| 摘要 | 第7-9页 |
| abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 抗细菌感染药物的研究 | 第11页 |
| 1.2 细菌的耐药机制 | 第11-12页 |
| 1.3 肠道菌群概述 | 第12-13页 |
| 1.4 SAHN酶蛋白的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.5 细菌的群感效应 | 第14-17页 |
| 1.5.1 自诱导信号分子（AI-2） | 第16页 |
| 1.5.2 细菌菌膜的形成 | 第16-17页 |
| 1.6 Red/ET重组工程简介 | 第17-18页 |
| 1.7 基于分子对接技术的虚拟药物筛选 | 第18-19页 |
| 1.8 展望 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料、仪器和方法 | 第21-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.3 寡核苷酸合成 | 第22页 |
| 2.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-47页 |
| 2.3.1 sahn基因敲除菌株的构建 | 第23-28页 |
| 2.3.2 重组表达载体pET-28a-sahn的构建 | 第28-35页 |
| 2.3.3 SAHN重组蛋白的表达 | 第35-40页 |
| 2.3.4 SAHN酶蛋白在不同表达水平下群感效应的探究 | 第40-43页 |
| 2.3.5 以SAHN为靶点的药物虚拟筛选 | 第43-47页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第47-61页 |
| 3.1 sahn基因敲除菌株的构建 | 第47-49页 |
| 3.1.1 sahn基因敲除菌株的构建过程 | 第47-48页 |
| 3.1.2 sahn基因敲除菌株的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2 大肠杆菌S-腺苷高半胱氨酸核苷酶的克隆 | 第49-51页 |
| 3.2.1 大肠杆菌总DNA的提取 | 第49页 |
| 3.2.2 NcoⅠ、XhoⅠ双酶切验证 | 第49-50页 |
| 3.2.3 测序结果及分析 | 第50-51页 |
| 3.3 大肠杆菌S-腺苷高半胱氨酸核苷酶的表达 | 第51-53页 |
| 3.3.1 重组SAHN蛋白纯化 | 第51页 |
| 3.3.2 重组SAHN蛋白浓度的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.3 SAHN酶反应动力学参数表征 | 第52-53页 |
| 3.4 SAHN酶蛋白在不同表达水平下群感效应分析 | 第53-57页 |
| 3.4.1 大肠杆菌生长曲线 | 第53-54页 |
| 3.4.2 实时定量反转录PCR的结果分析 | 第54-55页 |
| 3.4.3 信号分子AI-2 的检测 | 第55-56页 |
| 3.4.4 生物膜的检测 | 第56-57页 |
| 3.5 以SAHN酶蛋白为靶标的分子对接 | 第57-61页 |
| 第四章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
