缩略表 | 第8-9页 |
摘 要Ⅰ | 第9-11页 |
ABSTRACT Ⅲ | 第11页 |
第一章 绪论 | 第13-30页 |
1.1 γ-氨基丁酸(GABA)概述 | 第13-16页 |
1.1.1 GABA的合成与分解代谢 | 第13-14页 |
1.1.2 GABA的生理作用 | 第14-16页 |
1.1.2.1 GABA的心血管调节作用 | 第14页 |
1.1.2.2 GABA的神经营养作用 | 第14-15页 |
1.1.2.3 GABA促进生长激素分泌作用 | 第15页 |
1.1.2.4 GABA有助于抗衰老 | 第15-16页 |
1.1.3 GABA的制备 | 第16页 |
1.2 谷氨酸脱羧酶(GAD)概述 | 第16-21页 |
1.2.1 植物中的GAD | 第16-18页 |
1.2.2 动物中的GAD | 第18页 |
1.2.3 微生物中的GAD | 第18-19页 |
1.2.4 GAD的活性调节 | 第19-20页 |
1.2.5 GAD的应用 | 第20-21页 |
1.3 GABA类食品的研究开发进展 | 第21页 |
1.4 立题的意义 | 第21-23页 |
1.5 研究的主要内容 | 第23-24页 |
主要参考文献 | 第24-30页 |
第二章 γ-氨基丁酸测定方法的研究 | 第30-39页 |
2.1 前言 | 第30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-32页 |
2.2.1 主要实验材料 | 第30页 |
2.2.2 主要实验方法 | 第30-32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-37页 |
2.3.1 HPLC法测定GABA | 第32页 |
2.3.2 比色法测定GABA | 第32-34页 |
2.3.2.1 苯酚浓度对A645的影响 | 第32-33页 |
2.3.2.2 次氯酸钠有效氯含量对A645的影响 | 第33页 |
2.3.2.3 标准曲线绘制 | 第33页 |
2.3.2.4 样品测定结果 | 第33-34页 |
2.3.3 纸层析法测定GABA | 第34-37页 |
2.3.3.1 展开剂和显色剂浓度选择 | 第34页 |
2.3.3.2 显色温度和时间的选择 | 第34-35页 |
2.3.3.3 颜色稳定性确定 | 第35页 |
2.3.3.4 测定范围的确定 | 第35-36页 |
2.3.3.5 标准曲线绘制 | 第36页 |
2.3.3.6 精密度测定 | 第36页 |
2.3.3.7 回收率测定 | 第36页 |
2.3.3.8 纸层析法与HPLC法比较 | 第36-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-39页 |
第三章 米胚谷氨酸脱羧酶的分离纯化与鉴定 | 第39-53页 |
3.1 前言 | 第39页 |
3.2 材料与方法 | 第39-42页 |
3.2.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.2.2 主要实验方法 | 第40-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-51页 |
3.3.1 米胚GAD的分离纯化 | 第42-48页 |
3.3.1.1 (NH4)2SO4分级沉淀 | 第42页 |
3.3.1.2 米胚GAD粗酶液的分子质量分布 | 第42-43页 |
3.3.1.3 粗酶液在DEAE-Sephrose FF上的吸附 | 第43-44页 |
3.3.1.4 DEAE-Sephrose FF离子交换色谱 | 第44-45页 |
3.3.1.5 Superdex 200 凝胶过滤色谱 | 第45-46页 |
3.3.1.6 Glu Sephrose CL 4B亲和层析 | 第46-47页 |
3.3.1.7 纯化结果 | 第47-48页 |
3.3.2 米胚GAD相对分子质量测定 | 第48-49页 |
3.3.3 米胚GAD亚基相对分子质量测定 | 第49-50页 |
3.3.4 米胚GAD的氨基酸组成 | 第50-51页 |
3.4 本章小结 | 第51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
第四章 米胚谷氨酸脱羧酶的酶学和光谱性质研究 | 第53-69页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 材料与方法 | 第53-54页 |
4.2.1 主要实验材料 | 第53页 |
4.2.2 主要实验方法 | 第53-54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-66页 |
4.3.1 温度对米胚GAD的影响 | 第54-55页 |
4.3.1.1 温度对米胚GAD活性的影响 | 第55页 |
4.3.1.2 温度对米胚GAD稳定性的影响 | 第55页 |
4.3.2 pH对米胚GAD的影响 | 第55-56页 |
