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米胚谷氨酸脱羧酶性质及其富集γ-氨基丁酸研究

缩略表第8-9页
摘 要Ⅰ第9-11页
ABSTRACT Ⅲ第11页
第一章 绪论第13-30页
    1.1 γ-氨基丁酸(GABA)概述第13-16页
        1.1.1 GABA的合成与分解代谢第13-14页
        1.1.2 GABA的生理作用第14-16页
            1.1.2.1 GABA的心血管调节作用第14页
            1.1.2.2 GABA的神经营养作用第14-15页
            1.1.2.3 GABA促进生长激素分泌作用第15页
            1.1.2.4 GABA有助于抗衰老第15-16页
        1.1.3 GABA的制备第16页
    1.2 谷氨酸脱羧酶(GAD)概述第16-21页
        1.2.1 植物中的GAD第16-18页
        1.2.2 动物中的GAD第18页
        1.2.3 微生物中的GAD第18-19页
        1.2.4 GAD的活性调节第19-20页
        1.2.5 GAD的应用第20-21页
    1.3 GABA类食品的研究开发进展第21页
    1.4 立题的意义第21-23页
    1.5 研究的主要内容第23-24页
    主要参考文献第24-30页
第二章 γ-氨基丁酸测定方法的研究第30-39页
    2.1 前言第30页
    2.2 材料与方法第30-32页
        2.2.1 主要实验材料第30页
        2.2.2 主要实验方法第30-32页
    2.3 结果与讨论第32-37页
        2.3.1 HPLC法测定GABA第32页
        2.3.2 比色法测定GABA第32-34页
            2.3.2.1 苯酚浓度对A645的影响第32-33页
            2.3.2.2 次氯酸钠有效氯含量对A645的影响第33页
            2.3.2.3 标准曲线绘制第33页
            2.3.2.4 样品测定结果第33-34页
        2.3.3 纸层析法测定GABA第34-37页
            2.3.3.1 展开剂和显色剂浓度选择第34页
            2.3.3.2 显色温度和时间的选择第34-35页
            2.3.3.3 颜色稳定性确定第35页
            2.3.3.4 测定范围的确定第35-36页
            2.3.3.5 标准曲线绘制第36页
            2.3.3.6 精密度测定第36页
            2.3.3.7 回收率测定第36页
            2.3.3.8 纸层析法与HPLC法比较第36-37页
    2.4 本章小结第37-38页
    参考文献第38-39页
第三章 米胚谷氨酸脱羧酶的分离纯化与鉴定第39-53页
    3.1 前言第39页
    3.2 材料与方法第39-42页
        3.2.1 实验材料第39-40页
        3.2.2 主要实验方法第40-42页
    3.3 结果与讨论第42-51页
        3.3.1 米胚GAD的分离纯化第42-48页
            3.3.1.1 (NH4)2SO4分级沉淀第42页
            3.3.1.2 米胚GAD粗酶液的分子质量分布第42-43页
            3.3.1.3 粗酶液在DEAE-Sephrose FF上的吸附第43-44页
            3.3.1.4 DEAE-Sephrose FF离子交换色谱第44-45页
            3.3.1.5 Superdex 200 凝胶过滤色谱第45-46页
            3.3.1.6 Glu Sephrose CL 4B亲和层析第46-47页
            3.3.1.7 纯化结果第47-48页
        3.3.2 米胚GAD相对分子质量测定第48-49页
        3.3.3 米胚GAD亚基相对分子质量测定第49-50页
        3.3.4 米胚GAD的氨基酸组成第50-51页
    3.4 本章小结第51页
    参考文献第51-53页
第四章 米胚谷氨酸脱羧酶的酶学和光谱性质研究第53-69页
    4.1 引言第53页
    4.2 材料与方法第53-54页
        4.2.1 主要实验材料第53页
        4.2.2 主要实验方法第53-54页
    4.3 结果与讨论第54-66页
        4.3.1 温度对米胚GAD的影响第54-55页
            4.3.1.1 温度对米胚GAD活性的影响第55页
            4.3.1.2 温度对米胚GAD稳定性的影响第55页
        4.3.2 pH对米胚GAD的影响第55-56页
            4.3.2.1 pH对米胚GAD酶活力的影响第55-56页
            4.3.2.2 pH值对米胚GAD稳定性的影响第56页
