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基于壳聚糖水凝胶的可注射性心肌组织工程研究

缩略词表第1-8页
摘要第8-12页
ABSTRACT第12-17页
前言第17-23页
第一部分:心肌组织工程不同种子细胞的分离、培养、标记及生物学特性研究第23-63页
 实验一:不同干细胞分离、培养与分化研究第24-40页
  1. 材料第24-25页
   ·主要仪器设备第24-25页
   ·主要试剂第25页
   ·其他第25页
  2. 方法第25-30页
   ·溶液的配制第25-26页
   ·白色脂肪 ADSC 的分离、培养与鉴定第26-27页
   ·棕色脂肪 CSC 的分离、培养、鉴定及成心肌分化第27-28页
   ·iPSC 的培养、鉴定及成心肌分化第28-29页
   ·统计学分析第29-30页
  3. 结果第30-38页
   ·白色脂肪 ADSC 的分离、培养与鉴定第30-31页
   ·棕色脂肪 CSC 的分离、培养、鉴定及成心肌分化第31-36页
   ·iPSC 的培养、鉴定及成心肌分化第36-38页
  4. 讨论第38-40页
 实验二:基于慢病毒颗粒的干细胞标记研究第40-50页
  1. 材料第40-41页
   ·主要仪器设备第40-41页
   ·主要试剂第41页
   ·其他第41页
  2. 方法第41-43页
   ·携带 Fluc-mRFP-tTK 的慢病毒颗粒的制备第41-42页
   ·病毒滴度测定第42页
   ·干细胞的慢病毒感染标记第42页
   ·标记干细胞的分选与鉴定第42页
   ·报告基因表达分析第42-43页
   ·统计学分析第43页
  3. 结果第43-48页
   ·慢病毒的制备与滴度测定第43页
   ·白色脂肪 ADSC 的标记与分析第43-44页
   ·iPSC 的标记与生物学特征鉴定第44-46页
   ·报告基因在 iPSC 中的表达活性分析第46页
   ·报告基因在 iPSC 扩增过程中的表达稳定性分析第46-47页
   ·报告基因在 iPSC 分过过程中的表达稳定性分析第47-48页
  4. 讨论第48-50页
 实验三:iPSC 致瘤性与免疫原性研究第50-63页
  1. 材料第50-51页
   ·主要设备第50-51页
   ·主要试剂第51页
   ·其他第51页
  2. 方法第51-53页
   ·iPSC 源心肌细胞的诱导分化与分选第51-52页
   ·iPSC 及其来源细胞的裸鼠皮下移植第52页
   ·小鼠心梗模型的制备与 iPSC 的心肌内移植第52页
   ·生物发光成像第52页
   ·RT-PCR第52-53页
   ·免疫组织化学染色第53页
   ·统计学分析第53页
  3. 结果第53-60页
   ·iPSC 诱导分化过程中多能性细胞的存在第53-55页
   ·iPSC 分化细胞的比较第55页
   ·裸鼠皮下移植后的生物发光成像第55-56页
   ·iPSC 及其不同分化产物在裸鼠皮下的致瘤性第56-57页
   ·心梗小鼠心肌内移植后的生物发光成像第57-58页
   ·iPSC 心肌内移植后的迁移第58页
   ·iPSC 在心梗环境下的致瘤性第58-59页
   ·细胞移植后的免疫细胞浸润检测第59-60页
  4. 讨论第60-63页
第二部分:可注射性壳聚糖基水凝胶制备、生物学评价及细胞保护相关机制研究第63-78页
 实验一:温敏性壳聚糖基水凝胶的制备与生物学评价第64-70页
  1. 材料第64-65页
   ·主要仪器设备第64页
   ·主要试剂第64-65页
   ·其他第65页
  2. 方法第65-66页
   ·溶液配制第65页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶的制备第65页
   ·大鼠白色脂肪 ADSC 的分离培养第65页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶与 ADSC 相容性评价第65页
   ·大鼠心梗模型制备第65-66页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶的心肌内注射与评价第66页
   ·心脏标本的 DHE 染色第66页
  3. 结果第66-69页
   ·温敏性壳聚糖水凝胶的制备第66-67页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶与 ADSC 的生物相容性第67页
   ·大鼠心梗模型制备第67-68页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶在心梗环境下的组织相容性检测第68页
   ·温敏性壳聚糖基水凝胶在心梗环境下的抗氧化能力检测第68-69页
  4. 讨论第69-70页
 实验二:壳聚糖降解产物在模拟 ROS 环境下促进 ADSC 黏附与存活研究第70-78页
  1. 材料第70-71页
   ·主要仪器设备第70页
   ·主要试剂第70-71页
   ·其他第71页
  2. 方法第71-73页
   ·溶液配制第71页
   ·ROS 对 ADSC 黏附与存活的影响第71页
   ·ROS 环境下,D-Glu 与 N-AC-Glu 作用浓度摸索第71-72页
   ·细胞内 ROS 水平检测第72页
   ·ROS 条件下 D-Glu 与 N-AC-Glu 促 ADSC 黏附分析第72页
   ·RT-PCR第72页
   ·蛋白提取与 Western Blotting 检测第72-73页
   ·统计学分析第73页
  3. 结果第73-76页
   ·ROS 对 ADSC 黏附的影响第73页
   ·ROS 环境下,D-Glu 与 N-AC-Glu 促进 ADSC 粘附的作用第73-75页
   ·ROS 对 ADSC 的损伤及 D-Glu/N-AC-Glu 保护作用的相关机制第75-76页
  4. 讨论第76-78页
第三部分:温敏性壳聚糖水凝胶携带 ADSC 心梗移植的实验研究第78-92页
 1. 材料第78-79页
   ·主要仪器设备第78-79页
   ·主要试剂第79页
   ·其他第79页
 2. 方法第79-83页
   ·溶液配制第79-80页
   ·心梗模型制备与 ADSC 的移植第80页
   ·生物发光成像分析第80页
   ·TUNEL 染色第80-81页
   ·DHE 与 Western Blotting 检测第81页
   ·超声心动图检测第81页
   ·血流动力学检测第81页
   ·心梗面积与室壁厚度计算第81-82页
   ·血管密度计算第82页
   ·免疫荧光染色分析第82-83页
   ·统计学分析第83页
 3. 结果第83-90页
   ·生物发光成像分析第83-84页
   ·壳聚糖水凝胶对心梗微环境的改善作用及心脏干细胞归巢第84-85页
   ·心肌梗死后的细胞凋亡第85-86页
   ·心脏功能第86-88页
   ·心梗面积与室壁厚度第88-89页
   ·血管密度第89页
   ·白色脂肪 ADSC 在心梗环境下的分化第89-90页
 4. 讨论第90-92页
结论第92-93页
未来工作展望第93-94页
参考文献第94-100页
文献综述第100-119页
 Reference第111-119页
代表性论著第119-133页
个人简历第133-134页
致谢第134页

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