| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·土壤重金属污染概况 | 第12-14页 |
| ·土壤重金属污染概述 | 第12-13页 |
| ·土壤重金属污染的特点与危害 | 第13-14页 |
| ·微生物对重金属污染的生物修复 | 第14-15页 |
| ·微生物修复的概念和特点 | 第14-15页 |
| ·微生物修复的国内外研究概况 | 第15页 |
| ·微生物对重金属的耐性和抗性 | 第15-19页 |
| ·重金属对微生物细胞的毒性作用 | 第16页 |
| ·微生物对重金属胁迫的反应 | 第16-17页 |
| ·微生物对重金属的抗性和解毒机制 | 第17-19页 |
| ·微生物对重金属抗性的分子生物学研究进展 | 第19-22页 |
| ·微生物的铜抗性机理 | 第19-20页 |
| ·微生物抗重金属基因研究 | 第20-21页 |
| ·耐重金属基因工程菌构建 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 苜蓿中华根瘤菌PCOR 基因克隆及序列分析 | 第24-33页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·培养基和抗生素 | 第24页 |
| ·克隆宿主菌 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·克隆铜抗性基因模板的准备 | 第25-27页 |
| ·菌株CCNWSX0020 铜抗性基因片段的扩增 | 第27页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第27-28页 |
| ·目的基因片段与载体的连接 | 第28页 |
| ·Inoue 法制备超级感受态细胞DH5α | 第28-29页 |
| ·转化感受态细胞DH5α | 第29页 |
| ·重组质粒的提取与酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·铜抗性基因序列的测定和分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-32页 |
| ·菌株CCNWSX0020 抗铜基因的扩增结果 | 第30页 |
| ·基因克隆和序列测定及初步分析 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pGEM-PcoR 的酶切鉴定结果 | 第31页 |
| ·抗铜基因的BLASTn 分析 | 第31-32页 |
| ·抗铜蛋白的BLASTp 同源性搜索与分析 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 苜蓿中华根瘤菌PCOR 基因原核表达载体构建、表达 | 第33-41页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·供试材料 | 第33页 |
| ·菌种与载体试剂 | 第33页 |
| ·原核表达载体构建方面 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 所需溶液配制 | 第33-34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·PCOR 基因在大肠杆菌中的表达 | 第34-37页 |
| ·构建pET41a-pcoR 表达载体 | 第34-37页 |
| ·苜蓿中华根瘤菌CCNWSX0020 pcoR 基因在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
| ·菌体总蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·pET41a-pcoR 表达载体的构建与鉴定 | 第37-38页 |
| ·苜蓿中华根瘤菌CCNWSX0020 pcoR 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 结论与研究设想 | 第41-43页 |
| ·主要结论 | 第41页 |
| ·进一步的研究设想 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51-52页 |
| 硕士期间发表论文 | 第52页 |
