| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩略词 | 第10-14页 |
| 1.前言 | 第14-23页 |
| 1.1 喜树碱及其衍生物研究进展 | 第14-18页 |
| 1.1.1 抗肿瘤活性 | 第15-16页 |
| 1.1.2 抗病毒活性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 病虫害防治活性 | 第17页 |
| 1.1.4 抗寄生虫活性 | 第17-18页 |
| 1.2 喜树碱诱导细胞凋亡的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 同源建模和分子对接的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4 立题依据和研究思路 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 供试材料与主要仪器 | 第23-25页 |
| 2.1.1 供试细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 供试耗材及主要仪器： | 第24-25页 |
| 2.2 主要研究方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 昆虫Sf9细胞的传代培养 | 第25页 |
| 2.2.2 昆虫细胞的冻存与复苏 | 第25-26页 |
| 2.2.3 喜树碱及其衍生物对Sf9细胞增值抑制检测 | 第26页 |
| 2.2.4 IPCM形态特征检测 | 第26页 |
| 2.2.5 喜树碱及其衍生物抑制TopoⅠ活性分析 | 第26-27页 |
| 2.2.6 草地贪夜蛾的TopoⅠ的克隆以及序列分析 | 第27-32页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳的DNA片段化检测 | 第32页 |
| 2.2.8 CPTA诱导Sf9细胞形态特征分析 | 第32-33页 |
| 2.2.9 CPTA-1, 3, 9, 11诱导Sf9细胞凋亡FCM分析 | 第33-34页 |
| 2.2.10 荧光定量PCR测定Cyt C、Caspase 9 表达量 | 第34-35页 |
| 2.2.11 TopoⅠ同源建模及分子对接研究方法 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-76页 |
| 3.1 昆虫细胞的传代培养与冻存、复苏结果 | 第39页 |
| 3.2 喜树碱衍生物对SF9细胞增殖抑制作用 | 第39-41页 |
| 3.3 喜树碱衍生物对TOPOⅠ的抑制活性 | 第41页 |
| 3.4 SF9细胞TOPOⅠ编码区的克隆和序列分析 | 第41-53页 |
| 3.4.1 总RNA提取 | 第41-42页 |
| 3.4.2 编码区克隆 | 第42页 |
| 3.4.3 基因编码区及氨基酸序列 | 第42-46页 |
| 3.4.4 序列结构分析 | 第46-53页 |
| 3.5 喜树碱衍生物对SF9细胞的凋亡作用 | 第53-64页 |
| 3.5.1 IPCM形态特征 | 第53-56页 |
| 3.5.2 琼脂糖凝胶电泳的DNA降解检测 | 第56页 |
| 3.5.3 荧光染色检测凋亡 | 第56-59页 |
| 3.5.4 碘化丙啶(PI)单染分析细胞周期 | 第59-60页 |
| 3.5.5 Annexin V-FITC/ PI双染测凋亡率 | 第60-62页 |
| 3.5.6 Cyt C与Casepase 9 相对表达量 | 第62-64页 |
| 3.6 同源建模蛋白的分子对接 | 第64-76页 |
| 3.6.1 分子对接能量结果 | 第64-65页 |
| 3.6.2 CDOCKER键能参数设置 | 第65-66页 |
| 3.6.3 CDOCKER对接结果 | 第66-76页 |
| 4 结论与讨论 | 第76-84页 |
| 4.1 结论 | 第76页 |
| 4.2 讨论 | 第76-84页 |
| 4.2.1 喜树碱衍生物作用于TopoⅠ的分析 | 第76-77页 |
| 4.2.2 喜树碱衍生物对Sf9细胞增殖抑制作用分析 | 第77-79页 |
| 4.2.3 Sf9细胞TopoⅠ基因与蛋白的特征 | 第79-80页 |
| 4.2.4 喜树碱衍生物诱导Sf9细胞凋亡作用分析 | 第80-82页 |
| 4.2.5 喜树碱衍生物- TopoⅠ-DNA分子对接分析 | 第82-83页 |
| 4.2.6 有待进一步研究的内容 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95页 |
