| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 猪乙型脑炎病毒病原学 | 第12-14页 |
| 1.1 猪乙型脑炎病毒的生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.2 JEV的培养特性 | 第13页 |
| 1.3 JEV的基因表达 | 第13-14页 |
| 2 猪乙型脑炎病毒疫苗的研究进展 | 第14-18页 |
| 2.1 乙型脑炎传统型疫苗 | 第14-16页 |
| 2.1.1 鼠脑灭活苗 | 第14-15页 |
| 2.1.2 细胞灭活苗 | 第15-16页 |
| 2.1.3 减毒活疫苗 | 第16页 |
| 2.2 乙脑新型疫苗 | 第16-18页 |
| 2.2.1 亚单位疫苗 | 第16-17页 |
| 2.2.2 核酸疫苗 | 第17-18页 |
| 2.2.3 病毒活载体疫苗 | 第18页 |
| 2.2.4 复制型DNA疫苗 | 第18页 |
| 3 流行病学 | 第18-19页 |
| 4 JEV致病特点 | 第19-20页 |
| 4.1 临床症状 | 第19页 |
| 4.2 病理变化 | 第19-20页 |
| 5 诊断方法 | 第20页 |
| 5.1 病原学诊断 | 第20页 |
| 5.2 血清学检测方法 | 第20页 |
| 5.3 鉴别诊断 | 第20页 |
| 6 防治措施 | 第20-21页 |
| 7 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 猪乙型脑炎病毒SC株的分离鉴定 | 第22-31页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| 1.1 实验细胞、菌种及载体 | 第22页 |
| 1.2 实验试剂及配制 | 第22-23页 |
| 1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 病料采集 | 第23页 |
| 2.2 病料处理 | 第23页 |
| 2.3 病料RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.4 引物设计 | 第24页 |
| 2.5 反转录制备cDNA | 第24-25页 |
| 2.6 病毒的分离与培养 | 第25页 |
| 2.6.1 复苏BHK-21细胞 | 第25页 |
| 2.6.2 病毒分离 | 第25页 |
| 2.7 病毒的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.7.1 病毒的RT-PCR鉴定 | 第25页 |
| 2.7.2 基因的克隆与鉴定 | 第25-26页 |
| 2.7.3 病毒理化性质鉴定 | 第26页 |
| 2.7.4 间接免疫荧光实验(IFA) | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| 3.1 病料检测结果 | 第26-27页 |
| 3.2 病毒的分离 | 第27-28页 |
| 3.3 病毒的RT-PCR鉴定结果 | 第28页 |
| 3.4 病毒理化性质鉴定结果 | 第28页 |
| 3.5 间接免疫荧光实验(IFA) | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 猪乙型脑炎病毒SC株的纯化及培养特性研究 | 第31-41页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1 细胞与病毒 | 第31页 |
| 1.2 实验试剂及配制 | 第31页 |
| 1.3 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-33页 |
| 2.1 JEV-SC株的纯化 | 第32页 |
| 2.2 JEV-SC株的外源病毒检测 | 第32页 |
| 2.3 JEV-SC株的适应性培养 | 第32页 |
| 2.4 JEV-SC株病毒TCID_(50)的测定 | 第32-33页 |
| 2.5 JEV-SC株在BHK-21细胞上的增殖规律 | 第33页 |
| 2.6 JEV-SC株不同代次在BHK-21细胞上的增殖 | 第33页 |
| 2.7 JEV-SC株分别在BHK-21、Vero细胞上的增殖 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-39页 |
| 3.1 JEV-SC株的纯化 | 第33-34页 |
| 3.2 JEV-SC株的外源病毒检测 | 第34页 |
| 3.3 JEV-SC株的适应性培养 | 第34-35页 |
| 3.4 病毒TCID_(50)的测定 | 第35页 |
| 3.5 JEV-SC株在BHK-21细胞上的增值规律 | 第35-36页 |
| 3.6 JEV-SC株不同代次在BHK-21细胞上的增殖 | 第36页 |
| 3.7 JEV-SC株分别在Vero和BHK-21细胞上的病变情况 | 第36-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4.1 关于JEV适应性培养 | 第39页 |
| 4.2 关于JEV含量测定方法 | 第39页 |
| 4.3 关于JEV的细胞增殖特性 | 第39-41页 |
| 第四章 猪乙型脑炎病毒高免血清的制备 | 第41-48页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 细胞与病毒 | 第41-42页 |
| 1.2 实验试剂及配制 | 第42页 |
| 1.3 实验用具与器械 | 第42页 |
| 1.4 实验动物 | 第42页 |
| 1.5 免疫原 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| 2.1 JEV-SC株毒种的检验 | 第42-43页 |
| 2.1.1 毒种的繁殖 | 第42页 |
| 2.1.2 纯粹性检测 | 第42-43页 |
| 2.2 免疫接种 | 第43页 |
| 2.2.1 首次免疫 | 第43页 |
| 2.2.2 二次免疫 | 第43页 |
| 2.2.3 第三次免疫 | 第43页 |
| 2.2.4 第四次免疫 | 第43页 |
| 2.3 血液试检 | 第43页 |
| 2.4 兔颈动脉放血采集血清 | 第43-44页 |
| 2.5 血清的检验 | 第44页 |
| 2.5.1 无菌检验 | 第44页 |
| 2.5.2 特异性鉴定 | 第44页 |
| 2.6 JEV-SC株高免血清的保存 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-47页 |
| 3.1 JEV-SC株毒种的检验 | 第45页 |
| 3.2 琼脂双扩血清效价测定结果 | 第45页 |
| 3.3 无菌检验结果 | 第45-46页 |
| 3.4 特异性实验结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介及攻读学位期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 附件 | 第55页 |
