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慢病毒介导的siSCN9A下调Nav1.7的表达在神经病理痛中的镇痛作用

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
缩略词第14-15页
引言第15-17页
第一部分:慢病毒介导siRNA-SCN9A对TNF-α刺激原代培养的大鼠脊髓背根神经节细胞高表达Nav1.7 的抑制作用第17-32页
    1 实验材料第18-20页
        1.1 实验动物第18页
        1.2 主要试剂第18-19页
        1.3 主要仪器设备第19-20页
        1.4 其它实验用品第20页
    2 试验方法第20-24页
        2.1 慢病毒介导的siSCN9A的构建第20页
        2.2 病毒滴度复核(有限稀释法测定)第20-21页
        2.3 PC12细胞培养第21-22页
        2.4 大鼠脊髓背根神经节细胞的原代培养并用TNF-α刺激第22页
        2.5 慢病毒介导的siSCN9A感染PC12细胞、原代培养的DRG神经元细胞第22-23页
        2.6 NF200免疫荧光标记DRG神经元细胞第23页
        2.7 细胞总蛋白的提取第23页
        2.8 蛋白质的含量测定第23-24页
        2.9 电泳和转膜第24页
        2.10 细胞免疫荧光第24页
    3 实验分组第24-25页
    4 数据统计与分析第25页
    5 结果第25-27页
    6 讨论第27-28页
    7 结论第28页
    8 参考文献第28-32页
第二部分:DRG显微注射慢病毒介导siSCN9A对SNL大鼠神经病理痛的影响第32-53页
    1 材料第32-35页
        1.1 实验动物第32-33页
        1.2 主要仪器第33-34页
        1.3 手术器械第34页
        1.4 主要试剂与耗材第34-35页
    2 主要试剂配制方法第35-37页
    3 实验方法第37-43页
        3.1 实验动物分组第37-38页
        3.2 SNL模型的建立第38页
        3.3 行为学观察和测定第38-40页
            3.3.1 一般行为学观察第38-39页
            3.3.2 机械缩足反射阈值(Mechanical withdrawal threshold, MWT)、热缩足潜伏期(Thermal withdrawal latency,TWL)的测定第39-40页
        3.4 慢病毒介导的siSCN9A显微注射SNL大鼠DRG神经元第40-41页
        3.5 L5脊髓、左右两侧DRG及其相连的后跟感觉神经EGFP荧光表达第41页
            3.5.1 动物标本取材第41页
            3.5.2 冰冻切片制作第41页
            3.5.3 观察荧光表达第41页
        3.6 免疫组化染色第41-42页
        3.7 Western Blot第42-43页
            3.7.1 总蛋白提取第42-43页
            3.7.2 蛋白质含量的测定第43页
    4 数据统计与分析第43页
    5 结果第43-47页
    6 讨论第47-50页
    7 结论第50页
    8 参考文献第50-53页
综述第53-65页
    参考文献第61-65页
个人简历第65-66页
致谢第66页

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