| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩写与符号 | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-51页 |
| 1.1 引言 | 第16-18页 |
| 1.2 金黄色葡萄球菌 | 第18-33页 |
| 1.2.1 金黄色葡萄球菌的概述 | 第18-20页 |
| 1.2.1.1 金黄色葡萄球菌的微生物学概述 | 第18-19页 |
| 1.2.1.2 金黄色葡萄球菌的感染概述 | 第19-20页 |
| 1.2.2 金黄色葡萄球菌的耐药性 | 第20-24页 |
| 1.2.3 机体对于金黄色葡萄球菌的免疫应答 | 第24-33页 |
| 1.2.3.1 金黄色葡萄球菌的免疫逃逸机制 | 第24-25页 |
| 1.2.3.2 模式识别受体对于金黄色葡萄球菌的识别 | 第25-27页 |
| 1.2.3.3 对抗金葡菌感染的获得性免疫 | 第27-30页 |
| 1.2.3.4 潜在的免疫治疗疗法 | 第30-33页 |
| 1.3 巨噬细胞 | 第33-46页 |
| 1.3.1 巨噬细胞的概述 | 第33-34页 |
| 1.3.2 巨噬细胞的功能 | 第34-36页 |
| 1.3.2.1 巨噬细胞细胞吞噬的作用 | 第34-35页 |
| 1.3.2.2 巨噬细胞在获得性免疫中的作用 | 第35页 |
| 1.3.2.3 巨噬细胞在组织修复再生中的作用 | 第35-36页 |
| 1.3.2.4 铁稳态平衡维持中的作用 | 第36页 |
| 1.3.3 组织特异性的巨噬细胞 | 第36-41页 |
| 1.3.3.1 巨噬细胞系的发育分化来源 | 第36-40页 |
| 1.3.3.2 肝脏中的巨噬细胞系 | 第40-41页 |
| 1.3.4 巨噬细胞的极化 | 第41-46页 |
| 1.3.4.1 巨噬细胞的极化的概述 | 第41-42页 |
| 1.3.4.2 巨噬细胞极化的分子特征和调控机制 | 第42-45页 |
| 1.3.4.3 感染过程中的巨噬细胞极化 | 第45-46页 |
| 1.4 LYS-CRE, FoxO1-LoxP小鼠体系 | 第46-51页 |
| 1.4.1 Cre-LoxP重组酶系统以及Lys-Cre,FoxO1-LoxP转基因小鼠 | 第46-47页 |
| 1.4.1.1 Cre-LoxP重组酶系统 | 第46页 |
| 1.4.1.2 小鼠位点特异性重组和Lys-Cre,FoxO1-LoxP转基因小鼠 | 第46-47页 |
| 1.4.2 转录因子FoxO1的概述 | 第47-51页 |
| 1.4.2.1 FoxO1分子特征及信号通路 | 第47-48页 |
| 1.4.2.1 FoxO1分子的功能 | 第48-51页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第51-82页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第51-61页 |
| 2.1.1 实验动物及细胞 | 第51页 |
| 2.1.2 微生物种系 | 第51-52页 |
| 2.1.3 小鼠基因型鉴定中所用试剂 | 第52页 |
| 2.1.4 小鼠操作及细胞分离过程中所用试剂 | 第52-53页 |
| 2.1.5 细胞培养和实验过程中所用材料试剂 | 第53-54页 |
| 2.1.6 生物化学及分子生物学实验中所用试剂 | 第54-56页 |
| 2.1.7 培养基及缓冲液 | 第56-58页 |
| 2.1.8 H&E切片及冰冻切片荧光染色使用的试剂和材料 | 第58页 |
| 2.1.9 实验所用抗体信息 | 第58-61页 |
| 2.2 实验设备和仪器 | 第61-63页 |
| 2.2.1 实验用仪器 | 第61-62页 |
| 2.2.2 实验用耗材 | 第62-63页 |
| 2.3 实验方法和技术 | 第63-82页 |
| 2.3.1 小鼠繁殖及感染实验 | 第63-64页 |
| 2.3.1.1 转基因小鼠的繁殖策略 | 第63页 |
| 2.3.1.2 金黄色葡萄球菌的感染策略 | 第63-64页 |
| 2.3.1.3 巨噬细胞清除实验 | 第64页 |
| 2.3.1.4 动物实验的伦理审批 | 第64页 |
| 2.3.2 小鼠各脏器中免疫细胞的分离方法 | 第64-68页 |
| 2.3.2.1 肝脏淋巴细胞的分离方法 | 第64-65页 |
