中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
前 言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
1.1 毛状根的培养和应用 | 第13-19页 |
1.1.1 毛状根培养体系的建立 | 第13-14页 |
1.1.2 毛状根的特性 | 第14-15页 |
1.1.3 影响毛状根培养和次生代谢产物形成的因素 | 第15-16页 |
1.1.4 毛状根培养技术的应用研究进展 | 第16-19页 |
1.1.4.1 生产次生代谢产物 | 第16-17页 |
1.1.4.2 毛状根培养的放大和生物反应器的研究 | 第17-18页 |
1.1.4.3 为新药筛选提供材料 | 第18页 |
1.1.4.4 获得转基因植株和改良植物品种 | 第18页 |
1.1.4.5 植物代谢工程研究 | 第18-19页 |
1.2 丹参 | 第19-27页 |
1.2.1 丹参的主要化学成分 | 第20-22页 |
1.2.1.1 二萜类化合物 | 第20页 |
1.2.1.2 酚酸类化合物 | 第20-22页 |
1.2.1.3 其他化合物 | 第22页 |
1.2.2 丹参的药理作用 | 第22页 |
1.2.3 临床应用的丹参制剂 | 第22-23页 |
1.2.4 丹参的组织培养 | 第23-27页 |
1.2.4.1 离体克隆培养增殖丹参试管苗 | 第23-24页 |
1.2.4.2 人工诱导丹参多倍体的研究 | 第24页 |
1.2.4.3 丹参的细胞培养与活性成分的产生 | 第24-25页 |
1.2.4.4 转化的丹参组织和器官培养与活性成分的产生 | 第25-27页 |
1.3 提高次生代谢产物产量的方法 | 第27-36页 |
1.3.1 诱导子技术 | 第27-31页 |
1.3.1.1 诱导子的分类和选择 | 第28页 |
1.3.1.2 诱导子的作用特点 | 第28-29页 |
1.3.1.3 诱导子的作用机制 | 第29-30页 |
1.3.1.4 诱导子在毛状根培养中的应用 | 第30-31页 |
1.3.2 两相培养技术 | 第31-35页 |
1.3.2.1 两相培养的分类和第二相的选择原则 | 第31-32页 |
1.3.2.2 固-液两相系统在次生代谢产物生产中的应用 | 第32-35页 |
1.3.3 半连续培养技术 | 第35-36页 |
1.4 本文主要研究内容 | 第36-37页 |
第二章 丹参毛状根悬浮培养的基本性质 | 第37-44页 |
2.1 实验材料和方法 | 第37-39页 |
2.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第37页 |
2.1.2 毛状根湿重和干重的测定 | 第37页 |
2.1.3 丹参酮的提取和含量测定 | 第37-38页 |
2.1.4 可溶性总糖的含量测定 | 第38页 |
2.1.5 培养液电导率的测定 | 第38-39页 |
2.2 结果与讨论 | 第39-42页 |
2.2.1 悬浮培养丹参毛状根的形态学特征 | 第39页 |
2.2.2 丹参毛状根悬浮培养生长、丹参酮合成以及底物消耗的动力学过程 | 第39-41页 |
2.2.3 培养过程中生物量与底物消耗的计量关系 | 第41页 |
2.2.4 丹参毛状根悬浮培养过程中电导率的变化 | 第41-42页 |
2.3 小结 | 第42-43页 |
附图 | 第43-44页 |
第三章 诱导作用对丹参毛状根生长和合成丹参酮的影响 | 第44-54页 |
3.1 实验材料和方法 | 第44-45页 |
3.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第44页 |
3.1.2 生物诱导子的制备 | 第44-45页 |
3.1.3 非生物诱导子的制备 | 第45页 |
3.1.4 毛状根干重的测定 | 第45页 |
3.1.5 丹参酮的提取和含量测定 | 第45页 |
3.1.6 诱导实验方案 | 第45页 |
3.1.6.1 生物和非生物诱导子的作用效果实验 | 第45页 |
3.1.6.2 诱导子协同作用实验 | 第45页 |
3.2 结果与讨论 | 第45-52页 |
3.2.1 生物和非生物诱导子的作用效果 | 第45-48页 |
3.2.1.1 生物诱导子对丹参毛状根生长和总丹参酮产量的影响 | 第46页 |
3.2.1.2 非生物诱导子对丹参毛状根生长和总丹参酮产量的影响 | 第46-47页 |
3.2.1.3 诱导子对不同丹参酮诱导效果的比较 | 第47页 |
3.2.1.4 讨论 | 第47-48页 |
3.2.2 诱导子的协同作用效果试验 | 第48-52页 |
3.2.2.1 诱导子Yeast extract和Ag~+协同作用的效果 | 第49-50页 |
3.2.2.2 诱导子Yeast extract和Co~(2+)协同作用的效果 | 第50-51页 |
3.2.2.3 诱导子Yeast extract和AIB协同作用的效果 | 第51页 |
3.2.2.4 讨论 | 第51-52页 |
3.3 小结 | 第52-54页 |
第四章 质膜 Ca~(2+)内流在诱导子诱导丹参毛状根积累丹参酮过程中的作用研究 | 第54-62页 |
