| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-27页 |
| 1.1 喹诺酮类抗生素的应用及其耐药机制 | 第16-19页 |
| 1.1.1 喹诺酮类抗生素的耐药机制 | 第17页 |
| 1.1.2 染色体介导的喹诺酮类药物抗性 | 第17-18页 |
| 1.1.2.1 Ⅱ型拓扑异构酶的变异 | 第17-18页 |
| 1.1.2.2 降低细菌细胞内喹诺酮类药物的浓度 | 第18页 |
| 1.1.3 质粒介导的喹诺酮抗性 | 第18-19页 |
| 1.1.3.1 qnr基因 | 第18-19页 |
| 1.1.3.2 acc(6’)-Ib-cr基因 | 第19页 |
| 1.1.3.3 外排泵基因 | 第19页 |
| 1.2 β-内酰胺类抗生素的应用及其耐药机制 | 第19-21页 |
| 1.2.1 β-内酰胺类抗生素的耐药机制 | 第19-20页 |
| 1.2.2 β-内酰胺酶的分类 | 第20-21页 |
| 1.2.2.1 TEM型ESBLs | 第20-21页 |
| 1.2.2.2 SHV型ESBLs | 第21页 |
| 1.2.2.3 CTX-M型ESBLs | 第21页 |
| 1.3 整合子 | 第21-23页 |
| 1.3.1 整合子的结构 | 第21-22页 |
| 1.3.2 整合子的分类 | 第22-23页 |
| 1.4 ISCR元件 | 第23-25页 |
| 1.4.1 ISCR元件的结构 | 第23-24页 |
| 1.4.2 ISCR元件的转座机制 | 第24-25页 |
| 1.5 多位点序列分型 | 第25页 |
| 1.6 立题依据及意义 | 第25-27页 |
| 第二章 耐药肠杆菌细菌的筛选及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型整合子的检测 | 第27-46页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 材料 | 第27-31页 |
| 2.2.1.1 实验菌株 | 第27页 |
| 2.2.1.2 实验所需培养基及其配制 | 第27-28页 |
| 2.2.1.3 实验所需抗生素及其配制 | 第28-29页 |
| 2.2.1.4 实验所需溶液及其配制 | 第29-30页 |
| 2.2.1.5 实验所需试剂及仪器 | 第30-31页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第31-41页 |
| 2.2.2.1 耐药肠杆科细菌的筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.2.2 肠杆菌科细菌的鉴定 | 第32页 |
| 2.2.2.3 CTAB法提取细菌基因组DNA | 第32-33页 |
| 2.2.2.4 基因组DNA提取质量检测 | 第33-34页 |
| 2.2.2.5 PCR法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型整合子 | 第34-35页 |
| 2.2.2.6 Ⅰ、Ⅱ型整合子的基因盒阵列分析 | 第35-36页 |
| 2.2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
| 2.2.2.8 乙醇沉淀DNA | 第37页 |
| 2.2.2.9 感受态细胞的制备(化学法-氯化钙法) | 第37-38页 |
| 2.2.2.10 T-A克隆(测序载体的构建) | 第38页 |
| 2.2.2.11 转化实验(热激法) | 第38-39页 |
| 2.2.2.12 重组质粒的筛选和鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.2.13 碱法小提质粒 | 第40-41页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第41-45页 |
| 2.3.1 肉鸡源性耐药肠杆菌科细菌的筛选 | 第41页 |
| 2.3.2 耐药性肠杆菌科细菌中整合子的检测 | 第41-42页 |
| 2.3.3 耐药性肠杆菌科细菌中整合子的基因盒阵列分析 | 第42-45页 |
| 2.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 大肠杆菌的生理分型及其药敏实验 | 第46-57页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第46-51页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 3.2.1.1 实验菌株 | 第46页 |
| 3.2.1.2 实验主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.2.1.3 实验所用抗生素及其配制 | 第47页 |
| 3.2.1.4 实验所用溶液及其配制 | 第47-48页 |
| 3.2.1.5 实验所需试剂及仪器 | 第48页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.2.1 药敏实验(K-B纸片琼脂扩散法) | 第48-49页 |
| 3.2.2.2 PCR法对E. coli菌进行生理分型 | 第49-51页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第51-56页 |
| 3.3.1 耐药性E. coli菌株的药敏性分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2 耐药性E. coli菌株的生理类型分析 | 第52-53页 |
| 3.3.3 不同生理型E. coli菌的药敏性分析 | 第53-54页 |
| 3.3.4 不同生理型E. coli菌中不同类型整合子的流行性分析 | 第54-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 克雷伯氏菌的多位点序列分型与抗生素耐药性的关系 | 第57-79页 |
| 4.1 引言 | 第57页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第57-68页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第57-60页 |
| 4.2.1.1 实验菌株 | 第57页 |
| 4.2.1.2 实验所需培养基及其配制 | 第57-58页 |
| 4.2.1.3 实验所需抗生素及其配制 | 第58-59页 |
| 4.2.1.4 实验所需溶液及其配制 | 第59页 |
| 4.2.1.5 实验所需试剂及仪器 | 第59-60页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第60-68页 |
| 4.2.2.1 药敏实验(K-B纸片琼脂扩散法) | 第60-61页 |
| 4.2.2.2 克雷伯氏菌的分子鉴定 | 第61-62页 |
| 4.2.2.3 β-内酰胺酶的检测(碘液法) | 第62页 |
| 4.2.2.4 PCR法检测耐药基因的存在率 | 第62-63页 |
| 4.2.2.5 β-内酰胺类耐药基因的分型 | 第63页 |
| 4.2.2.6 接合转移实验 | 第63-64页 |
| 4.2.2.7 多位点序列分型 | 第64-68页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第68-76页 |
| 4.3.1 克雷伯氏菌的药敏性分析 | 第68-69页 |
| 4.3.2 克雷伯氏菌的分子分析 | 第69-70页 |
| 4.3.3 克雷伯氏菌的β-内酰胺酶定性鉴定和耐药基因的检测 | 第70-73页 |
| 4.3.4 ESBL基因、PMQR基因和Ⅰ型整合子之间的关系 | 第73-74页 |
| 4.3.5 多位点序列分型分析 | 第74-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76-79页 |
| 第5章 ISCR1元件及其介导的下游结构分析 | 第79-83页 |
| 5.1 引言 | 第79页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第79-81页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第79-80页 |
| 5.2.1.1 实验菌株 | 第79页 |
| 5.2.1.2 实验所需溶液及其配制 | 第79页 |
| 5.2.1.3 实验所需试剂及仪器 | 第79-80页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第80-81页 |
| 5.2.2.1 PCR法检测ISCR1元件 | 第80页 |
| 5.2.2.2 ISCR1元件介导的下游结构分析 | 第80-81页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第81-82页 |
| 5.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 第六章 全文总结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术文章 | 第93-94页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第94页 |
