| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1. 文献综述 | 第9-15页 |
| 1.1 逆境胁迫响应的分子机制 | 第9-12页 |
| 1.1.1 响应逆境胁迫基因的分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 信号蛋白传递途径 | 第10页 |
| 1.1.3 转录因子在植物逆境胁迫响应中的作用 | 第10-12页 |
| 1.1.4 锚蛋白的研究进展 | 第12页 |
| 1.2 酵母双杂交技术的研究(YEAST TWO-HYBRID) | 第12-13页 |
| 1.3 蛋白质亚细胞定位技术的研究 | 第13页 |
| 1.4 蛋白质双分子荧光互补技术的研究 | 第13页 |
| 1.5 PULL-DOWN蛋白技术的研究 | 第13-14页 |
| 1.6 蛋白互作研究进展 | 第14-15页 |
| 2 引言 | 第15-16页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第15页 |
| 2.2 研究技术路线 | 第15-16页 |
| 3. 菜用大豆转录因子GMPLZ以及互作基因GMPAK、GMCAP的克隆与功能鉴定 | 第16-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第16页 |
| 3.2 实验试剂 | 第16页 |
| 3.3 实验方法 | 第16-29页 |
| 3.3.1 菜用大豆材料的处理以及RNA的提取 | 第16-18页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第18-19页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥根长实验 | 第19页 |
| 3.3.4 转录因子GmPLZ全长筛选大豆旱盐混合cDNA文库 | 第19-24页 |
| 3.3.5 菜用大豆目的基因的扩增和载体的构建 | 第24-26页 |
| 3.3.6 亚细胞定位分析 | 第26-27页 |
| 3.3.7 酵母验证蛋白互作 | 第27-28页 |
| 3.3.8 表达模式分析 | 第28-29页 |
| 3.3.9 GmPAK的自磷酸化实验 | 第29页 |
| 3.4 实验结果和分析 | 第29-38页 |
| 3.4.1 菜用大豆RNA的提取 | 第29页 |
| 3.4.2 干旱和盐处理条件下GmPLZ的表达模式 | 第29-30页 |
| 3.4.3 GmPLZ受干旱和盐处理诱导表达 | 第30-31页 |
| 3.4.4 转录因子GmPLZ筛选大豆旱盐混合cDNA文库 | 第31-33页 |
| 3.4.5 GmPAK、GmCap基因的克隆 | 第33-34页 |
| 3.4.6 载体的构建 | 第34页 |
| 3.4.7 GmPLZ和GmPAK、GmCap的互作验证 | 第34-35页 |
| 3.4.8 GmPAK、GmCap的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 3.4.9 GmPAK、GmCap受胁迫的诱导表达 | 第36-37页 |
| 3.4.10 GmPAK具有丝氨酸,苏氨酸,酪氨酸自磷酸化活性 | 第37-38页 |
| 3.5 结论 | 第38-39页 |
| 3.5.1 GmPLZ基因的表达模式、表型分析及酵母筛库 | 第38页 |
| 3.5.2 GmPAK、GmCap蛋白的分子特性和表达模式分析 | 第38-39页 |
| 3.6 讨论 | 第39-41页 |
| 4 菜豆ANK基因的功能鉴定 | 第41-48页 |
| 4.1 材料和方法 | 第41页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.1.2 保守域的预测 | 第41页 |
| 4.1.3 染色体分布 | 第41页 |
| 4.1.4 家族进化树的构建和蛋白结构域的分析 | 第41页 |
| 4.1.5 启动子顺式作用元件分析 | 第41页 |
| 4.1.6 基因的扩增 | 第41页 |
| 4.1.7 RNA提取和real-time PCR分析 | 第41页 |
| 4.1.8 亚细胞定位 | 第41页 |
| 4.2 实验结果和分析 | 第41-46页 |
| 4.2.1 菜豆ANK家族成员鉴定 | 第41-42页 |
| 4.2.2 染色体分布 | 第42页 |
| 4.2.3 菜豆ANK家族成员分类,蛋白结构域的分析和进化树的构建 | 第42-45页 |
| 4.2.4 亚细胞定位 | 第45页 |
| 4.2.5 启动子顺式作用元件分析 | 第45-46页 |
| 4.2.6 ANK25基因在各种逆境胁迫下的表达模式 | 第46页 |
| 4.3 结论 | 第46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
| 在读期间发表的论文 | 第58页 |
