| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 手性药物 | 第11页 |
| 1.2 硫辛酸简介 | 第11-12页 |
| 1.3 硫辛酸的功能及应用 | 第12页 |
| 1.4 硫辛酸的国内外生产企业及生产路线和规模 | 第12-13页 |
| 1.5 α-硫辛酸的化学合成方法 | 第13-18页 |
| 1.5.1 己二酸及其衍生物合成法 | 第13-15页 |
| 1.5.2 环己酮及其衍生物合成法 | 第15-16页 |
| 1.5.3 其他化学合成方法 | 第16-17页 |
| 1.5.4 常用化学方法比较 | 第17-18页 |
| 1.6 (R)-α-硫辛酸的生物合成法 | 第18-21页 |
| 1.6.1 酯酶/脂肪酶催化拆分法 | 第18-19页 |
| 1.6.2 不对称还原法 | 第19-21页 |
| 1.6.3 常用(R)-α-硫辛酸生物合成的方法比较 | 第21页 |
| 1.7 有机介质中的生物催化反应 | 第21-23页 |
| 1.7.1 有机溶剂中酶的催化活力 | 第21-22页 |
| 1.7.2 有机溶剂中酶的稳定性 | 第22页 |
| 1.7.3 有机介质中的酶促乙酰化反应 | 第22-23页 |
| 1.8 本课题的研究目的及意义 | 第23页 |
| 1.9 本论文的主要研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 催化剂的筛选 | 第25-31页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 化学试剂和酶 | 第25-26页 |
| 2.2.2 仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 乙酰化方法 | 第26页 |
| 2.3.2 底物6-羟基-8-氯辛酸乙酯的纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.3 6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的制备(分析用标样) | 第27页 |
| 2.3.4 重组菌脂肪酶的表达及制备 | 第27页 |
| 2.3.5 催化剂的初筛 | 第27页 |
| 2.3.6 催化剂的复筛 | 第27-28页 |
| 2.3.7 分析方法 | 第28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-30页 |
| 2.4.1 底物6-羟基-8-氯辛酸乙酯的纯化 | 第28页 |
| 2.4.2 6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的化学法合成(分析用标样) | 第28-29页 |
| 2.4.3 初筛 | 第29页 |
| 2.4.4 复筛 | 第29-30页 |
| 2.5 本章总结 | 第30-31页 |
| 第3章 6-羟基-8-氯辛酸乙酯酶促拆分过程优化 | 第31-48页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 实验材料 | 第31页 |
| 3.2.1 化学试剂和酶 | 第31页 |
| 3.2.2 仪器 | 第31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.3.1 酰基供体的选择 | 第31-32页 |
| 3.3.2 动力学参数的测定 | 第32页 |
| 3.3.3 温度对酶促乙酰化反应的影响 | 第32页 |
| 3.3.4 反应介质对酶促乙酰化反应的影响 | 第32页 |
| 3.3.5 底物和酰化剂加入比例的优化 | 第32-33页 |
| 3.3.6 水活度对6-羟基-8-氯辛酸乙酯乙酰化反应的影响 | 第33页 |
| 3.3.7 Novozym 435的上载量对乙酰化反应的影响 | 第33页 |
| 3.3.8 CALB游离酶粉的制备 | 第33页 |
| 3.3.9 6-羟基-8-氯辛酸乙酯浓度标准曲线的绘制 | 第33-34页 |
| 3.3.10 6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯浓度标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
| 3.3.11 Novozym 435对底物和产物吸附量的测定 | 第35页 |
| 3.3.12 Novozym 435的底物耐受性考察 | 第35页 |
| 3.3.13 (R)-6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的克级制备 | 第35-36页 |
| 3.3.14 固定化酶Novozym 435的操作稳定性 | 第36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-47页 |
| 3.4.1 酰基供体的选择 | 第36页 |
| 3.4.2 动力学参数的测定 | 第36-38页 |
| 3.4.3 反应温度优化和反应活化能 | 第38-39页 |
| 3.4.4 最适反应介质的选取 | 第39-41页 |
| 3.4.5 反应体系水活度的优化 | 第41-42页 |
| 3.4.6 Novozym 435上载量的优化 | 第42-43页 |
| 3.4.7 Novozym 435吸附底物和产物的研究 | 第43-45页 |
| 3.4.8 Novozym 435的底物耐受性考察 | 第45-46页 |
| 3.4.9 (R)-6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的克级制备 | 第46页 |
| 3.4.10 固定化酶Novozym 435的操作稳定性 | 第46-47页 |
| 3.5 本章总结 | 第47-48页 |
| 第4章 Novozym 435失活机理的探讨 | 第48-60页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48页 |
| 4.2.1 化学试剂和酶 | 第48页 |
| 4.2.2 仪器 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-52页 |
| 4.3.1 6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯浓度标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
| 4.3.2 Novozym 435酶活的测定方法 | 第49页 |
| 4.3.3 温度对Novozym 435稳定性的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.4 有机溶剂对Novozym 435稳定性的影响 | 第50页 |
| 4.3.5 底物浓度对Novozym 435稳定性的影响 | 第50页 |
| 4.3.6 酰化剂对酶活力和稳定性的影响 | 第50页 |
| 4.3.7 反应介质对酶活力和稳定性的影响 | 第50页 |
| 4.3.8 温度对酶活力和稳定性的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.9 Novozym 435上载量对酶催化活力的影响 | 第51页 |
| 4.3.10 固定化酶Novozym 435的操作稳定性 | 第51页 |
| 4.3.11 (R)-6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的克级制备 | 第51页 |
| 4.3.12 产物旋光度的测定 | 第51-52页 |
| 4.4 实验结果 | 第52-58页 |
| 4.4.1 温度对Novozym 435稳定性的影响 | 第52页 |
| 4.4.2 有机溶剂对Novozym 435稳定性的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.3 底物6-羟基-8-氯辛酸乙酯对Novozym 435稳定性的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.4 酰化剂对酶活力和稳定性的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.5 有机溶剂对酶活力和稳定性的影响 | 第55页 |
| 4.4.6 温度对酶活力和稳定性的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.7 Novozym 435上载量对乙酰化反应初速度的影响及单位酶量生产率的考察 | 第56-57页 |
| 4.4.8 固定化酶Novo-m 435的操作稳定性 | 第57-58页 |
| 4.4.9 (R)-6-乙酰氧基-8-氯辛酸乙酯的克级制备 | 第58页 |
| 4.5 本章总结 | 第58-60页 |
| 第5章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 攻读硕士期间撰写的论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
