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ROS/RhoA在幽门螺杆菌诱导MKN-45细胞肌动蛋白骨架重排中的作用

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第10-13页
第二章 材料和方法第13-27页
    2.1 材料第13-14页
        2.1.1 实验材料及仪器第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
        2.1.3 主要工作液配制第14页
    2.2 实验方法第14-27页
        2.2.1 细胞培养第14-16页
        2.2.2 H.pylori的培养第16-17页
        2.2.3 细胞骨架染色(鬼笔环肽染色法)第17页
        2.2.4 Transwell侵袭实验第17-18页
        2.2.5 划痕实验第18页
        2.2.6 siRNA沉默实验(Santa Cruz公司)第18-19页
        2.2.7 Real time PCR第19-21页
        2.2.8 pull down及Western blot第21-25页
        2.2.9 免疫荧光检测第25页
        2.2.10 ROS表达检测(DCFH探针法)第25-26页
        2.2.11 统计学分析第26-27页
第三章 实验结果第27-39页
    3.1 幽门螺杆菌的培养鉴定第27页
    3.2 H.pylori感染对MKN-45 细胞形态改变第27-28页
    3.3 H.pylori感染对MKN-45 细胞骨架的影响第28-30页
    3.4 H.pylori感染对MKN-45 细胞侵袭和迁移能力的影响第30-32页
        3.4.1 H.pylori(NCTC11637)感染对MKN-45 细胞侵袭能力的影响第30-31页
        3.4.2 H.pylori对MKN-45 细胞迁移能力的影响第31-32页
    3.5 H.pylori感染对MKN-45 细胞中RhoA基因、蛋白活性的影响第32-34页
        3.5.1 RT-PCR检测H.pylori感染后MKN-45 细胞中RhoA m RNA表达量第32页
        3.5.2 GST法(pull-down法)检测H.pylori感染后MKN-45 细胞中RhoA蛋白活性第32-33页
        3.5.3 免疫荧光法检测H.pylori感染MKN-45 细胞中Rho A的表达及定位第33-34页
    3.6 RhoA沉默对H.pylori感染的MKN-45细胞细胞骨架及侵袭能力的影响第34-37页
        3.6.2 RhoA沉默对H.pylori诱导的RhoA蛋白活性的影响第34-36页
        3.6.3 沉默RhoA后对H.pylori感染MKN-45 细胞的肌动蛋白骨架及侵袭能力的影响第36-37页
    3.7 ROS在H.pylori感染MKN-45 细胞后激活RhoA中的作用第37-39页
        3.7.1 H.pylori感染MKN-45 细胞后ROS的表达第37页
        3.7.2 NAC抑制ROS后,H.pylori对MKN-45 细胞中Rho A蛋白活性影响第37-39页
第四章 讨论第39-42页
第五章 结论第42-43页
参考文献第43-46页
综述第46-57页
    1、肌动蛋白骨架重排与细胞迁移及侵袭相关第47-48页
    2、H.pylori通过肌动蛋白骨架重排诱导胃癌上皮细胞迁移和侵袭第48-51页
    4、CagA介导的胃癌上皮细胞肌动蛋白骨架改变的研究第51-52页
    结论及展望第52-53页
    参考文献第53-57页
附录第57-58页
缩略语表第58-59页
在学期间研究成果第59-60页
致谢第60页

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