中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、miR-19a和miR-19b对宫颈癌细胞系增殖和侵袭的影响 | 第17-34页 |
1.1 材料和方法 | 第17-26页 |
1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-26页 |
1.2 结果 | 第26-32页 |
1.2.1 实时定量PCR检测miR-19a、miR-19b在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的差异表达 | 第26-27页 |
1.2.2 瞬转pcDNA3.1/pri-miR-19a/b和ASO-19a/b后Real-time PCR检测质粒的有效性 | 第27-28页 |
1.2.3 WST-1实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第28-29页 |
1.2.4 生长曲线实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞增殖能力的影响 | 第29-30页 |
1.2.5 细胞集落形成实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第30-31页 |
1.2.6 Transwell检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞侵袭能力的影响 | 第31-32页 |
1.3 小结 | 第32-34页 |
二、miR-19a和miR-19b在宫颈癌中靶基因的确定和验证 | 第34-48页 |
2.1 材料和方法 | 第34-43页 |
2.1.1 实验材料 | 第34-36页 |
2.1.2 实验方法 | 第36-43页 |
2.2 结果 | 第43-47页 |
2.2.1 EGFP荧光报告载体构建 | 第43页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证CUL5是miR-19a和miR-19b的直接作用靶基因 | 第43-44页 |
2.2.3 实时定量RT-PCR检测CUL5在宫颈癌组织和正常肝组织中的差异表达 | 第44-45页 |
2.2.4 Real-Time PCR方法检测在过表达和封闭miR-19a、miR-19b后的HeLa和C33A细胞中CUL5 mRNA的表达水平 | 第45-46页 |
2.2.5 Western blot检测在过表达miR-19a、miR-19b后的HeLa和C33A细胞中CUL5蛋白水平的表达水平 | 第46-47页 |
2.3 小结 | 第47-48页 |
三、靶基因CUL5在宫颈癌细胞中的作用研究 | 第48-58页 |
3.1 材料和方法 | 第48-49页 |
3.1.1 实验材料 | 第48页 |
3.1.2 实验方法 | 第48-49页 |
3.2 结果 | 第49-57页 |
3.2.1 pSilencer/si-CUL5质粒的构建和有效性 | 第49-50页 |
3.2.2 WST-1检测基因CUL5对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第50-51页 |
3.2.3 生长曲线实验检测CUL5对宫颈癌细胞增殖能力的影响 | 第51页 |
3.2.4 细胞集落形成实验分析CUL5对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第51-52页 |
3.2.5 Transwell检测CUL5对宫颈癌细胞侵袭能力的影响 | 第52-53页 |
3.2.6 挽救实验 | 第53-57页 |
3.3 小结 | 第57-58页 |
讨论 | 第58-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
综述 | 第67-76页 |
综述参考文献 | 第73-76页 |
致谢 | 第76页 |