| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第一章 哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第15-33页 |
| ·体细胞核移植的方法和程序 | 第16-27页 |
| ·受体胞质的准备 | 第17-20页 |
| ·供体细胞的选择 | 第20-23页 |
| ·重构胚的构建 | 第23-24页 |
| ·重构胚的激活 | 第24-26页 |
| ·重构胚的培养 | 第26-27页 |
| ·异种核移植研究进展 | 第27-29页 |
| ·体细胞核移植技术存在的问题及应用前景 | 第29-31页 |
| ·体细胞核移植存在的问题 | 第29-30页 |
| ·体细胞核移植技术的应用 | 第30-31页 |
| ·结语 | 第31-33页 |
| 第二章 体细胞重编程研究进展 | 第33-47页 |
| ·通过核移植重编程体细胞 | 第35-41页 |
| ·早期胚胎发育中的DNA 甲基化模式 | 第36-38页 |
| ·核移植中异常的DNA 甲基化模式 | 第38-39页 |
| ·组蛋白乙酰化修饰的作用 | 第39-40页 |
| ·核移植过程中的组蛋白乙酰化变化 | 第40-41页 |
| ·通过与干细胞融合重编程体细胞 | 第41页 |
| ·胞质提取物诱导体细胞重编程 | 第41-42页 |
| ·转录因子诱导体细胞重编程 | 第42-47页 |
| ·Oct3/4（又称Pou5f1） | 第43-44页 |
| ·Sox2 (SRY-related HMG box2) | 第44页 |
| ·c-Myc | 第44页 |
| ·Klf4 (Kruppel-like factor 4) | 第44-45页 |
| ·Nanog | 第45页 |
| ·Lin-28 | 第45页 |
| ·iPS 细胞的应用和存在的问题 | 第45-47页 |
| 第三章 牛卵母细胞体外成熟培养体系的优化 | 第47-53页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·实验用品 | 第47-48页 |
| ·卵母细胞的采集 | 第48页 |
| ·卵母细胞体外成熟培养 | 第48页 |
| ·卵母细胞孤雌激活及体外培养 | 第48页 |
| ·凋亡检测 | 第48页 |
| ·实验设计 | 第48-49页 |
| ·统计分析 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-51页 |
| ·不同激素配比对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第49-51页 |
| ·EGF 对牛卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎发育的影响 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·不同激素配比对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第51-52页 |
| ·EGF 对卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 供体细胞对核移植胚胎发育的影响 | 第53-61页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·实验用品 | 第53页 |
| ·卵母细胞采集与体外成熟 | 第53-54页 |
| ·供体细胞制备 | 第54页 |
| ·核移植 | 第54-55页 |
| ·凋亡检测 | 第55页 |
| ·实验设计 | 第55页 |
| ·统计分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-58页 |
| ·血清饥饿法与接触抑制法对重构胚胎发育的影响 | 第55-56页 |
| ·供体细胞传代对重构胚发育的影响 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·血清饥饿法与接触抑制法的比较 | 第58-60页 |
| ·供体细胞传代对核移植的影响 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第五章 牛卵胞质抽提物重编程供体细胞对克隆胚胎发育的影响 | 第61-73页 |
| ·材料与方法 | 第62-65页 |
| ·卵母细胞采集与成熟 | 第62页 |
| ·牛卵胞质抽提物的制备 | 第62页 |
| ·牛卵胞质抽提物预处理供体细胞 | 第62-63页 |
| ·处理细胞的RT-PCR 检测 | 第63页 |
| ·处理细胞的免疫细胞化学分析 | 第63-64页 |
| ·核移植 | 第64页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第64页 |
| ·实验设计 | 第64-65页 |
| ·统计分析 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-70页 |
| ·不耐氧链球菌溶血素处理后供体核DNA 的完整性 | 第65-66页 |
| ·牛卵胞质抽提物对供体细胞的重编程作用 | 第66页 |
| ·牛卵胞质抽提物重编程供体细胞对核移植胚胎体外发育的影响 | 第66-69页 |
| ·牛卵胞质抽提物重编程供体细胞对核移植囊胚质量的影响 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·牛卵胞质抽提物对供体细胞的重编程作用 | 第70页 |
| ·供体核与受体胞质的一致性对体细胞核移植的影响 | 第70-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第六章 小鼠-牛异种核移植胚胎体外发育与合子激活基因的表达 | 第73-81页 |
| ·材料与方法 | 第74-76页 |
| ·实验用品 | 第74页 |
| ·卵母细胞采集与成熟培养 | 第74页 |
| ·供体细胞制备 | 第74页 |
| ·核移植 | 第74页 |
| ·小鼠受精卵采集与培养 | 第74-75页 |
| ·RT-PCR | 第75页 |
| ·实验设计 | 第75页 |
| ·统计分析 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-78页 |
| ·小鼠-牛异种克隆胚的体外发育 | 第76页 |
| ·小鼠-牛异种克隆胚的发育形态 | 第76-77页 |
| ·小鼠合子激活基因在异种克隆胚中的表达情况 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| ·小鼠-牛异种克隆胚的体外发育 | 第78-79页 |
| ·异种克隆胚中的合子基因激活 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 第七章 牛孤雌激活胚胎核质对热激的易感性差异及其相互作用 | 第81-89页 |
| ·材料与方法 | 第81-86页 |
| ·实验用品 | 第81-82页 |
| ·卵母细胞采集与成熟 | 第82页 |
| ·卵母细胞孤雌激活及热激处理 | 第82页 |
| ·核置换 | 第82页 |
| ·胚胎体外培养 | 第82页 |
| ·RT-PCR | 第82页 |
| ·凋亡检测 | 第82-83页 |
| ·实验设计 | 第83页 |
| ·统计分析 | 第83-86页 |
| ·结果 | 第86页 |
| ·热激后核质置换胚胎的体外发育 | 第86页 |
| ·合子激活基因在核质置换胚胎中的表达情况 | 第86页 |
| ·热激后核质置换胚胎的凋亡情况 | 第86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·热激后核与胞质对胚胎发育的影响 | 第86-87页 |
| ·热激后核与胞质对合子基因激活的影响 | 第87页 |
| ·热激后核与胞质对胚胎凋亡的调控作用 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 本论文的创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-114页 |
| 附录1 实验用主要溶液的配制 | 第114-117页 |
| 附录2 实验用常规仪器 | 第117-118页 |
| 附录3 主要英文缩写检索表（字母顺序） | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121页 |
