马卵母细胞体外成熟及核移植的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1 卵母细胞体外成熟研究进展 | 第12-18页 |
| ·卵母细胞体外成熟的原理 | 第12页 |
| ·卵泡的生长发育和卵泡细胞的分化 | 第12页 |
| ·卵母细胞的形成及其生长发育 | 第12页 |
| ·卵母细胞的获得 | 第12-13页 |
| ·活体动物卵巢上采集 | 第12-13页 |
| ·屠宰后的卵巢上采集 | 第13页 |
| ·有腔卵泡卵母细胞的采集 | 第13页 |
| ·卵母细胞级别的划分 | 第13-14页 |
| ·卵母细胞体外成熟的特征 | 第14-15页 |
| ·影响卵母细胞体外培养的因素 | 第15-18页 |
| 2 体细胞克隆马的研究进展 | 第18-24页 |
| ·哺乳动物克隆的发展简史 | 第18-19页 |
| ·核质移植克隆两栖类 | 第18页 |
| ·胚胎细胞核移植克隆哺乳动物 | 第18-19页 |
| ·体细胞核移植克隆哺乳动物 | 第19页 |
| ·体细胞克隆马的历程 | 第19-20页 |
| ·克隆马的效率 | 第20-21页 |
| ·体细胞克隆马的程序 | 第21-24页 |
| ·供体细胞的选择与体外培养 | 第21页 |
| ·卵母细胞的体外成熟及激活 | 第21-22页 |
| ·细胞核移植 | 第22页 |
| ·重构配的融合-激活 | 第22页 |
| ·重构胚的体外培养和胚胎移植 | 第22-24页 |
| 实验研究 | 第24-41页 |
| Ⅰ 马卵母细胞的体外培养 | 第24-31页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·药品与试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·试剂配方 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-27页 |
| ·卵巢卵母细胞的采集 | 第25页 |
| ·卵丘卵母细胞复合体（COCs）的回收和体外成熟 | 第25-26页 |
| ·成熟卵母细胞的检查 | 第26页 |
| ·成熟卵母细胞的孤雌激活 | 第26页 |
| ·孤雌激活胚与输卵管上皮细胞协同培养 | 第26页 |
| ·孤雌胚的体外培养培养 | 第26页 |
| ·实验数据处理 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-28页 |
| ·不同采卵方法对卵母细胞回收率的影响 | 第27页 |
| ·不同成熟液对卵母细胞体外成熟的影响 | 第27-28页 |
| ·不同成熟液对卵母细胞孤雌激活效率 | 第28页 |
| ·共培养对孤雌胚发育影响 | 第28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| ·卵母细胞的采集方法 | 第28-29页 |
| ·卵母细胞类型和体外成熟体系 | 第29页 |
| ·不同成熟培养体系对马卵母细胞孤雌激活的影响 | 第29-30页 |
| ·共培养对孤雌胚发育的影响 | 第30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| Ⅱ 马体细胞克隆胚的构建 | 第31-41页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-35页 |
| ·马成纤维细胞的分离和培养 | 第32-34页 |
| ·马皮肤组织的采集与处理 | 第32页 |
| ·原代培养 | 第32页 |
| ·分离与纯化 | 第32页 |
| ·传代培养 | 第32-33页 |
| ·细胞生长曲线 | 第33页 |
| ·染色体检查 | 第33页 |
| ·细胞冷冻 | 第33页 |
| ·细胞解冻复苏 | 第33-34页 |
| ·马体细胞克隆胚的构建 | 第34-35页 |
| ·核移植显微操作用针的准备 | 第34页 |
| ·卵母细胞的体外成熟和去核 | 第34页 |
| ·核供体的准备 | 第34-35页 |
| ·核移植 | 第35页 |
| ·细胞融合 | 第35页 |
| ·重组胚的激活及体外培养 | 第35页 |
| ·数据处理 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-37页 |
| ·马皮肤成纤维细胞的生长曲线 | 第35-36页 |
| ·马皮肤成纤维细胞的染色体检查 | 第36页 |
| ·供体细胞传代次数在核移植中的比较 | 第36-37页 |
| ·电融合参数对融合率的影响 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·生长曲线 | 第37-38页 |
| ·染色的的检查 | 第38页 |
| ·不同代数的供体细胞对核移植的影响 | 第38-39页 |
| ·不同电融合参数对重组胚融合率的影响 | 第39-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 附图 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