| 2.3.2.2 脾脏淋巴细胞的分离方法 | 第65页 |
| 2.3.2.3 小鼠骨髓细胞的分离方法 | 第65-66页 |
| 2.3.2.4 小鼠腹腔细胞的分离方法 | 第66页 |
| 2.3.2.5 小鼠肺脏细胞的分离方法 | 第66-67页 |
| 2.3.2.6 小鼠肝脏灌流分离Kupffer细胞和MoM细胞的方法 | 第67-68页 |
| 2.3.2.7 血平板细胞计数法 | 第68页 |
| 2.3.3 细胞生物学实验技术 | 第68-71页 |
| 2.3.3.1 脏器CFU值的测定 | 第68-69页 |
| 2.3.3.2 细胞培养实验条件 | 第69页 |
| 2.3.3.3 细胞的复苏和传代 | 第69页 |
| 2.3.3.4 细胞冻存方法 | 第69-70页 |
| 2.3.3.5 质粒的构建 | 第70页 |
| 2.3.3.6 细胞转染及建立稳定转染细胞系 | 第70-71页 |
| 2.3.3.7 病毒感染细胞及建立稳定转染细胞系 | 第71页 |
| 2.3.4 流式细胞术检测技术 | 第71-73页 |
| 2.3.4.1 流式细胞术检测细胞表面标志 | 第71页 |
| 2.3.4.2 流式细胞术检测细胞核内转录因子 | 第71-72页 |
| 2.3.4.3 流式细胞术检测细胞细胞因子分泌能力 | 第72-73页 |
| 2.3.5 苏木精-伊红染色(Hematoxylin and Eosin Stain, HE染色) | 第73-75页 |
| 2.3.5.1 小鼠肝脏病理取材 | 第73页 |
| 2.3.5.2 肝脏组织脱水,浸蜡及包埋步骤 | 第73-74页 |
| 2.3.5.3 肝脏组织切片,展片,捞片和烤片步骤 | 第74页 |
| 2.3.5.4 肝脏组织切片的H&E染色 | 第74-75页 |
| 2.3.6 冰冻组织的免疫荧光 | 第75-77页 |
| 2.3.6.1 冰冻样本的制备 | 第75-76页 |
| 2.3.6.2 冰冻切片的制备 | 第76页 |
| 2.3.6.3 免疫荧光染色 | 第76-77页 |
| 2.3.7 免疫印迹实验(Western blot) | 第77-78页 |
| 2.3.7.1 蛋白样品的制备 | 第77页 |
| 2.3.7.2 SDS-PAGE电泳及转膜 | 第77-78页 |
| 2.3.7.3 免疫印迹及显影曝光 | 第78页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR(Realtime-qPCR) | 第78-81页 |
| 2.3.8.1 柱抽提法提取真核细胞总RNA的 | 第78-79页 |
| 2.3.8.2 RNA逆转录为DNA(RNA-Reverse Transcription) | 第79-80页 |
| 2.3.8.3 实时荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第80-81页 |
| 2.3.9 数据的分析及处理 | 第81-82页 |
| 第三章 巨噬细胞在金葡菌感染过程中的极化调控研究 | 第82-114页 |
| 3.1 巨噬细胞为金黄色葡萄球菌感染中肝脏中T细胞的浸润所必须 | 第82-86页 |
| 3.2 巨噬细胞FoxO1在金黄色葡萄球菌感染过程中的动态变化 | 第86-90页 |
| 3.3 缺失巨噬细胞FoxO1损害小鼠抗金葡菌感染免疫反应 | 第90-93页 |
| 3.4 巨噬细胞FoxO1在感染过程中维持正常的TH1和TH17型反应 | 第93-97页 |
| 3.5 FoxO1影响巨噬细胞极化反应平衡 | 第97-107页 |
| 3.5.1 FoxO1促进巨噬细胞的M1型极化 | 第97-102页 |
| 3.5.2 FoxO1抑制巨噬细胞的M2型极化 | 第102-107页 |
| 3.6 巨噬细胞FoxO1作用在MRSA感染过程中作用的验证 | 第107-110页 |
| 3.7 总结与讨论 | 第110-114页 |
| 参考文献 | 第114-118页 |
| 附录 | 第118-121页 |
| 图序 | 第118-120页 |
| 表序 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 在读期间主要研究成果 | 第123页 |
| 已发表论文 | 第123页 |
| 在读期间参加的学术会议 | 第123页 |
| 在读期间获得的奖励 | 第123页 |
