| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第9-11页 |
| 2 材料与方法 | 第11-24页 |
| 2.1 主要仪器及供试材料 | 第11-13页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第11页 |
| 2.1.2 供试试剂 | 第11页 |
| 2.1.3 实验材料 | 第11-12页 |
| 2.1.4 实验涉及的培养基 | 第12-13页 |
| 2.1.5 供试小麦幼苗的培养、接种及取材 | 第13页 |
| 2.2 小麦 TaE2 基因受叶锈菌侵染后的表达谱变化 | 第13-16页 |
| 2.2.1 总 RNA 提取与检测 | 第13页 |
| 2.2.2 cDNA 的合成 | 第13-14页 |
| 2.2.3 半定量 RT-PCR 分析 | 第14-15页 |
| 2.2.4 小麦样品中总的可溶性蛋白的提取 | 第15页 |
| 2.2.5 TaE2 抗血清的制备 | 第15页 |
| 2.2.6 抗血清中抗体效价的检测 | 第15-16页 |
| 2.2.7 抗血清特异性检测 | 第16页 |
| 2.2.8 Western-blotting 分析 | 第16页 |
| 2.3 拟南芥 Ate2 突变体纯合体的鉴定 | 第16-18页 |
| 2.3.1 SDS 方法提取植物基因组 DNA | 第16-17页 |
| 2.3.2 PCR 鉴定 T-DNA 插入突变体 | 第17-18页 |
| 2.3.3 非生物胁迫的生理表型观察试验 | 第18页 |
| 2.4 TaE2 基因转拟南芥过表达阳性植株 T1代的获得 | 第18-24页 |
| 2.4.1 总 RNA 提取及 cDNA 第一链的合成 | 第18页 |
| 2.4.2 引物设计 | 第18页 |
| 2.4.3 TaE2 基因的 PCR 扩增与转化载体构建 | 第18-21页 |
| 2.4.4 pSuper1300+-TaE2 载体的构建 | 第21-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-33页 |
| 3.1 小麦叶片接种叶锈菌后不同时间点 TaE2 基因的转录谱特征 | 第24-25页 |
| 3.2 小麦叶片接种叶锈菌后不同时间点 TaE2 蛋白的表达 | 第25-27页 |
| 3.2.1 TaE2 抗血清的制备及鉴定 | 第25-26页 |
| 3.2.2 小麦叶片接种叶锈菌后不同时间点 TaE2 的表达特征 | 第26-27页 |
| 3.3 拟南芥 Ate2 突变体纯合体的鉴定及表型分析 | 第27-29页 |
| 3.3.1 突变体纯合体的鉴定 | 第27-28页 |
| 3.3.2 非生物胁迫方面的表型分析 | 第28-29页 |
| 3.4 TaE2 基因转拟南芥过表达阳性植株 T1代的获得 | 第29-33页 |
| 3.4.1 pSuper1300+-TaE2 载体的构建 | 第29-32页 |
| 3.4.2 拟南芥的农杆菌转化及阳性植株的筛选 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| 4.1 关于 E2 的功能研究 | 第33-34页 |
| 4.2 E2 超表达载体构建过程中的条件摸索 | 第34页 |
| 4.2.1 载体选择的重要性 | 第34页 |
| 4.2.2 酶切位点的选择 | 第34页 |
| 4.2.3 E2 拟南芥超表达载体构建的意义 | 第34页 |
| 4.3 TaE2 基因应答叶锈菌刺激的表达谱分析 | 第34-35页 |
| 4.4 对 TaE2 基因功能研究的展望 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 作者简介 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