        4.3.3 米胚GAD的动力学常数第56-59页
            4.3.3.1 对Glu的动力学常数第56-57页
            4.3.3.2 对PLP的动力学常数第57-59页
        4.3.4 金属离子和其它化学物质对米胚GAD的影响第59-60页
        4.3.5 Ca2+对米胚GAD的激活动力学第60-61页
        4.3.6 PLP对脱辅基GAD活性的影响第61-62页
        4.3.7 米胚GAD的光谱学特性第62-63页
        4.3.8 米胚GAD的荧光光谱特性第63-65页
        4.3.9 米胚GAD的CD光谱分析第65-66页
    4.4 本章小结第66-67页
    参考文献第67-69页
第五章 米胚谷氨酸脱羧酶氨基酸残基的化学修饰研究第69-80页
    5.1 前言第69页
    5.2 材料与方法第69-71页
        5.2.1 主要实验材料第69-70页
        5.2.2 主要实验方法第70-71页
    5.3 结果与讨论第71-78页
        5.3.1 米胚GAD的氨基酸修饰第71-74页
            5.3.1.1 His残基的化学修饰第71-72页
            5.3.1.2 Arg残基的化学修饰第72-73页
            5.3.1.3 底物保护作用第73-74页
        5.3.2 化学修饰对米胚GAD结构的影响第74-78页
            5.3.2.1 米胚GAD的荧光分析第74-75页
            5.3.2.2 米胚GAD的CD光谱分析第75-78页
    5.4 本章小结第78页
    参考文献第78-80页
第六章 富含γ-氨基丁酸米胚制备工艺的研究第80-94页
    6.1 前言第80页
    6.2 材料与方法第80-82页
        6.2.1 主要实验材料第80页
        6.2.2 主要实验方法第80-82页
    6.3 结果与讨论第82-92页
        6.3.1 米胚蛋白氨基酸组成第82页
        6.3.2 米胚的GAD活性第82页
        6.3.3 GABA-RG1制备工艺的研究第82-84页
            6.3.3.1 GABA-RG1制备工艺的优化第82-83页
            6.3.3.2 Ca2+激活GAD对GABA富集的影响第83-84页
        6.3.4 GABA-RG2制备工艺的研究第84-88页
            6.3.4.1 胰蛋白酶和碱性蛋白酶对米胚蛋白的水解第84-85页
            6.3.4.2 胰蛋白酶水解米胚蛋白工艺的优化第85-86页
            6.3.4.3 米胚蛋白水解液中富集GABA的工艺研究第86-88页
        6.3.5 GABA-RG3制备工艺的研究第88-91页
            6.3.5.1 反应时间对GABA产量的影响第88页
            6.3.5.2 不同缓冲液对GABA产量的影响第88-89页
            6.3.5.3 磷酸缓冲液离子强度对GABA产量的影响第89页
            6.3.5.4 米胚与缓冲液料液比对GABA产量的影响第89-90页
            6.3.5.5 PLP激活GAD对GABA产量的影响第90页
            6.3.5.6 Ca2+激活GAD对GABA产量的影响第90-91页
            6.3.5.7 米胚与Glu之比对GABA产量和Glu转化率的影响第91页
        6.3.6 GABA-RG的组成成分第91-92页
    6.4 本章小结第92页
    参考文献第92-94页
第七章 GABA米胚促进小鼠生长激素分泌和提高运动能力研究第94-106页
    7.1 前言第94页
    7.2 材料与方法第94-98页
        7.2.1 主要实验材料第94-95页
        7.2.2 主要实验方法第95-98页
    7.3 结果与讨论第98-103页
        7.3.1 GABA-RG的急性毒性第98页
        7.3.2 各剂量组对小鼠体重的影响第98页
        7.3.3 各剂量组对小鼠血清生长激素的影响第98-99页
        7.3.4 各剂量组对小鼠后腿肌重的影响第99-100页
        7.3.5 各剂量组对小鼠力竭游泳时间的影响第100页
        7.3.6 各剂量组对小鼠肌肉静力的影响第100-101页
        7.3.7 各剂量组对小鼠生化指标的影响第101-103页
            7.3.7.1 血乳酸第101页
            7.3.7.2 血清尿素氮第101-102页
            7.3.7.3 肝糖原第102-103页
    7.4 本章小节第103-104页
    参考文献第104-106页
论文主要结论和创新点第106-109页
致谢第109-110页
攻读博士论文期间发表的论文第110页

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