| 英文缩写词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 1 引言 | 第12-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-28页 |
| 2.1 材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 引物合成及序列测定 | 第15页 |
| 2.1.2 菌株与细胞株 | 第15页 |
| 2.1.3 质粒 | 第15页 |
| 2.1.4 分子生物学试剂和化学试剂 | 第15页 |
| 2.1.5 细胞培养试剂和转染试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.6 抗体 | 第16-17页 |
| 2.1.7 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.8 常用溶液配方 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 质粒构建与鉴定 | 第18-19页 |
| 2.2.2 慢病毒包装及哺乳动物细胞稳定克隆的制备 | 第19-20页 |
| 2.2.3 哺乳动物细胞的转染 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞全蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第20-21页 |
| 2.2.5 Western blot分析 | 第21页 |
| 2.2.6 GST融合蛋白的诱导表达 | 第21-22页 |
| 2.2.7 GST融合蛋白的纯化 | 第22页 |
| 2.2.8 GST沉淀(pull-down)分析 | 第22-23页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀IP | 第23页 |
| 2.2.10 细胞免疫荧光 | 第23-24页 |
| 2.2.11 总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.12 反转录PCR(RT-PCR) | 第24-25页 |
| 2.2.13 Real-time PCR | 第25页 |
| 2.2.14 细胞周期同步化方法 | 第25-26页 |
| 2.2.14.1 G1、S期细胞的获得 | 第25-26页 |
| 2.2.14.2 G2、M期细胞的获得 | 第26页 |
| 2.2.15 流式细胞仪检测细胞生长周期 | 第26页 |
| 2.2.16 细胞生长分析 | 第26页 |
| 2.2.17 划痕试验 | 第26-27页 |
| 2.2.18 内源性免疫共沉淀 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-55页 |
| 3.1 FHL与α/β-tubulin物理互作研究 | 第28-35页 |
| 3.1.1 FHL1过表达及敲低稳定细胞系的建立 | 第28-29页 |
| 3.1.2 筛选与FHL1相互作用的蛋白 | 第29-35页 |
| 3.1.2.1 FHL1与α-β-tubulin在细胞外相互作用 | 第29-30页 |
| 3.1.2.2 FHL1与α/β-tubulin在细胞内相互作用 | 第30-31页 |
| 3.1.2.3 FHL1与α/β-tubulin在生理条件下相互作用 | 第31-32页 |
| 3.1.2.4 FHL1和α-tubulin相互作用区域的定位 | 第32-35页 |
| 3.2 FHL1与α-tubulin功能互作研究 | 第35-47页 |
| 3.2.1 FHL1不影响α/β-tubulin的表达 | 第35页 |
| 3.2.2 FHL1调节α-tubulin的乙酰化 | 第35-37页 |
| 3.2.3 FHL1调节α-tubulin的乙酰化不依赖于两者的相互作用 | 第37-38页 |
| 3.2.4 FHL家族和LMO家族都具有调节α-tubulin乙酰化的功能 | 第38-39页 |
| 3.2.5 FHL1通过调节α-tubulin的乙酰化调控细胞生长 | 第39-40页 |
| 3.2.6 FHL1通过调节α-tubulin的乙酰化调控细胞迁移 | 第40-41页 |
| 3.2.7 FHL1并非通过调节α-tubulin的乙酰化调控细胞周期 | 第41-44页 |
| 3.2.8 FHL1抑制体外微管的组装 | 第44-45页 |
| 3.2.9 过量表达FHL1抑制微管恢复 | 第45-46页 |
| 3.2.10 敲低FHL1使肝癌细胞对紫杉醇敏感 | 第46-47页 |
| 3.3 FHL1影响微管组装和稳定的分子机制研究 | 第47-55页 |
| 3.3.1 FHL1不影响α/β-tubulin二聚体的形成 | 第47-48页 |
| 3.3.2 FHL1不通过α-tubulin的去乙酰化酶调节α-tubulin的乙酰化 | 第48-49页 |
| 3.3.3 FHL1通过p38途径调节Tau的磷酸化进而调节α-tubulin的乙酰化 | 第49-53页 |
| 3.3.3.1 FHL1通过调节Tau的磷酸化水平调节α-tubulin的乙酰化 | 第49-50页 |
| 3.3.3.2 FHL1通过p38途径而不是GSK-β途径调节Tau的磷酸化 | 第50-51页 |
| 3.3.3.3 FHL1通过p38途径调节α-tubulin的乙酰化 | 第51-52页 |
| 3.3.3.4 FHL1通过MKK3-p38途径调节α-tubulin的乙酰化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 Taxol和H_2O_2诱导FHL1表达 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
