| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-34页 |
| 1.1 基因治疗概述 | 第10-11页 |
| 1.2 病毒基因载体 | 第11-12页 |
| 1.3 非病毒基因载体：物理方法 | 第12页 |
| 1.4 非病毒基因载体：化学方法 | 第12-25页 |
| 1.4.1 无机颗粒 | 第13页 |
| 1.4.2 脂质体 | 第13-14页 |
| 1.4.3 阳离子聚合物 | 第14-21页 |
| 1.4.3.1 聚乙烯亚胺（PEI） | 第15-18页 |
| 1.4.3.2 树状分子 | 第18页 |
| 1.4.3.3 聚2二甲氨基甲基丙烯酸乙酯（PDMAEMA） | 第18-20页 |
| 1.4.3.4 聚赖氨酸（PLL） | 第20页 |
| 1.4.3.5 壳聚糖 | 第20-21页 |
| 1.4.4 生物可降解聚合物作为基因载体 | 第21-25页 |
| 1.4.4.1 聚氨基乙烯亚胺（SS-PAEI） | 第21-22页 |
| 1.4.4.2 聚胱胺双丙烯酰胺-二氨基己烯[poly(CBA-DAH)] | 第22-23页 |
| 1.4.4.3 精氨酸接枝的生物可降解聚合物 | 第23-24页 |
| 1.4.4.4 树枝状生物可降解聚合物 | 第24-25页 |
| 1.5 复合体在细胞内过程的机制及应对策略 | 第25-31页 |
| 1.5.1 对肿瘤细胞的选择性 | 第25-26页 |
| 1.5.1.1 EPR效应 | 第25-26页 |
| 1.5.1.2 肿瘤细胞的酸性 | 第26页 |
| 1.5.1.3 进入细胞核 | 第26页 |
| 1.5.2 设计复合体时的困境 | 第26页 |
| 1.5.3 阳离子聚合物/pDNA复合体进入细胞 | 第26-31页 |
| 1.5.3.1 保护其免受体内降解 | 第27页 |
| 1.5.3.2 内吞作用 | 第27-28页 |
| 1.5.3.3 核内体逃逸和质子海绵效应 | 第28页 |
| 1.5.3.4 细胞质内运输 | 第28-29页 |
| 1.5.3.5 进入细胞核 | 第29-31页 |
| 1.5.4 根据需要对阳离子聚合物进行修饰 | 第31页 |
| 1.5.4.1 由聚合物中释放DNA | 第31页 |
| 1.5.4.2 识别超活性受体系统 | 第31页 |
| 1.6 课题的提出 | 第31-34页 |
| 第二章 聚甲基丙烯酸甘油酯胺基衍生物的合成、修饰及其初步表征 | 第34-41页 |
| 2.1 实验仪器及试剂 | 第34-36页 |
| 2.1.1 实验仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 试剂的纯化 | 第36页 |
| 2.2 各高分子的合成 | 第36-37页 |
| 2.2.1 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（PGMA）的合成 | 第36页 |
| 2.2.2 乙二胺修饰的PGMA（EP）的合成 | 第36页 |
| 2.2.3 胍基化修饰的EP的合成 | 第36-37页 |
| 2.2.4 希夫碱连接的咪唑化修饰的GEP的合成 | 第37页 |
| 2.3 各高分子的表征 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 对PGMA进行双功能化修饰的衍生物作为基因载体性能的研究 | 第41-55页 |
| 3.1 实验仪器与试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.1 实验仪器及主要设备 | 第41-42页 |
| 3.1.2 实验材料与试剂 | 第42页 |
| 3.2 聚甲基丙烯酸甘油酯衍生物/pDNA复合体的制备 | 第42页 |
| 3.3 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯衍生物/pDNA复合体作为基因载体性能的研究 | 第42-45页 |
| 3.3.1 复合体的粒径、电势、粒子形态的表征 | 第42-43页 |
| 3.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
| 3.3.3 EB置换实验 | 第43-44页 |
| 3.3.4 高分子缓冲能力的测定 | 第44页 |
| 3.3.5 细胞毒性试验 | 第44页 |
| 3.3.6 体外转染效率试验 | 第44页 |
| 3.3.7 流式细胞分析 | 第44-45页 |
| 3.3.8 细胞摄取实验 | 第45页 |
| 3.3.9 统计分析 | 第45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-54页 |
| 3.4.1 琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第45-46页 |
| 3.4.2 复合体的粒径和电势的测定实验 | 第46-48页 |
| 3.4.3 扫描电镜实验 | 第48-49页 |
| 3.4.4 溴化乙锭（EB）置换实验 | 第49页 |
| 3.4.5 缓冲容量的测试 | 第49-50页 |
| 3.4.6 体外细胞毒性实验 | 第50-51页 |
| 3.4.7 体外转染实验 | 第51-52页 |
| 3.4.8 流式细胞术 | 第52-53页 |
| 3.4.9 复合体的细胞内定位 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
