伴侣蛋白的共表达和纯化 | 第29-34页 |
1 实验材料 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-31页 |
3 实验结果 | 第31-34页 |
讨论 | 第34-36页 |
第三部分 GST-TCR、GST、HIS-TCR 蛋白的 ELISA 活性检测与对动物发热模型救治实验 | 第36-42页 |
引言 | 第36页 |
1 实验材料 | 第36-37页 |
1.1 材料 | 第36-37页 |
1.2 实验仪器 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-38页 |
2.1 GST-TCR、GST、His-TCR 蛋白的 ELISA 活性的检测 | 第37-38页 |
2.2 GST-TCR、GST、His-TCR 蛋白对动物发热模型救治实验 | 第38页 |
3 实验结果 | 第38-41页 |
3.1 GST-TCR、GST、His-TCR、变性 His-TCR 蛋白与 SEB 结合的 ELISA 检测 | 第38-39页 |
3.2 GST-TCR、GST、His-TCR 对 SEB 引起的对新西兰兔发热模型救治实验的救治效果 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
附录 本研究主要试剂的配制 | 第46-48页 |
致谢 | 第48页 |