| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 分子信标的结构及原理 | 第12-13页 |
| 1.2 新型分子信标的种类 | 第13-17页 |
| 1.3 分子信标技术的研究现状及应用 | 第17-21页 |
| 1.3.1 分子信标技术在miRNA检测中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.2 分子信标技术在蛋白质检测与分析中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 分子信标技术在酶活性分析中的应用 | 第19-21页 |
| 1.4 miRNA检测技术的研究现状及应用 | 第21-24页 |
| 1.4.1 miRNA传统的检测方法 | 第21页 |
| 1.4.2 基于酶促信号放大检测miRNA | 第21-22页 |
| 1.4.3 基于金纳米材料检测miRNA | 第22-23页 |
| 1.4.4 基于氧化石墨烯检测miRNA | 第23-24页 |
| 1.5 本文的选题背景和研究意义 | 第24页 |
| 1.6 本文拟开展的工作 | 第24-26页 |
| 第2章 分子信标用于肿瘤相关的miRNA-21的检测 | 第26-43页 |
| 2.1 前言 | 第26页 |
| 2.2 实验部分 | 第26-34页 |
| 2.2.1 分子信标检测miRNA的实验原理 | 第26-27页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-42页 |
| 2.3.1 分子信标热变性曲线的建立 | 第34页 |
| 2.3.2 温度和Mg~(2+)对分子信标稳定性的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.3 pH值和Mg~(2+)对分子信标杂交性能的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.4 分子信标信背比的考察 | 第36页 |
| 2.3.5 分子信标特异性的考察 | 第36-37页 |
| 2.3.6 分子信标杂交标准曲线的建立 | 第37-38页 |
| 2.3.7 细胞总RNA的提取与鉴定 | 第38页 |
| 2.3.8 荧光法检测肝癌细胞中miRNA-21 | 第38-39页 |
| 2.3.9 RT-RCR方法检测肝癌细胞中miRNA-21 | 第39-41页 |
| 2.3.10 荧光法检测胃癌组织中miRNA-21 | 第41页 |
| 2.3.11 RT-PCR方法检测胃癌组织中miRNA-21 | 第41-42页 |
| 2.3.12 miRNA-21调控的靶蛋白的检测 | 第42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第3章 基于分子信标结合酶促信号放大用于miRNA-21的超灵敏检测 | 第43-56页 |
| 3.1 前言 | 第43-44页 |
| 3.2 实验部分 | 第44-48页 |
| 3.2.0 酶促信号放大检测miRNA原理 | 第44页 |
| 3.2.1 仪器和试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第48-54页 |
| 3.3.1 胃癌组织样品的统计与鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.2 分子信标热变性曲线的建立 | 第49页 |
| 3.3.3 分子信标信背比的考察 | 第49-50页 |
| 3.3.4 分子信标抗酶切能力的考察 | 第50-51页 |
| 3.3.5 分子信标杂交缓冲液条件的优化 | 第51-52页 |
| 3.3.6 标准样品检测下限的确定 | 第52页 |
| 3.3.7 DSN酶浓度条件的优化 | 第52-53页 |
| 3.3.8 信号放大检测下限的确定 | 第53页 |
| 3.3.9 胃癌组织样品的检测 | 第53-54页 |
| 3.3.10 RT-PCR实验结果的验证 | 第54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-56页 |
| 第4章 基于分子信标实时监测UDG酶活性方法的建立及其应用 | 第56-66页 |
| 4.1 前言 | 第56-57页 |
| 4.2 实验部分 | 第57-59页 |
| 4.2.1 实验设计原理 | 第57页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第57-58页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 4.3.1 UDG酶对分子信标的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.2 分子信标信背比的考察 | 第60页 |
| 4.3.3 Mg~(2+)浓度对UDG酶活性的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.4 温度对UDG酶活性的影响 | 第61页 |
| 4.3.5 不同UDG酶浓度对反应初速度的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.6 UDG酶动力学的研究 | 第62页 |
| 4.3.7 金属离子对UDG酶活性的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.8 UDG酶抑制剂的选择 | 第63页 |
| 4.3.9 EDTA对复杂样品体系中UDG酶的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.10 细胞样品和血清样品UDG酶含量的测定 | 第64-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 结论与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 攻读硕士学位期间参与发表论文和专利 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
