| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 一、文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 单倍体的产生途径 | 第11-13页 |
| 1.1.1 细胞和组织离体培养 | 第11-12页 |
| 1.1.2 远缘杂交 | 第12页 |
| 1.1.3 诱导系诱导产生 | 第12-13页 |
| 1.1.4 孪生苗 | 第13页 |
| 1.1.5 半配合生殖(Semigamy) | 第13页 |
| 1.1.6 理化方法诱导产生 | 第13页 |
| 1.2 单倍体育种的特点 | 第13-15页 |
| 1.2.1 加快育种进程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 提高育种选择效率 | 第14页 |
| 1.2.3 剔除隐性基因 | 第14页 |
| 1.2.4 育种群体较小 | 第14-15页 |
| 1.2.5 创造非整倍体 | 第15页 |
| 1.2.6 促进基因转移 | 第15页 |
| 1.2.7 培育自交不亲和纯系 | 第15页 |
| 1.3 拟南芥单倍体诱导系的建立与应用 | 第15-18页 |
| 1.4 基因编辑技术研究进展 | 第18-25页 |
| 1.4.1 锌指核酸酶技术 | 第19-20页 |
| 1.4.2 TALE核酸酶 | 第20-23页 |
| 1.4.3 CRISPR/Cas9系统 | 第23-25页 |
| 1.5 论文研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 二、材料与方法 | 第26-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验水稻材料 | 第26页 |
| 2.1.2 质粒载体和菌株种类 | 第26页 |
| 2.1.3 主要分子生物学试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 培养基成分 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.2 互补载体的构建 | 第27-32页 |
| 2.2.4 终表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.5 转基因后代检测 | 第33-35页 |
| 2.2.6 TALEN结果检测 | 第35-36页 |
| 三、结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 CENH3序列分析 | 第36-39页 |
| 3.2 LOC_Os05g41080基因表达谱分析 | 第39-40页 |
| 3.3 OsCENH3-tailswap载体的构建 | 第40-45页 |
| 3.3.1 RNA完整性检测 | 第40-41页 |
| 3.3.2 PCR扩增第一步连接所需片段 | 第41-42页 |
| 3.3.3 酶切检测载体pUC19-GTH | 第42-43页 |
| 3.3.4 PCR扩增第二步连接所需片段 | 第43-44页 |
| 3.3.5 互补载体构建 | 第44-45页 |
| 3.4 TALEN靶位点设计 | 第45-46页 |
| 3.5 Luciferase SSA检测TALEN活性 | 第46-48页 |
| 3.6 最终表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.7 转基因植株的获得 | 第49页 |
| 3.8 转基因植株TO代检测 | 第49-52页 |
| 3.9 qPCR检测日本晴转基因TO代GFP表达量 | 第52页 |
| 3.10 TALEN结果检测 | 第52-53页 |
| 四、讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 附录一：实验中使用的载体图谱 | 第62-64页 |
| 附录二：TALEN开放阅读框测序结果 | 第64-69页 |