4.1 实验材料和方法 | 第54-55页 |
4.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第54页 |
4.1.2 毛状根干重的测定 | 第54页 |
4.1.3 丹参酮的提取和含量测定 | 第54-55页 |
4.1.4 诱导子的制备 | 第55页 |
4.1.5 Ca~(2+)拮抗剂和离子载体的配制 | 第55页 |
4.1.6 实验方案 | 第55页 |
4.1.6.1 Ca~(2+)拮抗剂以及离子载体的作用效果实验 | 第55页 |
4.1.6.2 诱导子诱导丹参酮的生产对外源Ca~(2+)的依赖性实验 | 第55页 |
4.2 结果与讨论 | 第55-61页 |
4.2.1 各种诱导子和Ca~(2+)拮抗剂对丹参酮合成的影响 | 第55-56页 |
4.2.2 Ca~(2+)拮抗剂和离子载体对诱导子诱导丹参酮合成的影响 | 第56-57页 |
4.2.3 Ca~(2+)离子浓度对诱导子诱导丹参酮合成的影响 | 第57-58页 |
4.2.4 诱导子和Ca~(2+)拮抗剂对毛状根生长的影响 | 第58页 |
4.2.5 讨论 | 第58-61页 |
4.3 小结 | 第61-62页 |
第五章 胞外吸附、诱导子作用和半连续培养对丹参酮生产和回收的协同作用研究 | 第62-74页 |
5.1 实验材料和方法 | 第63-65页 |
5.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第63页 |
5.1.2 毛状根干重的测定 | 第63页 |
5.1.3 丹参酮的提取和含量测定 | 第63页 |
5.1.4 诱导子的制备 | 第63-64页 |
5.1.5 吸附剂的准备 | 第64页 |
5.1.6 实验方案 | 第64-65页 |
5.1.6.1 树脂X-5对丹参酮的吸附实验研究 | 第64-65页 |
5.1.6.2 胞外吸附、诱导子作用和培养液更新实验 | 第65页 |
5.2 结果与讨论 | 第65-73页 |
5.2.1 树脂X-5对丹参毛状根生长、丹参酮合成和释放的影响 | 第65-66页 |
5.2.2 树脂X-5吸附丹参酮以及丹参酮在两相中分布的研究 | 第66-68页 |
5.2.3 诱导作用和树脂胞外吸附的联合作用效果 | 第68-70页 |
5.2.4 诱导作用、胞外吸附作用和培养液更新组合多次处理的效果 | 第70-71页 |
5.2.5 讨论 | 第71-73页 |
5.3 小结 | 第73页 |
附图 | 第73-74页 |
第六章 诱导和吸附作用下丹参酮合成和分布的动力学模型 | 第74-93页 |
6.1 实验材料和方法 | 第74-75页 |
6.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第74页 |
6.1.2 毛状根干重的测定 | 第74页 |
6.1.3 诱导子的制备 | 第74-75页 |
6.1.4 吸附剂的准备 | 第75页 |
6.1.5 DXS酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase)活力的测定 | 第75页 |
6.1.6 丹参酮的提取和含量测定 | 第75页 |
6.1.7 动力学实验 | 第75页 |
6.2 模型的建立 | 第75-79页 |
6.3 计算方法简介 | 第79-81页 |
6.4 模型参数求解 | 第81-83页 |
6.5 模型模拟 | 第83-88页 |
6.5.1 不同培养条件下丹参酮合成和分布的模拟 | 第83-86页 |
6.5.2 调整模型参数对丹参酮合成和分布的模拟 | 第86-88页 |
6.6 参数敏感度分析 | 第88-91页 |
6.7 小结 | 第91页 |
本章符号表 | 第91-93页 |
第七章 诱导子诱导丹参毛状根中迷迭香酸的积累和相关酶活的变化 | 第93-102页 |
7.1 实验材料和方法 | 第93-96页 |
7.1.1 丹参毛状根的悬浮培养 | 第93-94页 |
7.1.2 毛状根干重的测定 | 第94页 |
7.1.3 诱导子的制备 | 第94页 |
7.1.4 RA 的提取和含量测定 | 第94-95页 |
7.1.5 总酚的提取和含量测定 | 第95页 |
7.1.6 酶活的测定 | 第95-96页 |
7.2 结果与讨论 | 第96-101页 |
7.2.1 诱导子对RA和总酚积累的影响 | 第96-97页 |
7.2.2 诱导子对PAL和TAT酶活力的影响 | 第97-98页 |
7.2.3 诱导子作用下RA和总酚含量变化的动力学过程 | 第98-99页 |
7.2.4 诱导子作用下PAL和TAT酶活变化的动力学过程 | 第99-100页 |
7.2.5 讨论 | 第100-101页 |
7.3 小结 | 第101-102页 |
第八章 总结与展望 | 第102-106页 |
8.1 总结 | 第102-104页 |
8.2 今后研究工作的设想 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-122页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第122-123页 |
附录 | 第123-126页 |
致谢 | 第126页 |