摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 文献综述 | 第13-20页 |
1.1.1 中国的土壤污染状况 | 第13页 |
1.1.2 镉对植物的毒害效应 | 第13-14页 |
1.1.3 植物修复技术和超积累植物 | 第14-16页 |
1.1.4 植物对重金属的解毒机制 | 第16-18页 |
1.1.5 与镉转运相关的主要基因家族 | 第18-19页 |
1.1.6 Nramp基因家族的研究进展 | 第19-20页 |
1.2 研究内容 | 第20-22页 |
1.2.1 超积累型东南景天响应Cd胁迫的Nramp基因的筛选、分离及生物信息学分析 | 第20-21页 |
1.2.2 SaNramp6基因时空表达模式研究 | 第21页 |
1.2.3 SaNramp6基因的亚细胞定位研究 | 第21页 |
1.2.4 SaNramp6基因转酵母的功能分析 | 第21页 |
1.2.5 SaNramp6基因转拟南芥的功能分析 | 第21-22页 |
1.2.6 拟南芥突变体回复实验 | 第22页 |
1.3 本研究的技术路线 | 第22-23页 |
第二章 实验材料与方法 | 第23-47页 |
2.1 实验材料 | 第23-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第23页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第23-24页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
2.1.5 试剂和培养基的配制 | 第24-25页 |
2.1.6 引物 | 第25-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-47页 |
2.2.1 超积累型东南景天Nramp基因家族成员在Cd胁迫条件下的表达模式分析 | 第28-30页 |
2.2.2 SaNramp6基因的克隆及分析 | 第30-34页 |
2.2.3 SaNramp6基因的时空表达模式 | 第34页 |
2.2.4 SaNramp6基因的亚细胞定位 | 第34-38页 |
2.2.5 酵母表达SaNramp6基因后对镉的耐性分析 | 第38-41页 |
2.2.6 SaNramp6基因在拟南芥中的功能分析 | 第41-45页 |
2.2.7 拟南芥突变体互补实验 | 第45-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-69页 |
3.1 超积累型东南景天Nramp基因家族成员在Cd胁迫条件下的表达模式分析 | 第47-48页 |
3.2 SaNramp6基因结构与生物信息学分析 | 第48-52页 |
3.2.1 SaNramp6基因cDNA序列全长的获得 | 第48-49页 |
3.2.2 SaNramp6基因组全长序列分析 | 第49-50页 |
3.2.3 生物信息学分析 | 第50-52页 |
3.3 SaNramp6基因的表达模式分析 | 第52-53页 |
3.4 东南景天SaNramp6基因的亚细胞定位 | 第53-55页 |
3.4.1 载体pK7WGF2.0-SaNramp6的构建 | 第53-54页 |
3.4.2 SaNramp6基因在洋葱表皮中的亚细胞定位 | 第54页 |
3.4.3 烟草叶片的瞬时表达 | 第54-55页 |
3.5 ycf1酵母表达SaNramp6基因后对镉的耐性分析 | 第55-58页 |
3.5.1 酵母转化子的点板实验 | 第55-56页 |
3.5.2 酵母转化子在镉处理条件下的生长曲线测定 | 第56-57页 |
3.5.3 酵母转化子镉含量测定 | 第57-58页 |
3.6 转基因拟南芥的镉抗性实验 | 第58-65页 |
3.6.1 植物表达载体pH2GW7.0-SaNramp6的构建 | 第58页 |
3.6.2 Hyg拟南芥的筛选以及鉴定 | 第58-60页 |
3.6.3 镉胁迫下拟南芥的生理响应 | 第60-64页 |
3.6.4 超表达SaNramp6对拟南芥镉积累的影响 | 第64页 |
3.6.5 SaNramp6超表达提高了拟南芥根部的镉离子流入速度 | 第64-65页 |
3.7 拟南芥突变体回复实验 | 第65-69页 |
3.7.1 拟南芥突变体的检测 | 第65-66页 |
3.7.2 镉胁迫下拟南芥的生理响应 | 第66-68页 |
3.7.3 超表达SaNramp6对拟南芥镉积累的影响 | 第68-69页 |
第四章 结论与展望 | 第69-74页 |
4.1 结论 | 第69-73页 |
4.1.1 SaNramp6基因克隆及信息学分析 | 第69-70页 |
4.1.2 SaNramp6基因的表达模式 | 第70页 |
4.1.3 SaNramp6基因的亚细胞定位 | 第70-71页 |
4.1.4 ycf1酵母表达SaNramp6后的镉积累和敏感性 | 第71页 |
4.1.5 SaNramp6基因对拟南芥镉耐性和镉积累的影响 | 第71-73页 |
4.2 本实验的创新点 | 第73页 |
4.3 研究展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
在读期间的学术研究 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |