| 中文摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 Angiopep修饰的载基因纳米粒靶向治疗脑胶质瘤 | 第16-29页 |
| 1 材料和仪器 | 第17-18页 |
| 1.1 试剂和材料 | 第17页 |
| 1.2 仪器 | 第17-18页 |
| 1.3 细胞株 | 第18页 |
| 1.4 实验动物 | 第18页 |
| 2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2 PAMAM-PEG-Angiopep的合成与表征 | 第19页 |
| 2.3 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL的制备与表征 | 第19页 |
| 2.3.1 制备 | 第19页 |
| 2.3.2 粒径、Zeta电位 | 第19页 |
| 2.3.3 透射电镜 | 第19页 |
| 2.4 PAMAM-PEG-Angiopep/DNA体外毒性考察 | 第19-20页 |
| 2.5 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL的入胞情况 | 第20页 |
| 2.6 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL体外药效学评价 | 第20页 |
| 2.7 脑胶质瘤模型鼠的构建 | 第20-21页 |
| 2.8 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL体内药效学评价 | 第21-23页 |
| 2.8.1 实验分组及给药方案 | 第21页 |
| 2.8.2 原位TUNEL检测脑胶质瘤凋亡 | 第21-22页 |
| 2.8.3 脑胶质瘤模型鼠存活时间考察 | 第22-23页 |
| 2.9 数据统计 | 第23页 |
| 3 实验结果 | 第23-27页 |
| 3.1 PAMAM-PEG-Angiopep的表征 | 第23页 |
| 3.2 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL的表征 | 第23-24页 |
| 3.3 PAMAM-PEG-Angiopep/DNA体外毒性考察 | 第24页 |
| 3.4 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL的入胞情况 | 第24-25页 |
| 3.5 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL体外药效学评价 | 第25-26页 |
| 3.6 PAMAM-PEG-Angiopep/pORF-TRAIL体内药效学评价 | 第26-27页 |
| 3.6.1 原位TUNEL检测脑胶质瘤凋亡 | 第26-27页 |
| 3.6.2 脑胶质瘤模型鼠存活时间考察 | 第27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| 4.1 载基因纳米粒的系统安全性及粒径分布情况 | 第27页 |
| 4.2 载基因纳米粒进入肿瘤细胞及基因转染能力 | 第27-28页 |
| 4.3 载基因纳米粒治疗脑胶质瘤的药效学评价 | 第28页 |
| 5 小结 | 第28-29页 |
| 第二章 dtACPP修饰的肿瘤靶向智能纳米粒的构建及体内外评价 | 第29-51页 |
| 第一节 dtACPP及相应纳米载体的设计、构建及评价 | 第31-40页 |
| 1 材料和仪器 | 第31-32页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第31页 |
| 1.2 仪器 | 第31页 |
| 1.3 细胞株 | 第31-32页 |
| 1.4 实验动物 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 2.2 肿瘤靶向性纳米载体dtACPPD的合成与表征 | 第32-33页 |
| 2.2.1 dtACPPD的合成 | 第32-33页 |
| 2.2.2 dtACPPD的表征 | 第33页 |
| 2.3 MMP2酶切 | 第33页 |
| 2.4 SDS-PAGE验证MMP2酶切效果 | 第33页 |
| 2.5 dtACPPD在不同细胞系上的摄取 | 第33-34页 |
| 2.6 荷瘤模型鼠的构建 | 第34页 |
| 2.6.1 脑胶质瘤模型鼠 | 第34页 |
| 2.6.2 皮下瘤模型鼠 | 第34页 |
| 2.7 dtACPPD在荷瘤模型鼠中的体内分布 | 第34-35页 |
| 2.7.1 dtACPPD在脑胶质瘤模型鼠中的体内分布 | 第34页 |
| 2.7.2 dtACPPD在皮下瘤模型鼠中的体内分布 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-38页 |
| 3.1 dtACPPD的表征 | 第35页 |
| 3.2 SDS-PAGE验证MMP2酶切效果 | 第35-36页 |
| 3.3 dtACPPD在不同细胞系上的摄取 | 第36-37页 |
| 3.4 dtACPPD在荷瘤模型鼠中的体内分布 | 第37-38页 |
| 3.4.1 dtACPPD在脑胶质瘤模型鼠中的体内分布 | 第37页 |
| 3.4.2 dtACPPD在皮下瘤模型鼠中的体内分布 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 去屏蔽化验证 | 第38页 |
| 4.2 dtACPPD的细胞摄取效率 | 第38-39页 |
| 4.3 dtACPPD的肿瘤靶向性 | 第39-40页 |
| 第二节 dtACPP修饰的肿瘤靶向智能纳米粒的构建及体内外评价 | 第40-51页 |
| 1 材料和仪器 | 第40页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第40页 |
| 1.2 仪器 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 肿瘤靶向智能纳米粒dtACPPD/DNA的制备和包封情况 | 第40-41页 |
| 2.1.1 制备 | 第40-41页 |
| 2.1.2 凝胶电泳 | 第41页 |
| 2.2 dtACPPD/DNA的表征 | 第41页 |
| 2.2.1 粒径、Zeta电位 | 第41页 |
| 2.2.2 原子力显微镜 | 第41页 |
| 2.3 dtACPPD/DNA在不同细胞系上的毒性考察 | 第41页 |
