| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 中英文缩略词对照表（按英文字母顺序） | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-26页 |
| 第一部分 PDHA1蛋白在人前列腺癌组织中的表达以及与预后的分析 | 第26-37页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-29页 |
| 1.1 临床组织标本来源 | 第27-28页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.1 免疫组织化学染色 | 第29页 |
| 2.2 免疫组化结果判定及定量分析 | 第29-30页 |
| 2.3 统计学分析 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| 3.1 PDHA1在人前列腺癌组织中的表达情况 | 第30页 |
| 3.2 PDHA1表达与前列腺癌临床病理学参数之间的关系 | 第30-32页 |
| 3.3 PDHA1表达与前列腺癌临床预后之间的关系 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-37页 |
| 第二部分 PDHA1基因敲除对前列腺癌细胞的影响 | 第37-73页 |
| 前言 | 第37-38页 |
| 1 试剂仪器 | 第38-41页 |
| 1.1 细胞株 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 1.4 主要溶液及配制方法 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-53页 |
| 2.1 设计和组装TALEN-PDHA1质粒活性鉴定、提取和纯化 | 第41-42页 |
| 2.2 TALEN-PDHA1质粒提取 | 第42-44页 |
| 2.3 重组 TALEN-PDHA1 质粒是否具有活性的鉴定 | 第44-46页 |
| 2.4 稳定转染及阳性克隆的筛选 | 第46-47页 |
| 2.5 基因敲除阳性克隆的筛选 | 第47-48页 |
| 2.6 基因敲除阳性单克隆的鉴定 | 第48页 |
| 2.7 线粒体功能和糖酵解程度的检测 | 第48-50页 |
| 2.8 PDHA1KO细胞生物学性状及干性特征的检测 | 第50-53页 |
| 2.9 统计学分析 | 第53页 |
| 3 实验结果 | 第53-70页 |
| 3.1 成功构建有活性的TALEN质粒 | 第53-54页 |
| 3.2 成功构建 PDHA1 基因敲除的稳定细胞系 | 第54-58页 |
| 3.3 PDHA1KO细胞中线粒体功能及糖酵解速率的检测 | 第58-63页 |
| 3.4 PDHA1KO细胞生物学特性和干性特征的检测 | 第63-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 第三部分 MPC抑制剂UK5099对前列腺癌细胞代谢模式和干性程度的影响 | 第73-93页 |
| 前言 | 第73-74页 |
| 1 材料与试剂 | 第74-77页 |
| 1.1 细胞株 | 第74页 |
| 1.2 主要试剂 | 第74-75页 |
| 1.3 主要仪器 | 第75-76页 |
| 1.4 主要溶液及配置方法 | 第76-77页 |
| 2 实验方法 | 第77-82页 |
| 2.1 细胞培养 | 第77-78页 |
| 2.2 线粒体内丙酮酸浓度的测定 | 第78-79页 |
| 2.3 线粒体功能糖酵解程度的检测 | 第79-80页 |
| 2.4 细胞生物学特性和干性特征检测 | 第80-81页 |
| 2.5 Western blot法检测蛋白表达 | 第81-82页 |
| 2.6 统计学分析 | 第82页 |
| 3 实验结果 | 第82-90页 |
| 3.1 不同浓度MPC抑制剂UK5099对LnCap细胞丙酮酸运的影响 | 第82-83页 |
| 3.2 UK5099对细胞增殖的影响 | 第83-84页 |
| 3.3 UK5099对细胞周期的影响 | 第84-86页 |
| 3.4 UK5099处理导致线粒体氧化磷酸化功能减弱以及糖酵解增强 | 第86-87页 |
| 3.5 侧群细胞比率以及干细胞标记 | 第87-90页 |
| 4 讨论 | 第90-93页 |
| 全文总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 综述 | 第99-115页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
| 个人简介 | 第115页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
