| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 IFN-γ 的产生及其诱生剂 | 第10-11页 |
| 1.1.1 IFN-γ的产生 | 第10页 |
| 1.1.2 IFN-γ诱生剂 | 第10-11页 |
| 1.2 IFN-γ的基因结构 | 第11-12页 |
| 1.3 IFN-γ的受体 | 第12-13页 |
| 1.4 IFN-γ的信号传导 | 第13-14页 |
| 1.5 IFN-γ主要生物学活性 | 第14-17页 |
| 1.5.1 IFN-γ的抗病毒作用及机制 | 第14-15页 |
| 1.5.2 IFN-γ的免疫调节作用及机制 | 第15页 |
| 1.5.3 IFN-γ的抗肿瘤作用及机制 | 第15-16页 |
| 1.5.4 IFN-γ抗菌作用及机制 | 第16-17页 |
| 1.6 IFN-γ的临床应用 | 第17页 |
| 1.7 抗IFN-γ的MCAB 的研究 | 第17-19页 |
| 1.7.1 关于IFN-γ定性及定量分析 | 第17-18页 |
| 1.7.2 关于IFN- γ的纯化 | 第18页 |
| 1.7.3 关于疾病的诊断 | 第18-19页 |
| 1.7.4 关于免疫细胞功能 | 第19页 |
| 1.8 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验动物及菌种、细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 细胞培养基和血清 | 第20页 |
| 2.1.3 克隆、表达及转移载体 | 第20页 |
| 2.1.4 酶、生化试剂 | 第20页 |
| 2.1.5 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 重组质粒pMD18-T-mGoIFN-γ酶切分析鉴定 | 第21页 |
| 2.2.2 重组质粒pcDNA3.1-IFN-γ的构建及鉴定 | 第21-23页 |
| 2.2.3 检测抗原的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.4 质粒的大量制备 | 第24-25页 |
| 2.2.5 间接ELISA 方法建立 | 第25-27页 |
| 2.2.6 动物免疫 | 第27页 |
| 2.2.7 细胞融合 | 第27页 |
| 2.2.8 杂交瘤上清的检测 | 第27页 |
| 2.2.9 阳性杂交瘤的扩大培养和亚克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.10 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第28页 |
| 2.2.11 杂交瘤细胞及McAb 特性鉴定 | 第28-32页 |
| 3 结果 | 第32-40页 |
| 3.1 重组质粒 pMD18-T-mGoIFN-γ 酶切鉴定结果 | 第32页 |
| 3.2 重组质粒 pcDNA3.1-IFN-γ 的酶切鉴定结果 | 第32-33页 |
| 3.3 纯化蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| 3.4 ELISA 筛选方法的建立结果 | 第34-36页 |
| 3.4.1 最佳抗原及抗血清工作浓度的确定结果 | 第34页 |
| 3.4.2 抗原最佳作用时间的确定结果 | 第34页 |
| 3.4.3 封闭液最佳作用时间的确定结果 | 第34-35页 |
| 3.4.4 抗血清最佳作用时间的确定结果 | 第35页 |
| 3.4.5 二抗最佳作用时间的确定结果 | 第35页 |
| 3.4.6 底物显色液最佳作用时间确定结果 | 第35-36页 |
| 3.5 杂交瘤细胞株的建立 | 第36页 |
| 3.6 McAb 特性鉴定结果 | 第36-40页 |
| 3.6.1 McAb 亚类的鉴定结果 | 第36页 |
| 3.6.2 杂交瘤细胞染色体分析 | 第36-37页 |
| 3.6.3 杂交瘤细胞株的稳定性分析结果 | 第37-38页 |
| 3.6.4 杂交瘤细胞上清及McAb 腹水间接ELISA 效价测定结果 | 第38页 |
| 3.6.5 McAb 相对亲和力测定结果 | 第38页 |
| 3.6.6 抗原表位测定结果 | 第38-39页 |
| 3.6.7 McAb Western blot 鉴定结果 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 4.1 免疫方法的选择 | 第40页 |
| 4.2 检测抗原的选择 | 第40-41页 |
| 4.3 McAb 的亚类与 Western blot 鉴定 | 第41页 |
| 4.4 McAb 的相对亲和力 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
