摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略表 | 第9-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 Bt基因及蛋白的研究进展 | 第10-14页 |
1.1.1 Cry类杀虫晶体蛋白 | 第11-12页 |
1.1.2 Vip类杀虫晶体蛋白 | 第12-14页 |
1.2 转Bt基因抗虫棉的研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 国外转Bt基因抗虫棉的研究进展 | 第14-15页 |
1.2.2 国内转基因Bt抗虫棉花的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.3 害虫对转基因植物的抗性问题 | 第16-17页 |
1.3 基因改造 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
1.5 本研究技术路线 | 第19-20页 |
第2章 cry2Ah2,cry2Ab4和vip3Aa11基因在植物中杀虫活性研究 | 第20-62页 |
2.1 实验材料 | 第20-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第20页 |
2.1.3 酶和生化试剂 | 第20-21页 |
2.1.4 仪器设备 | 第21页 |
2.1.5 培养基及常规实验试剂配制 | 第21-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-43页 |
2.2.1 cry2Ah2、cry2Ab4和vip3Aa11基因表达载体构建 | 第28-31页 |
2.2.2 农杆菌热激转化感受态细胞的制备 | 第31页 |
2.2.3 植物表达载体转化农杆菌 | 第31-32页 |
2.2.4 基因转化与材料鉴定 | 第32-33页 |
2.2.5 qRT-PCR检测 | 第33-35页 |
2.2.6 Southern Blot检测 | 第35-41页 |
2.2.7 Western Blot检测 | 第41-43页 |
2.2.8 转基因烟草植株的生物活性检测 | 第43页 |
2.3 结果与分析 | 第43-59页 |
2.3.1 cry2Ah2,cry2Ab4和vip3Aa11基因的改造 | 第43-44页 |
2.3.2 cry2Ah2,cry2Ab4和vip3Aa11高效植物表达载体的构建 | 第44-48页 |
2.3.3 转基因烟草的获得与鉴定 | 第48-49页 |
2.3.4 qRT-PCR检测转基因烟草表达量 | 第49-51页 |
2.3.5 Southern blot | 第51-54页 |
2.3.6 Western Blot | 第54-55页 |
2.3.7 转基因烟草的生物活性检测 | 第55-58页 |
2.3.8 转基因棉花愈伤的获得与鉴定 | 第58-59页 |
2.4 讨论 | 第59-62页 |
2.4.1 提高外源基因的表达 | 第59-60页 |
2.4.2 cry2Ah2,cry2Ab4和vip3Aa11在转基因棉花中的应用 | 第60页 |
2.4.3 cry2Ah2,vip2Aa11和cry2Ab4基因转化棉花 | 第60-62页 |
第3章 结论与展望 | 第62-64页 |
3.1 结论 | 第62-63页 |
3.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |