摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第1章 文献综述 | 第15-23页 |
1.1 非肌细胞肌球蛋白概述 | 第15-16页 |
1.1.1 非肌细胞肌球蛋白Ⅱ(Nonmuscle myosinⅡ, NMⅡ) | 第15-16页 |
1.1.2 非肌细胞肌球蛋白ⅡA(Nonmuscle myosinⅡA, NMⅡA)与细胞运动 | 第16页 |
1.2 肿瘤微环境 | 第16-21页 |
1.2.1 肿瘤细胞代谢 | 第17页 |
1.2.2 肿瘤的酸性环境 | 第17-18页 |
1.2.3 肿瘤细胞代谢与肿瘤转移 | 第18-20页 |
1.2.3.1 肿瘤转移 | 第18-19页 |
1.2.3.2 肿瘤的酸性环境与肿瘤转移 | 第19-20页 |
1.2.4 AKT在肿瘤细胞代谢和转移中的作用 | 第20-21页 |
1.3 酸性环境、NMHC与肿瘤转移 | 第21-23页 |
第2章 实验材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-30页 |
2.1.1 细胞株 | 第23页 |
2.1.2 标本 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23-25页 |
2.1.4 主要设备与仪器 | 第25-26页 |
2.1.5 主要试剂配制 | 第26-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-36页 |
2.2.1 细胞培养与传代 | 第30页 |
2.2.2 细胞复苏 | 第30页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第30-31页 |
2.2.4 免疫组织化学染色 | 第31-32页 |
2.2.5 CCK-8 法绘制细胞生长曲线 | 第32页 |
2.2.6 细胞划痕实验 | 第32-33页 |
2.2.7 细胞周期检测 | 第33页 |
2.2.8 Western Blot | 第33-34页 |
2.2.9 细胞铺展实验 | 第34-35页 |
2.2.10 Transwell小室体外侵袭实验 | 第35页 |
2.2.11 上清液乳酸含量检测 | 第35-36页 |
2.3 统计学分析 | 第36-37页 |
第3章 结果 | 第37-49页 |
3.1 乳腺组织中,pAKT、LDH和NMHCIIA的表达情况 | 第37-40页 |
3.1.1 pAKT在乳腺组织中的表达 | 第37-38页 |
3.1.2 LDH在乳腺组织中的表达 | 第38-39页 |
3.1.3 乳腺组织中NMHCIIA的表达情况 | 第39-40页 |
3.2 乳腺癌MCF-7 细胞中,通过抑制AKT来降低乳酸含量,从而观察酸性环境对NMHCIIA的调节作用及MCF-7 细胞生物学行为的影响 | 第40-49页 |
3.2.1 加入MK2206后,pAKT的变化 | 第40-41页 |
3.2.2 AKT被抑制后,培养液中乳酸变化 | 第41页 |
3.2.3 AKT被抑制后,NMHCIIA表达的变化 | 第41-42页 |
3.2.4 各组细胞MK2206处理后生物学行为的变化 | 第42-49页 |
3.2.4.1 抑制AKT表达对细胞的增殖能力的影响 | 第42-43页 |
3.2.4.2 抑制AKT表达对细胞周期的影响 | 第43-44页 |
3.2.4.3 抑制AKT表达对细胞铺展的影响 | 第44-46页 |
3.2.4.4 抑制AKT表达对各组细胞迁移能力的影响 | 第46-47页 |
3.2.4.5 抑制AKT表达后各组细胞侵袭力的变化 | 第47-49页 |
第4章 讨论 | 第49-54页 |
4.1 乳腺组织中AKT与乳酸的表达情况 | 第49-50页 |
4.2 抑制AKT影响乳酸代谢对NMHC IIA的作用 | 第50-51页 |
4.3 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞的生物学行为 | 第51-54页 |
4.3.1 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞的增殖能力 | 第51-52页 |
4.3.2 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞迁移和侵袭 | 第52-54页 |
第5章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
作者简介及在读期间取得的科研成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |