| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 一 前言 | 第12-26页 |
| 1 糖基转移酶概述 | 第12页 |
| 2 脱落酸与植物耐逆机制的研究 | 第12-24页 |
| 2.1 植物脱落酸的研究进展 | 第12-21页 |
| 2.1.1 ABA的生物合成与分解代谢 | 第13-15页 |
| 2.1.2 ABA的信号转导过程 | 第15-16页 |
| 2.1.3 ABA的生理效应 | 第16-20页 |
| 2.1.4 ABA糖基化修饰的研究 | 第20-21页 |
| 2.2 逆境对植物生长的影响及植物耐盐旱的分子机制 | 第21-23页 |
| 2.3 ABA参与植物耐逆的机制研究 | 第23-24页 |
| 3 研究的目的及立题意义 | 第24-26页 |
| 二 材料和方法 | 第26-47页 |
| 1 实验材料 | 第26-30页 |
| 1.1 植物材料 | 第26页 |
| 1.2 菌种及载体 | 第26页 |
| 1.3 主要生化试剂及药品 | 第26-27页 |
| 1.4 各种溶液及培养基的配制 | 第27-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-47页 |
| 2.1 植物表达载体的构建 | 第30-35页 |
| 2.2 拟南芥CRISPR/cas9载体的构建 | 第35-37页 |
| 2.3 原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.4 拟南芥启动子GUS报告载体的构建 | 第38页 |
| 2.5 拟南芥转基因植株的获得 | 第38-39页 |
| 2.6 酶蛋白的表达与纯化方法 | 第39-42页 |
| 2.7 离体酶活性的分析 | 第42-43页 |
| 2.8 植物总蛋白的提取及酶活性分析 | 第43页 |
| 2.9 GUS染色分析 | 第43-44页 |
| 2.10 拟南芥非生物胁迫相关实验 | 第44-45页 |
| 2.11 ABA诱导气孔运动实验 | 第45-46页 |
| 2.12 拟南芥非生物胁迫和ABA信号途径相关基因表达分析 | 第46-47页 |
| 三 结果分析 | 第47-85页 |
| 1 糖基转移酶UGT75X受非生物胁迫及ABA的诱导表达 | 第47页 |
| 2 糖基转移酶UGT75X转基因植株的获得 | 第47-57页 |
| 2.1 UGT75X植物表达载体的构建 | 第47-49页 |
| 2.2 UGT75X原核表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 2.3 UGT75X启动子克隆和报告载体构建 | 第51-52页 |
| 2.4 UGT75X及UGT75X、UGT75Y双敲除CRISPR载体的构建 | 第52-54页 |
| 2.5 UGT75X过表达体、敲除株系纯合体及启动子转基因植株的获得 | 第54-57页 |
| 3 糖基转移酶UGT75X转基因植株对逆境胁迫的响应及机制分析 | 第57-85页 |
| 3.1 UGT75X基因的时空表达特异性 | 第57-58页 |
| 3.2 UGT75Xpromoter::GUS诱导表达 | 第58-59页 |
| 3.3 UGT75X的蛋白纯化及酶活性鉴定 | 第59-62页 |
| 3.4 野生型与UGT75X过表达体中ABA的酶活性比较 | 第62-65页 |
| 3.5 UGT75X转基因植物对盐胁迫的响应 | 第65-70页 |
| 3.5.1 盐处理对UGT75X过表达体萌发率的影响 | 第65-66页 |
| 3.5.2 盐处理对UGT75X过表达体萌发生长期子叶转绿的影响 | 第66-68页 |
| 3.5.3 盐处理对UGT75X过表达体主根生长的影响 | 第68-69页 |
| 3.5.4 UGT75X过表达体土壤盐处理后的表型分析 | 第69-70页 |
| 3.6 UGT75X转基因植物对渗透胁迫的响应 | 第70-77页 |
| 3.6.1 Mannitol处理对UGT75X过表达体萌发率的影响 | 第70-71页 |
| 3.6.2 Mannitol处理对UGT75X过表达体萌发生长期子叶转绿的影响 | 第71-73页 |
| 3.6.3 Mannitol处理对UGT75X过表达体主根生长的影响 | 第73-74页 |
| 3.6.4 UGT75X过表达体土壤干旱处理后的表型分析 | 第74-76页 |
| 3.6.5 野生型与UGT75X过表达体离体失水率比较 | 第76-77页 |
| 3.7 UGT75X转基因植物对ABA的响应 | 第77-82页 |
| 3.7.1 ABA处理对UGT75X过表达体萌发率的影响 | 第77-79页 |
| 3.7.2 ABA处理对UGT75X过表达体萌发生长期子叶转绿的影响 | 第79-80页 |
| 3.7.3 ABA诱导的气孔运动差异分析 | 第80-82页 |
| 3.8 拟南芥逆境胁迫及ABA信号途径相关基因的表达分析 | 第82-85页 |
| 四 讨论 | 第85-88页 |
| 1 UGT75X增强了萌发期对逆境的抗性 | 第85页 |
| 2 UGT75X增加萌发后生长期对逆境敏感性的可能原因 | 第85-87页 |
| 3 UGT75X在农业上的潜在应用价值 | 第87-88页 |
| 五 总结及本论文的创新点 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 附录: 其他糖基转移酶基因的克隆与初步研究 | 第100-104页 |
| 在学期间发表论文 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 附表：本论文中用到的引物序列 | 第106-108页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第108页 |
