摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
引言 | 第13-14页 |
综述 | 第14-26页 |
1.1 对虾病毒的发现及主要病害介绍 | 第14-16页 |
1.1.1 桃拉病毒综合征 | 第14页 |
1.1.2 传染性皮下和造血器官坏死病 | 第14-15页 |
1.1.3 对虾白斑综合征 | 第15页 |
1.1.4 传染性肌肉坏死病 | 第15页 |
1.1.5 黄头病 | 第15-16页 |
1.2 WSSV 的发现 | 第16页 |
1.3 WSSV 的致病特性 | 第16-17页 |
1.4 白斑综合征病毒(WSSV)的致病机理 | 第17-18页 |
1.5 WSSV 病毒提取及纯化技术 | 第18-20页 |
1.6 WSSV 流行特点 | 第20页 |
1.7 对虾白斑综合征的诊断技术 | 第20-26页 |
1.7.1 目视观察法 | 第20页 |
1.7.2 电镜观察法 | 第20页 |
1.7.3 组织病理学 | 第20-21页 |
1.7.4 现代生物诊断技术 | 第21-22页 |
1.7.5 核酸分子生物学方法 | 第22-26页 |
第1章 中国大陆几株 WSSV 毒株毒力测定及分析 | 第26-36页 |
1.材料与方法 | 第26-30页 |
1.1 实验材料 | 第26-27页 |
1.2 病毒复壮 | 第27页 |
1.3 病毒粗提液的制备 | 第27页 |
1.4 半数致死量(LD50)实验 | 第27页 |
1.5 组织样品采集 | 第27页 |
1.6 半数致死时间(LT50)实验 | 第27-28页 |
1.7 DNA 提取 | 第28页 |
1.8 WSSV 组织载毒量的测定 | 第28-30页 |
1.8.1 FQ-PCR 体系优化 | 第28页 |
1.8.2 质粒标准品的制备 | 第28-29页 |
1.8.3 标准曲线的绘制 | 第29页 |
1.8.4 样品测定 | 第29-30页 |
1.9 数据统计与分析 | 第30页 |
2 结果 | 第30-34页 |
2.1 感染死亡率 | 第30-33页 |
2.2 六株 WSSV 毒株半数致死量 | 第33页 |
2.3 六株 WSSV 毒株组织载毒量 | 第33页 |
2.4 凡纳滨对虾验证实验 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
第2章 YHV 人工感染克氏原螯虾 | 第36-42页 |
1 材料与方法 | 第36-38页 |
1.1 实验材料 | 第36页 |
1.2 病毒粗提液的提取 | 第36页 |
1.3 黄头病病毒人工接种于克氏原螯虾 | 第36-37页 |
1.4 样品固定及制作切片 | 第37-38页 |
1.5 样品采集与处理 | 第38页 |
1.6 根据中华人民共和国水产行业标准——对虾黄头病诊断规程 | 第38页 |
2 结果 | 第38-40页 |
2.1 死亡率 | 第38-39页 |
2.2 组织病理切片 | 第39-40页 |
2.3 PCR 检测结果 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第3章 广西北海发病凡纳滨对虾可疑病原的探究 | 第42-57页 |
1 材料与方法 | 第42-47页 |
1.1 实验材料 | 第42页 |
1.2 可疑病毒粒子提取 | 第42-43页 |
1.3 透射电镜观察 | 第43页 |
1.4 可疑病毒核酸提取 | 第43-44页 |
1.4.1 可疑病毒粒子外核酸的消化 | 第43页 |
1.4.2 核酸提取 | 第43-44页 |
1.5 可疑病毒粒子 DNA 来源的随机 PCR | 第44页 |
1.6 可疑病毒粒子 RNA 来源的随机 PCR | 第44-45页 |
1.6.1 cDNA 第一链合成 | 第44页 |
1.6.1.1 变性和退火 | 第44页 |
1.6.2 cDNA 第二链合成 | 第44-45页 |
1.6.3 双链 cDNA 特异性扩增 | 第45页 |
1.7 PCR 产物凝胶纯化 | 第45页 |
1.8 连接载体 | 第45-46页 |
1.9 重组载体的转化与培养 | 第46页 |
1.10 蓝白斑筛选 | 第46页 |
1.11 1%琼脂糖凝胶电泳 | 第46页 |
1.12 可疑序列的比对 | 第46-47页 |
2 结果 | 第47-55页 |
2.1 电镜观察 | 第47页 |
2.2 可疑病毒 DNA 的随机 PCR | 第47-48页 |
2.3 序列比对结果 | 第48-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
第4章 2012 年河北唐海发病对虾携带菌的分离鉴定调查 | 第57-61页 |
1 材料与方法 | 第57-58页 |
1.1 对虾 | 第57页 |
1.2 发病对虾肝胰腺和血淋巴共生菌株的分离和纯化 | 第57-58页 |
1.3 菌落 PCR 扩增 | 第58页 |
1.4 序列分析与数据处理 | 第58页 |
2 结果 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
个人简介 | 第69页 |
发表的学术论文 | 第69-70页 |