4.3.2.1 pH对米胚GAD酶活力的影响 | 第55-56页 |
4.3.2.2 pH值对米胚GAD稳定性的影响 | 第56页 |
4.3.3 米胚GAD的动力学常数 | 第56-59页 |
4.3.3.1 对Glu的动力学常数 | 第56-57页 |
4.3.3.2 对PLP的动力学常数 | 第57-59页 |
4.3.4 金属离子和其它化学物质对米胚GAD的影响 | 第59-60页 |
4.3.5 Ca2+对米胚GAD的激活动力学 | 第60-61页 |
4.3.6 PLP对脱辅基GAD活性的影响 | 第61-62页 |
4.3.7 米胚GAD的光谱学特性 | 第62-63页 |
4.3.8 米胚GAD的荧光光谱特性 | 第63-65页 |
4.3.9 米胚GAD的CD光谱分析 | 第65-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-69页 |
第五章 米胚谷氨酸脱羧酶氨基酸残基的化学修饰研究 | 第69-80页 |
5.1 前言 | 第69页 |
5.2 材料与方法 | 第69-71页 |
5.2.1 主要实验材料 | 第69-70页 |
5.2.2 主要实验方法 | 第70-71页 |
5.3 结果与讨论 | 第71-78页 |
5.3.1 米胚GAD的氨基酸修饰 | 第71-74页 |
5.3.1.1 His残基的化学修饰 | 第71-72页 |
5.3.1.2 Arg残基的化学修饰 | 第72-73页 |
5.3.1.3 底物保护作用 | 第73-74页 |
5.3.2 化学修饰对米胚GAD结构的影响 | 第74-78页 |
5.3.2.1 米胚GAD的荧光分析 | 第74-75页 |
5.3.2.2 米胚GAD的CD光谱分析 | 第75-78页 |
5.4 本章小结 | 第78页 |
参考文献 | 第78-80页 |
第六章 富含γ-氨基丁酸米胚制备工艺的研究 | 第80-94页 |
6.1 前言 | 第80页 |
6.2 材料与方法 | 第80-82页 |
6.2.1 主要实验材料 | 第80页 |
6.2.2 主要实验方法 | 第80-82页 |
6.3 结果与讨论 | 第82-92页 |
6.3.1 米胚蛋白氨基酸组成 | 第82页 |
6.3.2 米胚的GAD活性 | 第82页 |
6.3.3 GABA-RG1制备工艺的研究 | 第82-84页 |
6.3.3.1 GABA-RG1制备工艺的优化 | 第82-83页 |
6.3.3.2 Ca2+激活GAD对GABA富集的影响 | 第83-84页 |
6.3.4 GABA-RG2制备工艺的研究 | 第84-88页 |
6.3.4.1 胰蛋白酶和碱性蛋白酶对米胚蛋白的水解 | 第84-85页 |
6.3.4.2 胰蛋白酶水解米胚蛋白工艺的优化 | 第85-86页 |
6.3.4.3 米胚蛋白水解液中富集GABA的工艺研究 | 第86-88页 |
6.3.5 GABA-RG3制备工艺的研究 | 第88-91页 |
6.3.5.1 反应时间对GABA产量的影响 | 第88页 |
6.3.5.2 不同缓冲液对GABA产量的影响 | 第88-89页 |
6.3.5.3 磷酸缓冲液离子强度对GABA产量的影响 | 第89页 |
6.3.5.4 米胚与缓冲液料液比对GABA产量的影响 | 第89-90页 |
6.3.5.5 PLP激活GAD对GABA产量的影响 | 第90页 |
6.3.5.6 Ca2+激活GAD对GABA产量的影响 | 第90-91页 |
6.3.5.7 米胚与Glu之比对GABA产量和Glu转化率的影响 | 第91页 |
6.3.6 GABA-RG的组成成分 | 第91-92页 |
6.4 本章小结 | 第92页 |
参考文献 | 第92-94页 |
第七章 GABA米胚促进小鼠生长激素分泌和提高运动能力研究 | 第94-106页 |
7.1 前言 | 第94页 |
7.2 材料与方法 | 第94-98页 |
7.2.1 主要实验材料 | 第94-95页 |
7.2.2 主要实验方法 | 第95-98页 |
7.3 结果与讨论 | 第98-103页 |
7.3.1 GABA-RG的急性毒性 | 第98页 |
7.3.2 各剂量组对小鼠体重的影响 | 第98页 |
7.3.3 各剂量组对小鼠血清生长激素的影响 | 第98-99页 |
7.3.4 各剂量组对小鼠后腿肌重的影响 | 第99-100页 |
7.3.5 各剂量组对小鼠力竭游泳时间的影响 | 第100页 |
7.3.6 各剂量组对小鼠肌肉静力的影响 | 第100-101页 |
7.3.7 各剂量组对小鼠生化指标的影响 | 第101-103页 |
7.3.7.1 血乳酸 | 第101页 |
7.3.7.2 血清尿素氮 | 第101-102页 |
7.3.7.3 肝糖原 | 第102-103页 |
7.4 本章小节 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-106页 |
论文主要结论和创新点 | 第106-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
攻读博士论文期间发表的论文 | 第110页 |