| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 课题研究的目的和意义 | 第7-8页 |
| 1.2 国内外在该方向的研究现状及分析 | 第8-12页 |
| 1.2.1 哈茨木霉 | 第8-10页 |
| 1.2.2 细胞色素P450 | 第10-11页 |
| 1.2.3 麦角甾醇 | 第11-12页 |
| 1.3 丝状真菌功能研究方法 | 第12-15页 |
| 1.3.1 根癌农杆菌介导转化法 | 第12页 |
| 1.3.2 RNA干扰(RNA interference, RNAi) | 第12-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-26页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第15页 |
| 2.2 药品、试剂与培养基 | 第15-17页 |
| 2.3 仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.4 实验内容与实验方法 | 第18-26页 |
| 2.4.1 研究内容 | 第18-19页 |
| 2.4.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 第3章 perg-22 基因全序列的获得 | 第26-29页 |
| 3.1 基因全序列的获得 | 第26-28页 |
| 3.2 本章小结 | 第28-29页 |
| 第4章 沉默载体的构建 | 第29-37页 |
| 4.1 质粒图谱 | 第29-30页 |
| 4.2 靶基因的获得 | 第30-31页 |
| 4.3 构建中间载体pSilent-1-pergs | 第31-34页 |
| 4.4 构建沉默载体pCambia1301-pergs | 第34页 |
| 4.5 沉默载体pCambia1301-pergs的验证 | 第34-36页 |
| 4.6 本章小结 | 第36-37页 |
| 第5章 哈茨木霉T88 的转化与筛选 | 第37-42页 |
| 5.1 根癌农杆菌的转化 | 第37页 |
| 5.2 哈茨木霉T88 对潮霉素的敏感性测试 | 第37页 |
| 5.3 哈茨木霉T88 的转化与筛选 | 第37-38页 |
| 5.4 转化子的检测 | 第38-40页 |
| 5.4.1 潮霉素B基因鉴定 | 第38-39页 |
| 5.4.2 ITS序列鉴定 | 第39-40页 |
| 5.5 哈茨木霉T88 转化子遗传稳定性测试 | 第40-41页 |
| 5.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第6章 基因功能研究 | 第42-50页 |
| 6.1 预实验及结果 | 第42-43页 |
| 6.2 哈茨木霉T88 野生型与转化子cDNA的获得 | 第43-44页 |
| 6.2.1 RNA提取 | 第43页 |
| 6.2.2 逆转录 | 第43-44页 |
| 6.3 Real Time PCR | 第44-45页 |
| 6.4 沉默基因的验证及能量代谢相关基因表达量分析 | 第45-47页 |
| 6.5 麦角甾醇的检测 | 第47-49页 |
| 6.6 本章小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