| 2.4 dtACPPD/DNA在不同细胞系上的摄取情况 | 第41-42页 |
| 2.5 dtACPPD/DNA在荷瘤模型鼠上的体内分布 | 第42页 |
| 2.5.1 dtACPPD/DNA在脑胶质瘤模型鼠上的体内分布 | 第42页 |
| 2.5.2 dtACPPD/DNA在皮下瘤模型鼠上的体内分布 | 第42页 |
| 2.6 dtACPPD/DNA在荷瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第42-43页 |
| 2.6.1 dtACPPD/DNA在脑胶质瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第42-43页 |
| 2.6.2 dtACPPD/DNA在皮下瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第43页 |
| 3 实验结果 | 第43-49页 |
| 3.1 dtACPPD/DNA凝胶电泳 | 第43页 |
| 3.2 dtACPPD/DNA的表征 | 第43-44页 |
| 3.3 dtACPPD/DNA在不同细胞系上的毒性考察 | 第44页 |
| 3.4 dtACPPD/DNA在不同细胞系上的细胞摄取效率评价 | 第44-46页 |
| 3.4.1 dtACPPD/DNA在U-87细胞系上的摄取 | 第44-45页 |
| 3.4.2 dtACPPD/DNA在BEL-7402细胞系上的摄取 | 第45-46页 |
| 3.5 dtACPPD/DNA在荷瘤模型鼠上的体内分布 | 第46-48页 |
| 3.5.1 dtACPPD/DNA在脑胶质瘤模型鼠上的体内分布 | 第46-47页 |
| 3.5.2 dtACPPD/DNA在皮下瘤模型鼠上的体内分布 | 第47-48页 |
| 3.6 dtACPPD/DNA在荷瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第48-49页 |
| 3.6.1 dtACPPD/DNA在脑胶质瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第48-49页 |
| 3.6.2 dtACPPD/DNA在荷皮下瘤模型鼠上的瘤内基因表达 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 4.1 肿瘤靶向纳米载体dtACPPD包封质粒DNA的能力 | 第49-50页 |
| 4.2 dtACPP修饰的载基因纳米粒的细胞摄取效率 | 第50页 |
| 4.3 dtACPPD/DNA的肿瘤靶向性及瘤内基因转染能力 | 第50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 dtACPP修饰的肿瘤靶向智能纳米粒联合治疗脑胶质瘤 | 第51-65页 |
| 1 材料和仪器 | 第53页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第53页 |
| 1.2 仪器 | 第53页 |
| 2 实验方法 | 第53-56页 |
| 2.1 肿瘤靶向智能双载药纳米粒dtACPPD/shVEGF-DOX的制备和表征 | 第53-54页 |
| 2.1.1 shVEGF-DOX复合物的制备 | 第53页 |
| 2.1.2 dtACPPD/shVEGF-DOX的制备 | 第53页 |
| 2.1.3 dtACPPD/shVEGF-DOX凝胶电泳 | 第53页 |
| 2.1.4 dtACPPD/shVEGF-DOX的表征 | 第53-54页 |
| 2.2 胶质瘤细胞内源性VEGF mRNA下调的体外评价 | 第54页 |
| 2.3 shVEGF与DOX诱导胶质瘤细胞凋亡的体外评价 | 第54页 |
| 2.4 体内抗脑胶质瘤药效学综合评价 | 第54-56页 |
| 2.4.1 实验分组及给药方案 | 第54-55页 |
| 2.4.2 脑胶质瘤组织中内源性VEGF的下调评价 | 第55页 |
| 2.4.3 脑胶质瘤组织中的血管生成抑制评价 | 第55页 |
| 2.4.4 在体检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第55-56页 |
| 2.4.5 原位TUNEL免疫荧光检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第56页 |
| 2.4.6 脑胶质瘤模型鼠存活时间及体重变化的考察 | 第56页 |
| 2.5 数据统计 | 第56页 |
| 3 实验结果 | 第56-64页 |
| 3.1 dtACPPD/shVEGF-DOX双载药纳米粒的制备和表征 | 第56-58页 |
| 3.1.1 shVEGF-DOX复合物的表征 | 第56-57页 |
| 3.1.2 dtACPPD/shVEGF-DOX凝胶电泳 | 第57页 |
| 3.1.3 dtACPPD/shVEGF-DOX的表征 | 第57-58页 |
| 3.2 胶质瘤细胞内源性VEGF mRNA下调的体外评价 | 第58-59页 |
| 3.3 shVEGF与DOX诱导胶质瘤细胞凋亡的体外评价 | 第59页 |
| 3.4 体内抗脑胶质瘤药效学综合评价 | 第59-64页 |
| 3.4.1 脑胶质瘤组织中内源性VEGF的下调评价 | 第59-61页 |
| 3.4.2 脑胶质瘤组织中的血管生成抑制评价 | 第61-62页 |
| 3.4.3 在体检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第62页 |
| 3.4.4 原位TUNEL免疫荧光检测脑胶质瘤细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 3.4.5 脑胶质瘤模型鼠的体重变化及存活时间 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64页 |
| 4.1 dtACPPD/shVEGF下调VEGF | 第64页 |
| 4.2 联合给药的必要性 | 第64页 |
| 5 小结 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 创新性 | 第66-67页 |
| 中英文对照缩写 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 发表论文 | 第73-74页 |
| 荣誉奖项 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
